h****g 发帖数: 439 | 1 测肿瘤血管的渗透性。sacrifice老鼠前2小时iv注射FITC-dextran,取肿瘤块OCT
frozen. 然后切成5um的切片,用acetone固定。
但是只能看到很少的大血管有荧光,绝大部分cd31(血管内皮marker)阳性的地方都没
看到dextran阳性。
想来想去也不知道哪出错了。是不是用acetone固定对FITC-dextran有影响,或者我切
片固定的过程中没注意避光?
哪位有经验的给说说? |
|
s******y 发帖数: 28562 | 2 Dextran是水溶物,一般是用来看溶液跑到哪里去用的。
如果跑坏了细胞膜结构,那么dextran就会漏出来,然后就被洗掉了。
你当时用的acetone可以很好的沉降蛋白,但是会把细胞膜破坏,所以小血管里面的
信号就全部损失了。 |
|
h****g 发帖数: 439 | 3 不同组织处理和固定方式的对FITC-Dextran的影响:
1,tumor tissue-OCT-section-acetone: fail
2, tumor tissue-OCT-section-PFA:fail
3, tumor tissue-PFA-sucrose-OCT-section: work!
看来FITC-dextran 和YFP一样,要用PFA固定,然后再OCT |
|
a****c 发帖数: 339 | 4 Do you have a way to keep dextran while doing permeablization ? I'm researching on this all afternoon.
I'm thinking about using 70kD dextran. |
|
p****e 发帖数: 105 | 5 看到很多文章用dextran染lympatics, dextran和什么有亲和力? |
|
j******3 发帖数: 18319 | 6 【 以下文字转载自 Macromolecules 讨论区 】
发信人: kkndhx (kkndhx), 信区: Macromolecules
标 题: 包子求美国可靠测dextran分子量的公司?
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Mar 25 13:34:16 2010, 美东)
一个氧化后的dextran,氧化前是6000,要找个公司测氧化后的分子量。
大家有介绍么?大概多少钱? |
|
s******y 发帖数: 28562 | 7 I suggest you to use other fixation methods, because acetone likely washed
out the FITC-dextran. |
|
s******y 发帖数: 28562 | 8 当然是避光比较好。但是其实也没有那么敏感啦!我们平时做抗体的时候只要不对着强
光就没有事。
你用的是Dextran, 应该更加没有事。
PFA应该可以,只要不会破坏细胞膜结构的都可以(不要加detergent!) |
|
h****g 发帖数: 439 | 9 为什么要保持细胞膜(endothelial cell 吧)的完整性? dextran不是通过bind到
endothelial cell 的细胞膜上起作用的吧?
anyway, i will try. thanks,
只要不会破坏细胞膜结构的都可以(不要加detergent!) |
|
h*****o 发帖数: 342 | 10 我一直都用4%的pfa固定组织,fitc-dextran的荧光保存很好
没试过acetone |
|
h****g 发帖数: 439 | 11 另外,你一般切多厚来观察FITC-Dextran? 10um?
还有,最后怎么分析结果呢?是根据像素值大小来分辨哪是血管里的,哪是血管外的?
还是染cd31还判断?
谢谢!! |
|
k****x 发帖数: 2751 | 12 一个氧化后的dextran,氧化前是6000,要找个公司测氧化后的分子量。
大家有介绍么?大概多少钱? |
|
j******3 发帖数: 18319 | 13 【 以下文字转载自 Chemistry 讨论区 】
发信人: kkndhx (kkndhx), 信区: Chemistry
标 题: 包子求美国可靠测dextran分子量的公司?
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Mar 25 13:45:25 2010, 美东)
大家有推荐么? |
|
B****l 发帖数: 56 | 14 我十多周的时候回了一次国,也顺便去看了国内的产科医生。B超后,医生说宝宝有点
小,让我补钙补铁。给我开了右旋糖酐铁片(iron dextran / InFEd)。当时我把B超
数据发给这边的ob,他们觉得宝宝很好,不用补,药就放那儿了,回来这边的时候也把
药带回来了。
现在大概26周,上周做血糖检查的时候医生说我铁有点偏低,让我买otc的铁片,吃最
低剂量就好。当时就搜了一款其它mm推荐的,直接在网上买了。可能两三天寄到的样子
,因为小农心想手边不是有现成的铁片么。。。
我就按照上面的说明吃了三天,最小剂量的,25mg*2/day,新铁片也到了。这时才想起
查iron dextran是FDA pregnancy的种类。竟然是category C。我就有点吓着了。打电
话问医生,她的小秘说查了,没看出有啥大问题,但不知道为啥会归到C类。只是让我
吃新到的铁片,下次见医生的时候(月底)把这个iron dextran带给医生看看。
现在比较紧张。貌似国内好些ob给孕妇开的补铁片就是这个。但为啥又是category C呢?
请教大家我现在能做点啥?真笨啊我!!!
谢谢了! |
|
c*********r 发帖数: 1312 | 15 代LP发帖,欢迎交流指教。多谢!^_^
实验中需要标记斑马鱼幼体(D1-D4)的运动神经元,就是通过在肌肉里面的运动神经
元轴突把荧光染料注射进去(retrograde backfilling)。由于注射后的斑马鱼会用于
冰冻切片和免疫染色,同时用的抗体需要先切片然后再快速用甲醛固定,然后还要做免
疫染色,所以一般的dextran或者DiI的染料都不适用,会被洗掉。最后选择了
Invitrogen的CM-DiI,说是可以共价联接在膜蛋白上。
试了CM-DiI,确实不会被洗掉,但出现了几个问题:
1. 注射鱼的时候鱼的组织会被粘在注射用的玻璃针里面,一来会堵玻璃针,二来对鱼
造成的伤害很大。我试过用DMF、酒精以及二者的混合溶液作溶剂,全都有这个问题(
染料浓度是1 mg/ml)。其中用酒精做溶剂造成的存活率相对高一点,所以最后我一直
都用酒精作溶剂。
2. 标记运动神经元的效率下降。以前我用dextran注射的时候,只要注射到轴突支配的
肌肉里面,很容易就标记了运动神经元。现在用CM-DiI,会发现被注射的肌肉部分有很
强的荧光,但却没有进入轴突。貌似需要很精确地注射到轴突里面才行,那... 阅读全帖 |
|
c*********r 发帖数: 1312 | 16 多谢!不过我的问题其实不是是否能够用PFA,dextran、DiI和CM-DiI都有可以用PFA的
种类。但是我的实验中甲醛固定是在切片之后,因为切片时会把切开一部分细胞,而在
甲醛固定之前染料是不会和组织交联的,所以水溶性的染料比如dextran在固定的时候
就被洗掉了。
这个FluoroGold我看了一下也是水溶性的,不知道会不会也有这个问题…… |
|
s******y 发帖数: 28562 | 17 我在猴年马月之前做过,那个时候我用的是fluroescently labeled dextran,
such as rhodamine-dextran |
|
W*****s 发帖数: 684 | 18 Preparative and Analytical Separation of Insulin-Dextran Conjugates From
Native Insulin: Application to Preparation and Characterization of Insulin-
Dextran Conjugates; Drug Development and Industrial Pharmacy; 1994, Vol. 20,
No. 3 , Pages 395-404 (doi:10.3109/03639049409050192)
Read More: http://informahealthcare.com/doi/abs/10.3109/03639049409050192
Thanks a lot! |
|
S*****P 发帖数: 323 | 19 多谢回答.正在用FITC-dextran,就是有点branch,效果不理想.
标 题: Re: 请问哪里有卖发荧光的水溶性polymer
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jul 20 23:21:59 2005), 转信
FITC-dextran 不好么?
有分子量到2×10^6,挺大了 |
|
c*********r 发帖数: 1312 | 20 代LP发帖,欢迎交流指教。多谢!^_^
实验中需要标记斑马鱼幼体(D1-D4)的运动神经元,就是通过在肌肉里面的运动神经
元轴突把荧光染料注射进去(retrograde backfilling)。由于注射后的斑马鱼会用于
冰冻切片和免疫染色,同时用的抗体需要先切片然后再快速用甲醛固定,然后还要做免
疫染色,所以一般的dextran或者DiI的染料都不适用,会被洗掉。最后选择了
Invitrogen的CM-DiI,说是可以共价联接在膜蛋白上。
试了CM-DiI,确实不会被洗掉,但出现了几个问题:
1. 注射鱼的时候鱼的组织会被粘在注射用的玻璃针里面,一来会堵玻璃针,二来对鱼
造成的伤害很大。我试过用DMF、酒精以及二者的混合溶液作溶剂,全都有这个问题(
染料浓度是1 mg/ml)。其中用酒精做溶剂造成的存活率相对高一点,所以最后我一直
都用酒精作溶剂。
2. 标记运动神经元的效率下降。以前我用dextran注射的时候,只要注射到轴突支配的
肌肉里面,很容易就标记了运动神经元。现在用CM-DiI,会发现被注射的肌肉部分有很
强的荧光,但却没有进入轴突。貌似需要很精确地注射到轴突里面才行,那... 阅读全帖 |
|
t*******3 发帖数: 2005 | 21 我不认为那个多伦多的博士学位是假的,理由如下:
1。有id在生物版里说陆骏申请千人计划的时候提供了MIT的Robert Langer的推荐信:
发信人: zyh (CH2O), 信区: Biology
标 题: Re: 一件奇怪的事
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jul 27 07:45:16 2012, 美东)
陆骏 claimed that he was a postdoc from Robert Langer and was working at
Merck before his application. He applied for 1000 young talents through two
universities at the same time. In his application package, he provided the
recommendation letter from Langer.
==============================================
2。有人查到Langer和lu Jun(非耶鲁卢军)合作的文章:... 阅读全帖 |
|
C****7 发帖数: 270 | 22 我想卖的物品:
Bovine Pit. Extract (BPE)
Anastrozole
Charcoal/Dextran Treated Fetal Bovine Serum
Dulbecco's Modified Eagle Medium (D-MEM) (1X), liquid (4.5 g⁄L D-
glucose)
RPMI Medium 1640 (1X), liquid.Contains L-glutamine, but no phenol red.
GAPDH siRNA
X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent
Opti-MEM® I Reduced-Serum Medium
可接受价格(必须明码标价!):
Up to 60% off original price
物品新旧要求:
邮寄方式要求:
You chose you pay
买卖双方谁承担邮寄损失(Required if not code only):
Before mail on me
After mail on you
付款方式说明: |
|
d*******u 发帖数: 5337 | 23 Hi reviewers,
I wish you all have a happy new year.
Please check the following manuscripts to Biomedicine and pharmacotherapy.
If you are interested in reviewing these manuscripts, send your background
and Ms #. Feel free to pass this information to your friends and collogues.
Best regards,
xxxx
Executive editor
Biomedicine and Pharmacotherapy
1. Antiproliferative activity of Corylus avellana L. extracts against
human cancer cell lines
2. Poloxamer Surface modified Trimethyl Chitosan Nano... 阅读全帖 |
|
q****3 发帖数: 950 | 24 Journal:Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects
Topic: FORMATION AND CHARACTERIZATION OF BIOBASED MAGNETIC NANOPARTICLES
DOUBLE COATED WITH DEXTRAN AND CHITOSAN BY LAYER-BY-LAYER DEPOSITION |
|
s*****l 发帖数: 175 | 25 1. Semin Nephrol. 2014 Mar;34(2):135-50. doi: 10.1016/j.semnephrol.2014.
02.006. Epub 2014 Feb 18.
Gases as uremic toxins: is there something in the air?
Jankowski J1, Westhof T2, Vaziri ND3, Ingrosso D4, Perna AF5.
2. Future Microbiol. 2014 Mar;9(3):399-410. doi: 10.2217/fmb.13.165.Role
of altered intestinal microbiota in systemic inflammation and cardiovascular
disease in chronic kidney disease.Mafra D1, Lobo JC, Barros AF, Koppe L,
Vaziri ND, Fouque D.
3. Expert Opin Drug Metab Toxic... 阅读全帖 |
|
p****u 发帖数: 1940 | 26 【 以下文字转载自 Physics 讨论区 】
发信人: perliu (友心), 信区: Physics
标 题: paper help
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 21 14:47:29 2007), 站内
Journal of Polymer Science
Volume 18, Issue 88 , Pages 303 - 304
Osmotic measurements on dilute dextran solutions
E. Mariani, A. Ciferri, M. Maraghini
Istituto di Chimica Applicata ed Industriale, Facoltà d'Ingergneria,
Università di Roma
L*[email protected]
thank you!!! |
|
h****g 发帖数: 439 | 27 Really?
how about PFA?
and do you think I need keep the tissue from light when the tissue is cut
and fixed? Thanks, |
|
i*****r 发帖数: 65 | 28 大家好,请帮忙找一篇文献:
Wechezak, A.R., et al., Dextran increases survival of subconfluent
endothelial cells
exposed to shear stress. American Journal of Physiology - Heart and
Circulatory
Physiology, 1993. 264(2 33-2): p. H520-H525.
我们学校的图书馆没有订阅。
请发到邮箱:
w******[email protected]
非常感谢! |
|
C****7 发帖数: 270 | 29 我想卖的物品:
Bovine Pit. Extract (BPE)
Anastrozole
Charcoal/Dextran Treated Fetal Bovine Serum
Dulbecco's Modified Eagle Medium (D-MEM) (1X), liquid (4.5 g⁄L D-
glucose)
RPMI Medium 1640 (1X), liquid.Contains L-glutamine, but no phenol red.
GAPDH siRNA
X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent
Opti-MEM® I Reduced-Serum Medium
可接受价格(必须明码标价!):
Up to 60% off original price
物品新旧要求:
邮寄方式要求:
You chose you pay
买卖双方谁承担邮寄损失(Required if not code only):
Before mail on me
After mail on you
付款方式说明: |
|
a***e 发帖数: 1010 | 30 run a control, such as 溴芬蓝 & dextran blue first. |
|
|
|
l**********1 发帖数: 5204 | 33 Please go to
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2518226/
>Overall, our results suggest that PUB22 and PUB23 coordinately control a
drought signaling pathway by ubiquitinating cytosolic RPN12a in Arabidopsis.
Subcellular Localization
The sGFP cDNA clone was fused in-frame to the 59 end of the full-length
PUB22 and PUB23 coding region and ligated into the pBI221 transient
expression vector. The sGFP-PUB22 and sGFP-PUB23 fusion constructs
were transformed into protoplasts prepared from wild-typ... 阅读全帖 |
|
m**p 发帖数: 2471 | 34 http://books.google.com/books/about/Surface_Tension_of_Pulmonar
Surface Tension of Pulmonary Surfactant Systems
Pulmonary surfactant facilitates respiration by reducing the surface tension
in the alveoli. To study the surface activity of pulmonary surfactant films
under physiologically relevant conditions, several experimental methods
were developed to measure surfactant film interfacial tension with
Axisymmetric Drop Shape Analysis (ADSA). Using a pendant drop method, the
film formation of a th... 阅读全帖 |
|
m**p 发帖数: 2471 | 35 http://www.mie.utoronto.ca/labs/last/recent.htm
392. Lu, J.J., Yu, L.M.Y., Cheung, W.W.Y., Policova, Z., Li, D., Hair, M.L
., and Neumann, A.W.: “The Effect of Concentration on the Bulk Adsorption
of Bovine Lipid Extract Surfactant (BLES)”, Colloids Surfaces B:
Biointerfaces 29, 119-130, 2003.
393. Lu, J.J., Cheung, W.W.Y., Yu, L.M.Y., Policova, Z., Li, D., Hair, M.L
., and Neumann, A.W.: “The Effect of Dextran to Restore Dynamic Surface
Tension Properties of Pulmonary Surfactant Inhibited b... 阅读全帖 |
|
t*******3 发帖数: 2005 | 36 我不认为那个多伦多的博士学位是假的,理由如下:
1。有id在生物版里说陆骏申请千人计划的时候提供了MIT的Robert Langer的推荐信:
发信人: zyh (CH2O), 信区: Biology
标 题: Re: 一件奇怪的事
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jul 27 07:45:16 2012, 美东)
陆骏 claimed that he was a postdoc from Robert Langer and was working at
Merck before his application. He applied for 1000 young talents through two
universities at the same time. In his application package, he provided the
recommendation letter from Langer.
==============================================
2。有人查到Langer和lu Jun(非耶鲁卢军)合作的文章:... 阅读全帖 |
|
o*****n 发帖数: 445 | 37 刚看了一下网上资料,好像按1:4加入50%的DMSO,然后缓慢冰冻就可以了。
还有的建议加dextran来降低血液粘度,不过没说怎么用。
有人有建议吗? |
|
e**e 发帖数: 166 | 38 我的蛋白是高尔基体上膜蛋白复合体。大概400-500Dka。
我用NP40 溶解后,用60%的(NH4)2SO4沉淀可以得到60%的活性。 现在
过分子筛柱。
我有个(LKB Triacryl GF200)的柱子 (1。6 x 60cm) (120,000-
15,000,000)。 我用Hepes buffer (1ml/min的流速。 我在用Blue
Dextran (MW 2,000,000)和BSA 的时候, 发现他们同时一起出来了。
这个柱子可以分离吗? 还有别的建议吗? |
|
C****7 发帖数: 270 | 39 我想卖的物品:
Bovine Pit. Extract (BPE)
Anastrozole
Charcoal/Dextran Treated Fetal Bovine Serum
Dulbecco's Modified Eagle Medium (D-MEM) (1X), liquid (4.5 g⁄L D-
glucose)
RPMI Medium 1640 (1X), liquid.Contains L-glutamine, but no phenol red.
GAPDH siRNA
X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent
Opti-MEM® I Reduced-Serum Medium
可接受价格(必须明码标价!):
Up to 60% off original price
物品新旧要求:
邮寄方式要求:
You chose you pay
买卖双方谁承担邮寄损失(Required if not code only):
Before mail on me
After mail on you
付款方式说明:
BOA
其他 |
|
t******o 发帖数: 5314 | 40 DETERMINATION OF DEGREE OF SUBSTITUTION OF FORMYL GROUPS IN POLYALDEHYDE
DEXTRAN BY THE HYDROXYLAMINE HYDROCHLORIDE METHOD
Author(s): ZHAO H, HEINDEL ND
Source: PHARMACEUTICAL RESEARCH Volume: 8 Issue: 3 Pages: 400-402
Published: MAR 1991
thanks a lot. baozi ready |
|
|
|
|
W*****s 发帖数: 684 | 44 Sakamoto et al., 1977 Y Sakamoto, Y Akanuma, K Kosaka and B Jeanrenaud,
Comparative effects of native insulin and insulin–dextran complexes on the
metabolism of adipose tissue. Biochim. Biophys. Acta, 498 (1977), pp. 102
–113. Article | PDF (636 K) | | View Record in Scopus | | Cited By in
Scopus (3)
Thanks! |
|
W*****s 发帖数: 684 | 45 Klinger, D.; E.M. Aschenbrenner; C.K. Weiss K. Landfester, Enzymatically
degradable nanogels by inverse miniemulsion copolymerization of acrylamide
with dextran methacrylates as crosslinkers. Polymer Chemistry, 2012. 3(1): p
. 204-216. |
|
b**s 发帖数: 589 | 46 you want to increase COOH密度, maybe their method are better. Because
"一步plasma deposition" can only happen on the PU surface, while dextran
polymer chain can fold, so bring more COOH in.
去
么 |
|
S*****P 发帖数: 323 | 47 分子量越大越好, 越linear越好, 荧光最好是均匀地分布在链上. 多谢~~
我现在在用molecular probes的 dextran. |
|
o****n 发帖数: 25 | 48 FITC-dextran 不好么?
有分子量到2×10^6,挺大了 |
|
p****e 发帖数: 40 | 49 关于1: 不清楚,不过觉得应该不是结构单元数。应该是和detector信号强度对应的,
所以我认为对应着不同size的population,就是个相对值,和质谱峰强度的意义差不多。
关于2:我自己的经验(不是很丰富,只测过我自己的一个样品,供参考)。我用的是
DMSO做流动相,也是考虑到标样选择的问题,我查了文献,这样的体系的确不多,不过
有人用dextran 或者pullulan做标样,其实这两种标样一般是用于水相GPC的,考虑到
他们的极性也都比较大(聚糖),应该还是有对比价值的。最后我用了detran,我实际
上是用它作为一个对比样品(因为我们只有一个分子量的样品),并非严格意义的标样
。GPC系统的标定其实还是用的PS(THF流动相),然后测了那个detran(DMSO流动相w/
1g/L LiBr),结果和标签值吻合,我也就据此认为用这个体系测我的样品数据是可靠
的。 |
|
p*****r 发帖数: 805 | 50 这个有道理。我还没有想到相分离对结构的影响,我的水凝胶应该是物理交联的,不知
道影响大吗?我们用不同分子量的荧光标记的dextran测了一下diffusion,发现湿态水
凝胶孔径确实应该在几个纳米和几百纳米之间, 但是由于制备的参数不同,孔径大小
我想应该也有差异,所以想到可不可以用SEM来确认一下。TEM可以做湿态水凝胶? |
|