y****c 发帖数: 7 | 1 我现在在做有关RNA的试验,但是由于它比较容易降解,所以试验重复性不好。 有什么窍
门能保持它的稳定性吗? 谢谢。 |
s***l 发帖数: 42 | 2 多做一些aliquot, 藏在-80度,有一套专门的buffer用于作RNA的实验,包括乙醇,
甲醇什么的,坚决不能用于DNA的实验。【 在 yzhanc (子曰) 的大作中提到: 】
窍 |
y****c 发帖数: 7 | 3 非常感谢。
我还有一个问题。在储存之前应该用水还是其他的有机溶剂溶解。有人跟我说也许用乙醇
比用水好。你认为呢?
再次感谢。
么
【在 s***l 的大作中提到】 : 多做一些aliquot, 藏在-80度,有一套专门的buffer用于作RNA的实验,包括乙醇, : 甲醇什么的,坚决不能用于DNA的实验。【 在 yzhanc (子曰) 的大作中提到: 】 : 窍
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k**e 发帖数: 2728 | 4 en?
非极性溶剂是destablize nucleotides的啊。我没有做过跟RNA相关的实验,但是RNA是
应该避免碱性条件,至于用水还是用乙醇,我认为用水好点。因为水是极性的分子,可以
稳定RNA的结构
还有nucleotides之类的东西,以及NTP、dNTPs啦等溶液的储存,应该是根据自己每次实验
大概需要的量,aliquot到separate tubes里头。每次实验只拿出一个tube来解冻,争取1
次到2次的实验就能把那个tube的样品用完。
【在 y****c 的大作中提到】 : 非常感谢。 : 我还有一个问题。在储存之前应该用水还是其他的有机溶剂溶解。有人跟我说也许用乙醇 : 比用水好。你认为呢? : 再次感谢。 : : 么
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y****c 发帖数: 7 | 5 谢谢。非常感谢。
顺便说一句,我喜欢你的签名档。
以
实验
取1
乙醇
,
【在 k**e 的大作中提到】 : en? : 非极性溶剂是destablize nucleotides的啊。我没有做过跟RNA相关的实验,但是RNA是 : 应该避免碱性条件,至于用水还是用乙醇,我认为用水好点。因为水是极性的分子,可以 : 稳定RNA的结构 : 还有nucleotides之类的东西,以及NTP、dNTPs啦等溶液的储存,应该是根据自己每次实验 : 大概需要的量,aliquot到separate tubes里头。每次实验只拿出一个tube来解冻,争取1 : 次到2次的实验就能把那个tube的样品用完。
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k**e 发帖数: 2728 | 6 不谢:)
我很高兴能帮助你。
【在 y****c 的大作中提到】 : 谢谢。非常感谢。 : 顺便说一句,我喜欢你的签名档。 : : 以 : 实验 : 取1 : 乙醇 : ,
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x***g 发帖数: 923 | 7 牛,
补充一点点,在TE里面最稳定吧?呵呵
【在 k**e 的大作中提到】 : en? : 非极性溶剂是destablize nucleotides的啊。我没有做过跟RNA相关的实验,但是RNA是 : 应该避免碱性条件,至于用水还是用乙醇,我认为用水好点。因为水是极性的分子,可以 : 稳定RNA的结构 : 还有nucleotides之类的东西,以及NTP、dNTPs啦等溶液的储存,应该是根据自己每次实验 : 大概需要的量,aliquot到separate tubes里头。每次实验只拿出一个tube来解冻,争取1 : 次到2次的实验就能把那个tube的样品用完。
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s***l 发帖数: 42 | 8 The best way is to store RNA in 70% ethanol with 0.08M sodium acetate.【 在
yzhanc (子曰) 的大作中提到: 】
醇
什 |
k**e 发帖数: 2728 | 9 RNA我没有做过跟它相关的实验,但是在生化里学过相关的东西。
DNA做的多些,其实根本就不用TE就挺好,用消毒的蒸馏水滤出DNA就是了,这样以后送
做sequencing的时候也不用担心溶液里的成分是否符合要求。
【在 x***g 的大作中提到】 : 牛, : 补充一点点,在TE里面最稳定吧?呵呵
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y****c 发帖数: 7 | 10 thanks to all guys who help me.
nucleotides的啊。我没有做过跟RNA相关的实验,但是RNA是
,可以
每次实验
,争取1
【在 k**e 的大作中提到】 : RNA我没有做过跟它相关的实验,但是在生化里学过相关的东西。 : DNA做的多些,其实根本就不用TE就挺好,用消毒的蒸馏水滤出DNA就是了,这样以后送 : 做sequencing的时候也不用担心溶液里的成分是否符合要求。
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x***g 发帖数: 923 | 11 nod,
我自己也是就用水
【在 k**e 的大作中提到】 : RNA我没有做过跟它相关的实验,但是在生化里学过相关的东西。 : DNA做的多些,其实根本就不用TE就挺好,用消毒的蒸馏水滤出DNA就是了,这样以后送 : 做sequencing的时候也不用担心溶液里的成分是否符合要求。
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k**f 发帖数: 485 | 12 18M的纯水,有机溶剂极性没水大,起到润滑油的作用,使RNA分解加速
【在 y****c 的大作中提到】 : 非常感谢。 : 我还有一个问题。在储存之前应该用水还是其他的有机溶剂溶解。有人跟我说也许用乙醇 : 比用水好。你认为呢? : 再次感谢。 : : 么
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t*****t 发帖数: 27 | 13 Avoid RNase contamination. UseDEPC-treated autoclaved H2O to dissolve RNA and
to make all the reagents for RNA assays.Wear gloves
Avoid repetitive freeze-thaw
窍
【在 y****c 的大作中提到】 : 我现在在做有关RNA的试验,但是由于它比较容易降解,所以试验重复性不好。 有什么窍 : 门能保持它的稳定性吗? 谢谢。
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