D*a
发帖数: 6830 | 1 还有要看你们当时是怎么决定的KO的strategy吧
像我们的老鼠敲掉的是跨膜蛋白的ligand结合位点的exon，然后敲掉之后在下一个exon
中造成移码突变，然后造成几个stop，这样就确保蛋白质没有作用。
还有我们的引物设计是这样的
引物a －－loxp－exon－－引物b－－loxp－－反向引物c
这样wt和lox是靠bc来区别，ac相比之下太长扩增效率很低，ko之后就是ac扩增，这样
wt lox excised都可以用这三个引物来区分。我觉得这种pcr比你的好些，要不你自己
重新设计引物试试吧。 |
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a********k
发帖数: 2273 | 2 zfn是给那些没有KO的模式生物用的，主要产生移码突变，不能用来做KI。
做起来和普通的KO一样贵，没啥优势。
BAC |
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m***o
发帖数: 272 | 3 找到知音了！我最近作很多PCR，用不同的酶，其中用clonetech家的GC2 polymerase的
时候少了一个exon，因为正好少的是一个exon，我就兴奋的以为发现了另外的剪切方式
，奶奶的，我都兴奋的通知老板了！后来一想不对劲，那个exon没了，会移码突变了。
后来我还是把它纯化了，想放到表达质粒去，因为量少，我就做了个nest pcr，用的
herculase 和GC2两个酶，结果呢，GC2又比herculase考出来的又小百把个bp，不问了
，我就放质粒去了，测出来呢，这回少了3个多exon，不过不是整个的exon了，所以我
就彻底断了继续下去的念头，还是老实的用原来的全序列了。这几天我正打算是不是跟
clonetech的客服联系，是不是可以给我点什么补偿呢？不过我确实觉得跟序列的二级
结构有关系，不知谁有这方面的文献。 |
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l**********k
发帖数: 189 | 4 如果是这样的话，又多了一种可能性。在mRNA上，不是所有情况下第一个ATG
都是起始密码子。前后的序列，比如Kozak序列，才是决定mRNA从哪里开始翻
译的起始位点。我怀疑还有一种可能性，因为你们破坏了A本身的ATG，Cre放
在了20bp之后。有可能Cre自己的ATG不能作为kozak或类似序列，所以，不能
被核糖体视为一个ORF的start codon，所以不能表达你的Cre。再往后面的
ATG, 即使有可能被视做一个ORF的起始密码字，也会造成移码（66％可能性）
或表达不完全。算作第E种可能性吧。
最简单的办法就是，把Cre放在后面的外显子里，可以用2A或IRES表达一个完整
的Cre蛋白，如果你不喜欢融合蛋白的话。分析原因毕竟不是你自己的课题。
愿你好运。 |
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b******s
发帖数: 1089 | 5 理论上是不是加上的3' overhang可以大于等于1？
如果这样必须测序确定具体数目防止后续克隆有移码？
200-300%量 |
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s******y
发帖数: 28562 | 6 把质粒从头到尾测个续不就完了么？你既然知道部分序列，用它来设计引物
就好了，或者用你克隆进去的序列来设计引物。然后一段接一段的设计引物，
直接把全序列测完为止
还有，你可以把质粒先用来短暂转染细胞来表达蛋白么？如果可以的话那就更
简单了，表达之后用western blot 测一下，如果能够和抗体特异反应就说明
氨基酸序列是对的，再看看大小对不对，就好了。 |
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r*****5
发帖数: 1876 | 7 sunnyday,谢谢你，
问题就在于我们这个载体只在活体肺里才高表达，我用好多细胞做过暂转染细胞来表达
，都没有成功，烦啊。
质粒建好后，也测序了，我插入的序列也对，可是不知道为什么没有阳性老鼠 |
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r*****5
发帖数: 1876 | 8 请问kozak sequence不是应该放在要表达的蛋白的ATG 之前么？就是的放在要表达的蛋
白的ATG的左面，对么
2. 在kozak sequence 之前的编码不要有ATG, 而最好有stop codon.
那这个stop codon是做什么的啊，
问题是我测载体的序列，测完了该怎么分析呢？ 我也不知道标准序列，很是郁闷 |
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s******y
发帖数: 28562 | 9 Kozak sequence 的确就是和你的蛋白的ATG 融合在一起的。
Kozak sequence 之前的stop codon 可以保证前面的序列如果不小心导致了蛋白
翻译到了那里肯定会被切断而不会干扰你后面的序列 |
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r*****5
发帖数: 1876 | 10 好的，非常感谢您的指教， 看看我这次能不能成功 ：） |
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r*****5
发帖数: 1876 | 12 没有阳性小老鼠，GENE－TYPING 没有发现阳性的 ：（ |
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r*****5
发帖数: 1876 | 13 谢谢指导，可是我们有很多小老鼠啊，请问什么原因可以导致阳性率这么低呢？ 做转
基因的人也很有经验的啊， |
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D*a
发帖数: 6830 | 14 一般建老鼠系的时候，要genotype, southern western都做了来确认你的老鼠没有目标
蛋白表达，建立起来之后，就可以只做genotyping了。
如果是tissue specific的KO，交配完也要先做tissue specific PCR和 western确认，
cell specific的最好还能加IHC确认，然后之后的routine的交配可以只做genotype
我看的paper里面一般都会有PCR和werstern/IHC的图来表示这个蛋白是确实敲掉了的。
很多KO的mRNA转录很活跃，因为一般情况下你并没有动它的promoter. 但是一般情况下做KO的会尽量使mRNA丧失功能，比如造成移码突变等等，因此一般蛋白翻译会是无功能的小片段，然后被清除了。因此考虑不周的话也会造成问题。比如一个蛋白有20个exon，你切了第10个想让他KO，但是恰好这个蛋白有两种长度形式，其中一个小的是利用了前面的9个exon，那么可能你就没有把这个小的(完全)敲掉。
但是蛋白的变异体的功能这个很难说啊，我觉得大部分应该是没活性的吧？ dispensable与否
要看是生理情况下... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 15 zan
下做KO的会尽量使mRNA丧失功能，比如造成移码突变等等，因此一般蛋白翻译会是无功
能的小片段，然后被清除了。因此考虑不周的话也会造成问题。比如一个蛋白有20个
exon，你切了第10个想让他KO，但是恰好这个蛋白有两种长度形式，其中一个小的是利
用了前面的9个exon，那么可能你就没有把这个小的(完全)敲掉。
dispensable与否 |
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v***a
发帖数: 1242 | 16 谢谢专家的详尽解答！
下做KO的会尽量使mRNA丧失功能，比如造成移码突变等等，因此一般蛋白翻译会是无功
能的小片段，然后被清除了。因此考虑不周的话也会造成问题。比如一个蛋白有20个
exon，你切了第10个想让他KO
dispensable与否 |
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r*******y
发帖数: 48 | 17 any antibody against that particular knockout protein should work, no matter
which domain it is designed against, if that protein is really ablated. for
instance,if that protein has 20 exons, and you expect that the protein
after exon 10 is knocked out, but your antibody available is against the
exon 1. then, if it is a clean knockout, this antibody will detect a shoter
band than expected (i.e. from exon 1 to exon 9, but not a full length
protein). If you still detect a full length protein, then... 阅读全帖 |
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l**********1
发帖数: 5204 | 18 sunny 老大和 长木行 longwoodwalk 不熟吗 in 2008 or 09 ?
LZ please refer
同主题阅读：Re: 这样构建bac，可行不？
[版面:生物学][首篇作者：longwoodwalk] , 2011年06月04日23:37:27
[分页:1 ]
longwoodwalk
[ 2 ]
发信人: longwoodwalk (长木行走), 信区: Biology
标 题: Re: 这样构建bac，可行不？
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jun 5 11:34:27 2011, 美东)
如果是这样的话，又多了一种可能性。在mRNA上，不是所有情况下第一个ATG
都是起始密码子。前后的序列，比如Kozak序列，才是决定mRNA从哪里开始翻
译的起始位点。我怀疑还有一种可能性，因为你们破坏了A本身的ATG，Cre放
在了20bp之后。有可能Cre自己的ATG不能作为kozak或类似序列，所以，不能
被核糖体视为一个ORF的start codon，所以不能表达你的Cre。再往后面的
ATG, 即使有可能被视做一个ORF的起始密码字，... 阅读全帖 |
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l**********1
发帖数: 5204 | 19 pls try Multiplex PCR by A, B and C three primers set (below figure that
X, Y, Z as A, B, C primers)
PMID 19936220
Generation and characterization of mice carrying a conditional allele of the
Wwox tumor suppressor gene. (2009).
PLoS One. 4: e7775.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19936220
or refer
Biology版 - 有没有可能出现假KNOCKOUT的情况?
hashuoy
2010-09-09 13:52:31
来自: 192.168.
1从公司订制的KO老鼠,带CRE基因,大半年折腾下来去掉CRE并拿到大量杂合子,按照公司
给的DATA SHEET, GENOTYPING双引物鉴定老鼠各基因表型正常,符合孟德尔遗传,但在对
培养的野生型和纯合子MEF细胞鉴定时,我发现虽... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 22 我们现在要做PD1基因CKO的小鼠模型，想请教一下几个问题：
1.如果用CRISPR插入LOXP位点的方法，是要插在整个基因编码区的两侧？还是选择少数
几个外显子让其移码突变？
2.在操作的时候如果同时注射两个sgRNA，会不会直接把中间的片段删除掉了而导致敲
入LOXP的效率比较低呢？
求教！ |
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发帖数: 1 | 23 有没有方法可以预测start codon? 第一个ATG后面不多远还有一个ATG（和第一个没有
移码），蛋白检测像是从第二个开始的。 有没有方法可以从新预测或者实验证实？ |
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c****t
发帖数: 19049 | 24 ☆─────────────────────────────────────☆
casact (尝尝也) 于 (Tue Jul 5 01:17:00 2011, 美东) 提到:
第一章 被驱逐的高手
更新时间 2011-2-28 15:15:57 字数：4023
“卡卡卡，嗒嗒……”
一双灵巧的手飞舞着操纵着键盘和鼠标，富有节奏的敲击声仿佛是一首轻快的乐
章。屏幕上漫天的光华闪过，对手飞扬着血花倒了下去。
“呵呵。”叶秋笑了笑，抬手取下了衔在嘴角的烟头。银白的烟灰已经结成了长
长一串，但在叶秋挥舞着鼠标敲打着键盘施展操作的过程中却没有被震落分毫。摘下的
烟头很快被掐灭在了桌上的一个形状古怪的烟灰缸里，叶秋的手飞快地回到了键盘，正
准备对对手说点什么，房门却突得咣一声被人打开了。
叶秋没有回头，像是早就在等着这一刻一样，只是问了一句：“来了？”
“来了。”苏沐橙的回答也同样简单。
“那就走吧！”叶秋拒绝了对手又一次的邀战，轻轻地从网游荣耀专用的登录器
上摘下了一张卡片，起身来到门旁衣架顺手取下了外套。
夜已... 阅读全帖 |
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y******0
发帖数: 8807 | 25 ☆─────────────────────────────────────☆
oakleaf000 (George) 于 (Thu Jan 23 13:08:45 2014, 美东) 提到:
本人NIW批准在排队中。在MITBBS上感觉对移民改革讨论得不多，似乎是一件跟中国人
没啥关系的事情。有人认为移改是为非法移民度身订造的，就目前排队的一万多人来说真
是和1千多万非移没法相提并论，不过很显然，无论过去还是现在都不可能出现一千多
万合法非法的亚裔移民的情况的，所以，很奇怪为什么现在的EB2为啥不是很关注这趟
移改直通车，都能走EB1A吗？那还叫EB1A吗？现在的移改形势似乎趋于明朗，也略呈乐
观，估计非移公民之路绝了，但是身份可以合法，倒是即给共和党在西裔人前卖了好，
还坏了民主党票仓的大计，而民主党也没有铁定的理由完全否定共和党的做法，毕竟移
民法律的现状是崩坏的，美国经济复苏，用人在即，不能不算现实的压力。来自保守派
的势力很强，要保饭碗，谁都不想别人来抢饭碗，但是这个理由也不是很站得住脚，国
家发展总是要取最大利益的，就像上海当年想阻止外来人员抢饭碗，后来还是搞了开... 阅读全帖 |
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y******0
发帖数: 8807 | 26 ☆─────────────────────────────────────☆
oakleaf000 (George) 于 (Thu Jan 23 13:08:45 2014, 美东) 提到:
本人NIW批准在排队中。在MITBBS上感觉对移民改革讨论得不多，似乎是一件跟中国人
没啥关系的事情。有人认为移改是为非法移民度身订造的，就目前排队的一万多人来说真
是和1千多万非移没法相提并论，不过很显然，无论过去还是现在都不可能出现一千多
万合法非法的亚裔移民的情况的，所以，很奇怪为什么现在的EB2为啥不是很关注这趟
移改直通车，都能走EB1A吗？那还叫EB1A吗？现在的移改形势似乎趋于明朗，也略呈乐
观，估计非移公民之路绝了，但是身份可以合法，倒是即给共和党在西裔人前卖了好，
还坏了民主党票仓的大计，而民主党也没有铁定的理由完全否定共和党的做法，毕竟移
民法律的现状是崩坏的，美国经济复苏，用人在即，不能不算现实的压力。来自保守派
的势力很强，要保饭碗，谁都不想别人来抢饭碗，但是这个理由也不是很站得住脚，国
家发展总是要取最大利益的，就像上海当年想阻止外来人员抢饭碗，后来还是搞了开... 阅读全帖 |
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H*******g
发帖数: 6997 | 27 ☆─────────────────────────────────────☆
qt (月移花影) 于 (Sat Nov 3 21:10:28 2012, 美东) 提到:
看看聊聊天。。。
☆─────────────────────────────────────☆
skyfafa (每次都想呼喊你的名字) 于 (Sat Nov 3 21:17:58 2012, 美东) 提到:
还没找到男人？
☆─────────────────────────────────────☆
downspring (田野里的旋风) 于 (Sat Nov 3 21:20:44 2012, 美东) 提到:
有感觉的
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xlzero (Megatron) 于 (Sat Nov 3 21:21:40 2012, 美东) 提到:
真迷上的，而且确定对我感兴趣的
☆─────────────────────────────────────☆
qt (月移花影) 于 (Sat Nov... 阅读全帖 |
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u***************r
发帖数: 11227 | 28 发信人： hellotree(树先生), 信区： Security
标题： 电脑蓝屏了怎么办？
发信站： BBS未名空间站(Wed Sep 20 10:23:28 2017,GMT)
Win7操作系统有酷炫的界面和丰富的功能，受到很多朋友的喜爱，成为大家生活工作的
好伙伴。但是因为硬件和软件的各种原因Win7系统也会偶尔遇到蓝屏，由数字和字母组
成的蓝屏代码分别代表不同的含义，下面为大家介绍一些Windows 7蓝屏的处理方法以
及部分Windows7系统蓝屏代码和含义
Windows 7蓝屏产生的原因很多，但大多数往往集中在不兼容的硬件和驱动程序
有问题的软件、病毒等。遇到蓝屏错误时，可以尝试选用下面的方法。 重启系统
如果只是某个程序或驱动程序偶尔出现错误，重启系统后部分问题会消除。 检查硬
件
检查新硬件是否插牢，这个被许多人忽视的问题往往会引发许多莫名其妙的故障。如果
确认没有问题，将其拔下，然后换个插槽试试，并安装最新的驱动程序。同时还应对照
微软网站的硬件兼容类别检查一下硬件是否与操作系统兼容。
检查是否做了CPU超频，超频操作进行了超载运算，造成其内... 阅读全帖 |
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d******a
发帖数: 32122 | 29 卷一：古刹蛇踪
正文 第一章 夜幕临雪花飞扬 老和尚匆忙报案
雨，不大不小，不急不慢，从上午九点钟左右一直下到黄昏，大概是天气的缘故，夜幕
降临的似乎比平时早了许多；伴随着夜幕的降临，天空中，雪花代替了冬雨，先是一星
半点，不一会，便突然鹅毛般地大了起来，渐渐地，路上的颜色由黑变灰，由灰变白；
抬头向上向前看，树冠上、人家屋顶上也都抹上了一条条银色的轮廓线，远处黑白分明
的马头墙也变得模糊起来，一眨眼的功夫，银白色的轮廓线迅速侵染、蔓延开去，点变
成了片，线变成了面。如果不是大街上移动的白色小伞和河面上前行的乌蓬船的话，你
会以为这是一幅水墨画《小镇暮雪图》。
路灯早亮了，走一段距离就有一盏灯，电线杆倒是有很多，但灯泡坏了不少。灯光下，
雪花在搔首弄姿，尽情狂舞。
所有店铺里面的灯都亮了，有些店铺的人在上门板，有些店铺的人在打烊。
一路上，不时能看到几个小朋友打雪仗，伴随着孩子们的追逐、嬉戏、打闹之声，还能
听到几声大人们的吆喝、嗔怪和呵斥之声。
电线杆上横七竖八地贴着一些标语，因为光线太暗淡，看不清楚这些标语上写的是什么
，倒是店铺的墙上张贴的一些标语透露了一些信息。
一盏路灯的斜对... 阅读全帖 |
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d**a
发帖数: 98 | 30 续前章
。。。一星期后，10月23日，星期一晚。牛仔主场再战巨人。。。
当下半场比赛开始的时候，转播的镜头突然对准了场地边牛仔队员区，观众们意外发现
，猪不扫没戴头盔，神情沮丧地坐在板凳上，而走进场地中带领牛仔进攻的，却是个背
着9号，银盔银甲的白面小生，却不是肉末是谁？！“十年磨一剑，霜刃未曾试”，肉
末就在这个风口浪尖，在这个全国转播的大舞台上，临危受命，粉墨登场了！
一. 大战芝加哥
11个月以后。
2007 年9月23日，星期日。
正值风城芝加哥夏末秋初的好时节。密执安湖畔，周末日间的喧嚣散尽，到傍晚时分，
明月初升。湖面上轻风徐来，水波微兴。岸边楼宇的倒影和万家灯火，跟湖水一起微漾
着栖息在港湾中的舟舸，真个是“浮光跃金，静影沉碧”，人间仙境也莫过于此。
芝加哥士兵体育场内,此刻却坐者6万郁闷的观众。这场压轴大戏，此前已经被媒体疯狂
炒作了整整一星期。主流的分析普遍认为，拥有全联盟最佳防守阵容的熊队携主场之优
势定能将来势汹汹的牛仔队碾碎于熊掌之下。而我们的主人公—肉末，虽然拥有诸多进
攻武器，以俄拉克之勇猛，兼海斯特之迅捷，参考上赛季的表现，他定会难有作为而失
误频频。牛仔... 阅读全帖 |
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Z*****l
发帖数: 14069 | 31 韩亮的车开到了一处小山坡下，山坡上方就是铁路，四周已经被警戒带围起，警戒带的
一旁摆着一个牌子，写着：“龙番市铁路公安处在此办案，请绕道行驶。”
我下了车，紧了紧领口，环顾四周，都是白雪皑皑。虽然雪下得并不大，但是铁路
附近人迹罕至，所以山坡的植被都已经被白雪覆盖。
我们顺着台阶走到了铁道旁，见几个民警正在一具被白雪覆盖了大部分的尸体旁边
拍照。
“你们来啦。”师兄看到我，很是高兴，脱下手套来和我们握手。
我点点头，说：“怎么回事？”
师兄指着身边一个穿着制服的男人，说：“这是老八发现的。清早，他例行检查他
管辖的路段，发现这里躺着一个人，身上盖了雪，于是他走过去推了推，发现人是硬的
，显然早已死去。所以，就报了警。”
老八是一个黑瘦男人，穿着深蓝色的制服，制服上写着“龙番铁路六段”。
显然，他是负责本路段巡查的铁道维修工人。
我上下打量了这个男人，因为长期从事体力工作，他身材瘦削，但显得精气神儿十
足。即便是在这个大雪纷飞的季节，他也就在羊毛衫外面套个工作服而已。老八的腰间
系着一个工具袋，工具整齐地插在袋子上的每一个明格里。他走起路来，这个袋子随着
步伐上下起伏，在他的臀部拍打着。... 阅读全帖 |
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b********s
发帖数: 1415 | 32 一个女人一生中的24小时
作者：（奥）斯·茨威格
战争爆发前十年，我有一回在里维耶拉度假期，住在一所小公寓里。一天，饭桌上
发生了一场激烈的辩论，渐渐转变成忿怒的争吵，几乎闹到结怨动武的地步，这真是万
没料到的。世上的人大多数幻想能力十分迟钝，不论什么事情，若不直接牵涉到自己，
若不象尖刺般狼狠地扎迸头脑里，他们决不会昂奋激动的，可是，一旦有点什么，哪怕
十分微不足道，只要是明摆在眼前，直截了当地触动感觉，便立刻会使他们大动感情，
往往超出应有的限度。于是他们一反平日少管闲事的习惯，趁着机会大大发泄一通。
那一次，我们这群十足中产阶级的餐友所表现的，正是这种情形。平常，大家在饭
桌上一团和气，偶尔来一场闲谈，彼此开开不痛不痒的小玩笑，多半总是吃罢饭马上分
道扬镳，德国人夫妇俩外出游览访胜摄影，胖笃笃的丹麦人忙科去干他那无聊的钓鱼玩
艺，娴雅的英国太太回到她的书堆里，那对意大利夫妇急急赶往蒙特卡罗，我呢，或者
躺进花园中的藤椅里消磨时辰，或者立刻开始工作。可是这一回起了一场很不痛快的争
论，把我们这群人紧紧纠缠在一处，无法分开了。要是有谁一跃而起，那决不是要象平
时那样彬彬有礼地表示告退... 阅读全帖 |
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b********s
发帖数: 1415 | 33 一个女人一生中的24小时
作者：（奥）斯·茨威格
战争爆发前十年，我有一回在里维耶拉度假期，住在一所小公寓里。一天，饭桌上
发生了一场激烈的辩论，渐渐转变成忿怒的争吵，几乎闹到结怨动武的地步，这真是万
没料到的。世上的人大多数幻想能力十分迟钝，不论什么事情，若不直接牵涉到自己，
若不象尖刺般狼狠地扎迸头脑里，他们决不会昂奋激动的，可是，一旦有点什么，哪怕
十分微不足道，只要是明摆在眼前，直截了当地触动感觉，便立刻会使他们大动感情，
往往超出应有的限度。于是他们一反平日少管闲事的习惯，趁着机会大大发泄一通。
那一次，我们这群十足中产阶级的餐友所表现的，正是这种情形。平常，大家在饭
桌上一团和气，偶尔来一场闲谈，彼此开开不痛不痒的小玩笑，多半总是吃罢饭马上分
道扬镳，德国人夫妇俩外出游览访胜摄影，胖笃笃的丹麦人忙科去干他那无聊的钓鱼玩
艺，娴雅的英国太太回到她的书堆里，那对意大利夫妇急急赶往蒙特卡罗，我呢，或者
躺进花园中的藤椅里消磨时辰，或者立刻开始工作。可是这一回起了一场很不痛快的争
论，把我们这群人紧紧纠缠在一处，无法分开了。要是有谁一跃而起，那决不是要象平
时那样彬彬有礼地表示告退... 阅读全帖 |
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g****t
发帖数: 31659 | 34 【 以下文字转载自 Detective 讨论区 】
发信人: guvest (我爱你老婆Anna), 信区: Detective
标 题: 阴阳先生这几年 2
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jul 23 23:07:04 2011, 美东)
第四卷 第一百八十四章辞职
这个世间上的事情往往都是虚假的。.没有人能真正的看收飞，这话挺对，起码我心具是这么觉得的。 记得今天刚回哈尔滨的时候，去袁大叔的面馆儿里吃饭，袁大叔聚精会神看着电视，当时我还以为是袁大叔对考古之类的东西感兴趣，但是现在一想却并不是如此。因为他当时看的是黄巢墓的掘现场。 不知道为什么，我现在也十分的怀疑袁大叔了，这个和蔼可亲的面馆老板，他的目的到底是什么呢？ 我无话可说，如果不是有石决明的话，恐怕我和老易这俩傻小子想破脑袋也不会想到袁大叔竟然会隐藏的如此之深，一时间我和老易都没了言语。 良久，我抬起了头对着老易和石决明说：“先别想那么多了，你不是也只是猜测而已么？我想过了，张雅欣过几个星期不是要带我和老易去旅游吗？到时候我直接去问那个袁枚好了，我觉得还是摊牌比较好，毕竟咱们手里有... 阅读全帖 |
|
d*****r
发帖数: 2583 | 35 —米歇尔·沃尔德罗普—复杂
概述
这是一本关于复杂性科学的书——这门学科还如此之新，其范围又如此之广，以至
于还无人完全
知晓如何确切地定义它，甚至还不知道它的边界何在。然而，这正是它的全部意义之所
在。如果说，
复杂性科学的研究领域目前尚显得模糊不清，那便是因为这项研究正在试图解答的是一
切常规学科范
畴无法解答的问题。比如：为什么苏联对东欧四十年的统治会在1989年的几个月之内轰
然坍塌？为什
么苏联自身也在其后不到两年的时间内分崩离析？这些当然与名叫戈尔巴乔夫和叶利钦
的两个人有一
定的关系。但即使是这两个人自己，也像是被他们完全无法控制的事件席卷裹挟而不能
自已。这是否
是因为有某种全球性的、超越个人能量的原因在起作用？
为什么股票市场会在1987年10月的一个星期一这一天之中猛跌五百多个百分点？很
多评论将之
归咎于股票生意的计算机化。但计算机的应用已有多年，有没有任何答案可以解释为什
么股票偏偏在
那个特殊的星期一狂跌不已？
根据化石标本的记载，古代物种和生态系统常常稳定地保持了几百万年，而后却在
地质期的某一
瞬间灭... 阅读全帖 |
|
d******a
发帖数: 32122 | 36 黑扎营无影野鬼 第四十四章 霍金柱道出玄机 曹大年加以确认
一直到一月十七日晚上，李云帆都没有等来刘局长和郑峰。
太阳在午露了一下脸，就藏到云层里面去了。到傍晚的时候，天空阴沉得更厉害了
。吃晚饭的时候，葛大爷说，八成又要下雨了。
果不其然，八点多钟的时候，天空就飘起了小雨，不一会就大起来了。
每个人的心里都憋着一股劲，雨更增添了同志们心的烦躁，自从李云帆他们进驻黑
河以来，这是一个最清闲、最无聊的夜晚。
吃过晚饭以后，葛大爷过来喊同志们到大梁村去听书，大梁村请来了两个说书的瞎
，已经说了两个晚上，今天晚上的内容是《卢俊义上梁山》，大家都没有什么兴致，所
以就没有去，要说讲《水浒》，谁也没有陈老师说得好。李荣提议请陈老师说一段。
说就说一段吧！二墩也来了，他要摆渡，所以没有到大梁村去听书。
说什么呢？史可染提议说一说梁山一百单八将的结局。
“要说《水浒传》一百零八将的结局，无外乎是五种结局，得以善终的有三种结局
：第一种是阮小七，他因为平定方腊之后穿了一下方腊的龙袍，金銮殿上，皇上论功行
赏的时候，高俅上奏，说阮小七穿了方... 阅读全帖 |
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d*s
发帖数: 3016 | 37 中共部队的攻击战斗 S·L·A·Marshall [美国]
[出自《中共部队的攻击战斗》]
第一部：跟据1950年11月Kunu-ri之役中第二步兵师步兵连作战行动之研究
1、对阵地的攻击
2、运动模式
3、行进中射击的使用
4、目标的特性
5、使用掩护
6、受攻下的防御
7、重视手榴弹
8、中共军手榴弹战斗的程度
9、辨识的问题
10、中共军武器的效果
11、展开的方法
12、从战斗中脱离
13、连级的补给
14、节约的问题
15、其他武器
16、保养的问题
第二部：根据1950年11月20日至12月10日陆战第一师在古土里、下碣隅里、柳檀里区域作
战之研究
导言
武器与构工
纵队中的秩序
中共军的大目标
中共军方面的损耗与隐蔽
前进路线
中共军的态度
美军防御阵地的组织
铁丝网的使用及效果
照明的使用
防御的机制
攻击的机制
行军要求
酷寒的影响
休克与疲乏
防寒鞋
酷寒下的武器
第一部：跟据1950年11月Kunu-ri之役中第二步兵师步兵连作战行动之研究
1、对阵地的攻击
在对付第二步兵师各步兵连的各阶段行动中，中共部队没有尝试对各防御阵地进行大
包围作战。初步攻击的重点通常是... 阅读全帖 |
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f**********r
发帖数: 3774 | 38 《妖刀记》卷廿六 于愿接天
第百廿六折 岂不同悔，共语今朝
第百廿七折 鳞翮之化，室迩人遥
第百廿八折 真龙一怒，上彻云表
第百廿九折 玉骨冰肌，谁从赭汗
第百三十折 子夜飞遁，鸿鹄鸣高
第百廿六折 岂不同悔，共语今朝
老人冷冷回望着，似乎一点也不意外。鬼先生从不寄望在老人面上看见错愕惊
慌，然而连一丝扬眉的凛然也无，仿佛他自认掷地有声的一击，于老人还不及那两
百多条贱命上心，着实令鬼先生有些泄气，不由咬了咬牙。
（你这是故作姿态呢，还是另有撒手未出？老匹夫！）
老人迎着他的注视，不闪不避，同样还以森冷的目光。
狐异门的武学讲究应变灵动、机巧百出，气势本非所长。鬼先生须一意凝聚杀
气，才得有这般凌厉，对视片刻，颅内被老人剑一般的视线扎得隐隐生疼，不觉心
惊，兽伏般的反扑之势为之一挫；心念电转间，忙不迭地觅起退路，不欲与老人硬
搏。
而此问原本便毋须回答。他试探的，不过是古木鸢的反应而已。
姑射背后有无势力、该与何人接头，乃至这帮人所图为何……在鬼先生看来已
是不言自明，他如有意，随时都能接上这条线。若无这等才智，笨到须来向古木鸢
讨个说法，也不会有人向他兜售保命符了。鬼先生非常清楚自己... 阅读全帖 |
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g****t
发帖数: 31659 | 39 【 以下文字转载自 paladin 讨论区 】
发信人: kingsword (牛牛他爸), 信区: paladin
标 题: <<大隐>> 5 by 蓝晶
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Sep 2 13:58:06 2011, 美东)
书名：《大隐》５
出版：河图出版有限公司
作者：血珊瑚
简介：
因为卡奥尼居民的背叛，尼斯带着四个混血儿随从逃出土堡，躲入山中。在鼠群再
次袭击土堡之际，尼斯决定找出造成鼠患的原因，而这个决定为他带来莫大的收获？？
对于幸存的村民，不想再遭背叛的尼斯会采取什么手段？而决定将此处当成发展基
地的路克等人，下一步将有什么计划？
人物介绍：
尼斯・荷特・康塞尔——男爵之子，母亲不详。
路克・萨巴斯蒂安・卡特伦・贝特曼——子爵次子，粗鲁，莽撞，
肯花钱。
伊斯特・辛格——子爵次子，擅长歌曲和各类艺术。
梅特洛・迪亚戈——贵族，没有爵位继承，跟班，头脑灵活，消息灵通。
帕尔姆・格拉面斯——贵族，没有爵位，打手，实力不错，有野心，一开始把... 阅读全帖 |
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k*******d
发帖数: 1523 | 40 书名：《大隐》５
出版：河图出版有限公司
作者：血珊瑚
简介：
因为卡奥尼居民的背叛，尼斯带着四个混血儿随从逃出土堡，躲入山中。在鼠群再
次袭击土堡之际，尼斯决定找出造成鼠患的原因，而这个决定为他带来莫大的收获？？
对于幸存的村民，不想再遭背叛的尼斯会采取什么手段？而决定将此处当成发展基
地的路克等人，下一步将有什么计划？
人物介绍：
尼斯・荷特・康塞尔——男爵之子，母亲不详。
路克・萨巴斯蒂安・卡特伦・贝特曼——子爵次子，粗鲁，莽撞，
肯花钱。
伊斯特・辛格——子爵次子，擅长歌曲和各类艺术。
梅特洛・迪亚戈——贵族，没有爵位继承，跟班，头脑灵活，消息灵通。
帕尔姆・格拉面斯——贵族，没有爵位，打手，实力不错，有野心，一开始把其
他人看作是肥羊，后来渐渐融入圈子。
伍德——男随从。
塔莫尔——男随从。
莉莉丝——女随从。
莎尔拉——女随从。
玛格丽特——修道院的神秘女郎。
目录：
第一章 魔鼠
第二章 魔化之源
第三章 今后的路
第四章 宗教裁判所
第五章 领地开发
第一章 ... 阅读全帖 |
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r****z
发帖数: 12020 | 41 导语：“达尔文奖”是一个带半开玩笑性质的奖项。由美国斯坦福大学教授诺斯喀特创
建的一年一度的“达尔文奖”，以专门评选每年最愚蠢的死亡事件而著称，任何人只要
有办法使自己不能繁殖（即结果自己性命）便有机会参加评选。他们的贡献是通过消灭
自己促进人类基因的进步。
“达尔文奖”由美国斯坦福大学神经学研究实验室女工作人员温迪·诺斯卡特创立
。众所周知，达尔文最伟大的贡献是创立了“优胜劣汰”的进化论，而达尔文奖就是专
门表彰那些通过“离奇而愚蠢的方法”将自己消灭或让自己失去生殖能力的倒霉蛋。因
为他们通过愚蠢到家的死法“让自己愚蠢的基因不再传播下去”，从而“间接改善了人
类基因库”。
作为达尔文奖的获得者，这些人必须表现得超出常理的白痴行为，如抛耍手榴弹（
克罗地亚，1987年）、为了拍高空急降不穿降落伞就跳出机外（北卡罗来纳，1987年）
、或用打火机照亮燃料槽来确定无可燃挥发气体（圣保罗，2002年）
“荣誉提名”是对于那些未能尽全力将自己移出基因库的人士，但这不是他们的过
失。他们愚蠢且危险的举动已足以获得提名，若他们再进行下一次尝试，就足以让他人
保持与他们的距离。
1982年度“达尔文... 阅读全帖 |
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M*****e
发帖数: 11621 | 42 ☆─────────────────────────────────────☆
volontaire (volontaire) 于 (Sun Dec 22 11:47:31 2013, 美东) 提到:
说它经典是因为，曹雪芹在红楼梦里说，情产生的过程，“既悦其色，复恋其情”。这
是比较自然的，人本来就是动物，人最先感知的也是一个人生物特征，生物特征的相互
吸引，带来了情感和肉体的交流，然后是各种社会经济现实，决定了最终的关系走向，
李瓶儿和西门庆是情，欲，钱，交织的关系，这种关系也是最真实的男女关系
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charmed (仙境别红尘) 于 (Sun Dec 22 11:55:55 2013, 美东) 提到:
情，欲，钱，交织的关系，的确是最真实的男女关系，不过我就读不进金瓶梅，它太不
风花雪月了，不适合YY。。。
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volontaire (volontaire) 于 (Sun Dec 22 11:59:0... 阅读全帖 |
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t******n
发帖数: 2939 | 43 ☆─────────────────────────────────────☆
guaiguaimao8 (guaiguaimao) 于 h 提到:
跟着老公离开华盛顿来澳洲差不多一年啦，越来越喜欢这里了。
刚来时候还很不情愿，觉得都是去不了美国的才会去澳洲，到了才发现不是这么回事。
澳洲因为一共就只有30个大学，而且还全都是公立大学，所以水平都不错，平均水平远
远高于美国大学。虽然世界上最好的大学都在美国，不过澳洲平均水平应该都能进美国
前200，一半能排进美国前100？我也不知道怎么比较，只能猜。相比美国有3000多大学
，水平良莠不齐，澳洲政府对于大学的要求严格多了，所以澳洲大学质量都比较平均，
不存在美国那种金字塔似的大学分级。澳洲这里很少给外国人奖学金，留学生基本都是
自费，华人学本科的最多，研究生以上的就很少了。澳洲华人留学生家境普遍比北美强
不少，因为美国基本都是家里没钱没势的，只能靠奖学金留学读硕博。
澳洲华人的整体素质感觉高出美国一大截。据说1980年之前澳大利亚是不开放亚洲人移
民的，澳洲的种族歧视恶名也是那时候叫响世界的。1980年后开放移民，这也造成了... 阅读全帖 |
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l**a
发帖数: 6415 | 44 二、事故发生经过
2011年7月23日19时30分左右，雷击温州南站沿线铁路牵引供电接触网或附近大地
，通过大地的阻性耦合或空间感性耦合在信号电缆上产生浪涌电压，在多次雷击浪涌电
压和直流电流共同作用下，LKD2-T1型列控中心设备采集驱动单元采集电路电源回路中
的保险管F2(以下简称列控中心保险管 F2，额定值250伏、5安培)熔断。熔断前温州南
站列控中心管辖区间的轨道无车占用，因温州南站列控中心设备的严重缺陷，导致后续
时段实际有车占用时，列控中心设备仍按照熔断前无车占用状态进行控制输出，致使温
州南站列控中心设备控制的区间信号机错误升级保持绿灯状态。
雷击还造成轨道电路与列控中心信号传输的CAN总线阻抗下降，使5829AG轨道电路
与列控中心的通信出现故障，造成5829AG轨道电路发码异常，在无码、检测码、绿黄码
间无规律变化，在温州南站计算机联锁终端显示永嘉站至温州南站下行线三接近(以下
简称下行三接近，即5829AG区段)“红光带”。
19时39分，温州南站车站值班员臧凯看到“红光带”故障后，立即通过电话向上海
铁路局调度所列车调度员张华汇报了“红光带”故障情况，并通知电务... 阅读全帖 |
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g****t
发帖数: 31659 | 45 《三体III：死神永生》
作者：刘慈欣
申明:本书由奇书网(Www.Qisuu.Com)自网络收集整理制作,仅供预览交流学习使用,版权归原作者和出版社所有,如果喜欢,请支持订阅购买正版.
写在"基石"之前
姚海军
"基石"是个平实的词，不够"炫"，却能够准确传达我们对构建中的中国科幻繁华巨厦的情感与信心，因此，我们用它来作为这套原创丛书的名字。
最近十年，是科幻创作飞速发展的十年。王晋康、刘慈欣、何宏伟、韩松等一大批科幻作家发表了大量深受读者喜爱、极具开拓与探索价值的科幻佳作。科幻文学的龙头期刊更是从一本传统的《科幻世界》，发展壮大成为涵盖各个读者层的系列刊物。与此同时，科幻文学的市场环境也有了改善，省会级城市的大型书店里终于有了属于科幻的领地。
仍然有人经常问及中国科幻与美国科幻的差距，但现在的答案已与十年前不同。
在很多作品上(它们不再是那种毫无文学技巧与色彩、想象力拘谨的幼稚故事)，这种比较已经变成了人家的牛排之于我们的牛肉。差距是明显的--更准确地说，应该是"差别"--却已经无法再为它们排个名次。口味问题有了实际意义，这正是我们的科幻走向成熟的标志。
与美国科幻的差距，实际上是... 阅读全帖 |
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c*****g
发帖数: 21627 | 46 【 以下文字转载自 IndustryParty 俱乐部 】
发信人: choming (请抵制“十万强插”计划！), 信区: IndustryParty
标 题: 揭秘4G核心专利
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jun 8 04:14:08 2015, 美东)
揭秘4G核心专利 (2015-03-03 19:30:02)
从2012年10月份决定写《通信之道》，到现在差不多两年半的时间，第一版终于成稿，
以此文作结。
3G霸主
1985年，在美国硅谷成立了一家叫Qualcomm(高通)的公司。 这家公司把军用的CDMA技
术用于民用通信，推出了IS-95标准，成为与欧洲的GSM竞争的第二代移动通信系统。
在第二代的商业竞争当中，GSM还是取得了的胜利。但是在高通公司的创始人当中有一
位世界级的科学家，叫做Andrew Viterbi，就是那位Viterbi译码算法的发明人，IEEE
Fellow，并获得了美国最高科技奖。在他的推动下，产业界相信了CDMA代表了无线通信
技术的发展方向，因此第三代移动通信的三个国际标准，WCDMA， CDMA2000和TD-SCDMA
都采... 阅读全帖 |
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m*******e
发帖数: 1598 | 47 【 以下文字转载自 EE 讨论区 】
发信人: zhizunbao123 (你在红楼我在西游), 信区: EE
标 题: 怎样看待华为前工程师杨学志关于4G核心专利的看法？ (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jun 10 09:23:41 2015, 美东)
发信人: baodiao (钓鱼岛), 信区: PDA
标 题: 怎样看待华为前工程师杨学志关于4G核心专利的看法？
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jun 9 14:03:22 2015, 美东)
从网上看到一篇华为前工程师杨学志关于4G核心专利的看法， 不知各位有何高见？
当事人揭秘4G核心专利：高通没那么多，中国没那么少！
http://www.c114.net/news/41/a886875.html
1985年，在美国硅谷成立了一家叫Qualcomm(高通)的公司。这家公司把军用的CDMA技术
用于民用通信，推出了IS-95标准，成为与欧洲的GSM竞争的第二代移动通信系统。
在第二代的商业竞争当中，GSM还是取得了的胜利。但是在高通公司的创始人当中有一
位世界级的科学家，叫做Andrew V... 阅读全帖 |
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u*****a
发帖数: 6276 | 48 【 以下文字转载自 PDA 讨论区 】
发信人: baodiao (钓鱼岛), 信区: PDA
标 题: 怎样看待华为前工程师杨学志关于4G核心专利的看法？
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jun 9 14:03:22 2015, 美东)
从网上看到一篇华为前工程师杨学志关于4G核心专利的看法， 不知各位有何高见？
当事人揭秘4G核心专利：高通没那么多，中国没那么少！
http://www.c114.net/news/41/a886875.html
1985年，在美国硅谷成立了一家叫Qualcomm(高通)的公司。这家公司把军用的CDMA技术
用于民用通信，推出了IS-95标准，成为与欧洲的GSM竞争的第二代移动通信系统。
在第二代的商业竞争当中，GSM还是取得了的胜利。但是在高通公司的创始人当中有一
位世界级的科学家，叫做Andrew Viterbi，就是那位Viterbi译码算法的发明人，IEEE
Fellow，并获得了美国最高科技奖。在他的推动下，产业界相信了CDMA代表了无线通信
技术的发展方向，因此第三代移动通信的三个国际标准，WCDMA，CDMA2000和TD-... 阅读全帖 |
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