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全部话题 - 话题: cycline
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b**********8
发帖数: 349
1
来自主题: Biology版 - 请教:cyclin D1
谢谢你的回复。所有的实验都是用一条阴性对照,两条不同位点的siRNA,细胞周期和
cyclin D1表达变化都是一致的。
另外,可能我没表达清楚我的意思,我的问题是,对于S期阻滞的情况,既往文献一般
都报道cyclin D1表达是下调的,为何我这里反而上调了?
r****o
发帖数: 105
2
来自主题: Biology版 - Re: help me with cyclin D1 western
做科学要讲究严谨和逻辑性。你这样问问题不明不白,什么
背景也没有,很难让人帮你分析。
先问你几个问题:
(1) 你的一抗是单抗还是多抗?
(2)你有无对照证明二抗没有坏?
(3)你的阳性对照( 100KD)是Whole Cell lysate 还是纯的Cyclin D1?
(4)你用的是何种封闭剂?non-fat dry milk?BSA? Gelatin?
(5)你有没有做较长时间exposure,确定另一个样品和对照根本没有
36KD的带?

建议你首先找一个非常肯定的阳性对照,用没坏的一抗二抗试一遍,
然后再做样品。
s******y
发帖数: 28562
3
我们最近在侧cyclin D1 的时候,抗体测出了一个35kD的弱带和一个 50kD 的
强带,而且这两条带在不同的处理里面变化还是不一致的。
想请问一下,那个50kD的是否是已知的磷酸化的cylin D1的形式?
谢谢!
s******y
发帖数: 28562
4
我们也觉得很奇怪。
但是那个50kD的带很强,比35kD的强得多。
抗体是 Santa Cruz (sc717) anti-cyclin D1
不知道cyclinD1 immunoprecipitation 是否好做?
如果好做的话我们拿去做一下Mass Spec
i*****n
发帖数: 53
5
50KD 的带应该是非特异的。 DSC-6 这个Antibody 还可以,但是因为是mouse 来源的,用它做老
鼠的组织,还是会有background. 试了非常多的抗体之后, 我们才发现 SP4 clone(rabbit
monoclonal) 是最好用的。病理医生都用这个做MCL 的检测。 Cyclin D1 磷酸化的形
式离35-36 并不远,非常近。
b**********8
发帖数: 349
6
来自主题: Biology版 - 请教:cyclin D1
最近发现一个基因,肝癌里面高表达,用siRNA敲除后,细胞增殖受抑制,细胞周期分
析发现被阻滞在S期,做western 发现cyclin D1 明显上调,请问怎么解释?有什么好
的思路可以继续下去吗?谢谢各位大神!
f******g
发帖数: 1003
7
来自主题: Biology版 - 请教:cyclin D1
Sirna 是瞬时敲降吧,另外,要验证其敲降效率,还要多选几条siRNA以防止off-
target.
你过表达d1,看看liver cell是否剧烈增殖,改变细胞周期。移植入小鼠,是否成瘤。
然后就是机制探讨。往各种通路上扯关系。
读文献,is cyclin d1 ko available ? 看看有什么和你的发现一致的表型。
如果胚胎致死,看看条件瞧出有吗,cross with liver-specific cre.
昨天刚刚看到一篇文章,说d1敲除小鼠无血细胞了,估计是胚胎致死
s*********t
发帖数: 600
8
最激动人心的科学是现在
—为Tim Hunt学术报告的引言
当我的年龄接近于在座的多数时,我有个和你们一样的担心:最好的科学都已经做掉了
,我们没有赶上过去的好时代。
确实,很多进入科学不久的人,在经历最初的激动后,常常发现科学研究的日常有很多
重复工作:克隆基因、纯化蛋白
质、培养细胞、筛选突变…。一般来说,手头的工作好像远远不如听老师讲的科学发现
故事那么精彩、那么美妙。
不少学生会失望,可能还会转而埋怨:现代科学已经变质了,都是骗我们进来做苦力。

这不是新的现象,不仅你们现在,我们二三十年前,也有学生经常聚在一起说同样的话
。比如我在中国是1983年开始念
研究生,我的同学里就有很多这样的议论。
但是,事实上,我们今天的学术报告人,Tim Hunt博士,就是在1982年,做出他最重要
的工作(发现cyclin分子,
1983年发表)。也就是说,象我一样愚蠢和不敏感的人正在发表自以为是的高论的时候
,正是Tim这样的科学家,他们
有洞察力、有敏感性、或者有运气,正在做突破性的发现。
等我1985年到UCSF读研究生后,不长的几年内,我们看到,在美国、英国、加拿大、日... 阅读全帖
n*****2
发帖数: 358
9
【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: freeangle (华夏后裔), 信区: WaterWorld
标 题: 方舟子美国专利真相调查(ZT)
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Feb 20 00:36:48 2012, 美东)
本帖最后由 jshi6210 于 2010-7-13 11:58 编辑
方舟子美国专利真相调查(ZT)
万维读者网络>教育与学术
美国永久居民、所谓“打假斗士”方舟子常常在中美之间飞来飞去,他经营的美国网站
新语丝,据说每天点击五六十万。他何以为生、维持网站运营,是长期以来大家比较感
兴趣的一个问题。今天因为甘怀远同学的揭露,进行了一番饶有趣味的搜索。
1. 方舟子的博士后在索尔克生物研究院进行 方舟子,本名方是民,1967年9月生于
福建云霄县。1985年考入中国科技大学生物系。1990年本科毕业后赴美留学。1995年获
美国密歇根州立(Michigan State)大学生物化学博士学位,先后在罗切斯特(
Rochester)大学生物系、索尔克(Salk)生物研究院做博士后 …
scitec... 阅读全帖
f*******e
发帖数: 2791
10
来自主题: WaterWorld版 - 方舟子美国专利真相调查(ZT)
本帖最后由 jshi6210 于 2010-7-13 11:58 编辑
方舟子美国专利真相调查(ZT)
万维读者网络>教育与学术
美国永久居民、所谓“打假斗士”方舟子常常在中美之间飞来飞去,他经营的美国网站
新语丝,据说每天点击五六十万。他何以为生、维持网站运营,是长期以来大家比较感
兴趣的一个问题。今天因为甘怀远同学的揭露,进行了一番饶有趣味的搜索。
1. 方舟子的博士后在索尔克生物研究院进行 方舟子,本名方是民,1967年9月生于
福建云霄县。1985年考入中国科技大学生物系。1990年本科毕业后赴美留学。1995年获
美国密歇根州立(Michigan State)大学生物化学博士学位,先后在罗切斯特(
Rochester)大学生物系、索尔克(Salk)生物研究院做博士后 …
scitech.people.com.cn/GB/25509/43690/index.html
2. 方舟子本人如此解释他的收入来源 方舟子:我把博士后研究时做的东西(克隆
了一个基因)申请了专利,得到一笔钱,可以维持基本生活费用。同时,我与人合作在
国内开了个专... 阅读全帖
j*b
发帖数: 341
11
Nature. 2010 Jan 21;463(7279):374-8.
Transcriptional role of cyclin D1 in development revealed by a genetic-
proteomic screen.
Abstract
Cyclin D1 belongs to the core cell cycle machinery, and it is frequently
overexpressed in human cancers. The full repertoire of cyclin D1 functions
in normal development and oncogenesis is unclear at present. Here we
developed Flag- and haemagglutinin-tagged cyclin D1 knock-in mouse strains
that allowed a high-throughput mass spectrometry approach to search for
... 阅读全帖
l*****e
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12
【 以下文字转载自 MedicalCareer 讨论区 】
发信人: logocde (logo), 信区: MedicalCareer
标 题: 妻子病理报告疑似 MALT Lymphoma, 心里一团麻,请问报告的准确性
发信站: BBS 未名空间站 (Thu May 26 03:47:25 2016, 美东)
妻子刚过了34岁生日,家里一个3岁一个1岁娃。接到大夫电话自己都傻了,到现在不是
很相信,恳请版上热心的朋友帮忙看看这个确定的概率有多大,感激不尽。另外如果有
好的南加地区的 ONCOLOGIEST 也恳请推荐。
大致情况是去年初生了老二之后,在月子里有一天吃了朋友送的酒酿之后当日小腹疼,
拉稀,之后断断续续一直这样时好时坏。因为哺乳所以没吃药。后来家里给寄了一些叫
“思密达”的粉状药说可以缓解症状吃了很多。到去年入秋突然有一晚胃疼的直不起腰
,去看了primary physician,作了血检,什么也没查出来,而且到了那就不那么疼了
,给refer了GI specialist,也没说什么就说要注意饮食。今年3月初又一次疼痛难忍,
去了PRIMARY ,给吃了药没好,又打... 阅读全帖
l*****e
发帖数: 594
13
妻子刚过了34岁生日,家里一个3岁一个1岁娃。接到大夫电话自己都傻了,到现在不是
很相信,恳请版上热心的朋友帮忙看看这个确定的概率有多大,感激不尽。另外如果有
好的南加地区的 ONCOLOGIEST 也恳请推荐。
大致情况是去年初生了老二之后,在月子里有一天吃了朋友送的酒酿之后当日小腹疼,
拉稀,之后断断续续一直这样时好时坏。因为哺乳所以没吃药。后来家里给寄了一些叫
“思密达”的粉状药说可以缓解症状吃了很多。到去年入秋突然有一晚胃疼的直不起腰
,去看了primary physician,作了血检,什么也没查出来,而且到了那就不那么疼了
,给refer了GI specialist,也没说什么就说要注意饮食。今年3月初又一次疼痛难忍,
去了PRIMARY ,给吃了药没好,又打了一止疼针才慢慢好点,再次约了GI SPECIALIST
,给约了肠镜和胃镜。五月初作的时候发现肠内有息肉,切除了送去作病例。早上妻子
接到电话说晚上大夫会给我们打电话,并且叮嘱我也一定在场,我就觉得不好。刚才好
容易把老大哄睡了,这会自己乱七八糟的GOOGLE 半天,感觉好像基本靠谱,但是不太
死心,毕竟什么都是有概... 阅读全帖
m****g
发帖数: 530
14
来自主题: _Harvard_Medical_School版 - 识别出一种常见乳腺癌的前体细胞
美国塔夫茨大学医学院的研究人员通过对老鼠研究发现两种与乳腺细胞分化有关的前体
细胞中,其中一种或许是导致管腔
型的乳腺癌的前体细胞。这项研究发表在1月19日的《Cancer Cell》杂志上,或将对治
疗乳腺癌提供一种新的治疗靶标。
乳腺癌一般分为两类:一类是管腔型(Luminal-like)乳腺癌,这种乳腺癌对激素十分敏
感,生长缓慢,是乳腺癌中最常见的
一种;另一种是具有侵润性的基底细胞样型(Basal-like)乳腺癌,这种乳腺癌对激素不
敏感,一般预后较差。之前有研究人员
认为这两种癌症可能是由不同的前提细胞分化而来。
最近,塔夫茨大学Charlotte Kuperwasser主持的课题组对老鼠研究,发现了不同类型
的乳腺前体细胞,而管腔型乳腺癌
细胞来自于小叶前体细胞(lobule progenitors)的分化。研究人员还发现,这类前体细
胞与一种参与细胞自我更新和分化的
蛋白质cyclin D1的活性有关。研究人员使模式老鼠中cyclin D1蛋白失活,与对照组小
鼠相比,cyclin D1蛋白失活组老鼠
小叶祖细胞的数量很少,且不出现管腔型乳腺肿瘤。
研究人员解释,导管
e******t
发帖数: 3289
15
IF 3.4 分
Cell Physiol Biochem. 2013;31(1):113-22. doi: 10.1159/000343354. Epub 2013
Jan 25.
External Qi of Yan Xin Qigong inhibits activation of Akt, Erk1/2 and NF-&#
312;B and induces cell cycle arrest and apoptosis in colorectal cancer cells.
Yan X, Shen H, Jiang H, Hu D, Wang J, Wu X.
Source
Chongqing Institute of Traditional Chinese Medicine, Chongqing, China.
Abstract
Background/Aims: Colorectal cancer (CRC) is the second leading cause of
cancer death in the Western countries. Novel approac... 阅读全帖
r******t
发帖数: 8967
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【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: xiaomingxiao (xiaomingxiao), 信区: Biology
标 题: 气功大师发表的SCI,牛啊
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Aug 5 15:48:20 2013, 美东)
Cell Physiol Biochem. 2013;31(1):113-22. doi: 10.1159/000343354. Epub 2013
Jan 25.
External Qi of Yan Xin Qigong inhibits activation of Akt, Erk1/2 and NF-&#
312;B and induces cell cycle arrest and apoptosis in colorectal cancer cells.
Yan X, Shen H, Jiang H, Hu D, Wang J, Wu X.
Background/Aims: Colorectal cancer (CRC) is the second leading cause of
cancer death... 阅读全帖
n*7
发帖数: 51
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来自主题: Biology版 - 请帮忙找两篇老文章,先谢了
Shirodkar, S., M. Ewen, J. A. DeCaprio, J. Morgan, D. M. Livingston, and
T. Chittenden. "The Transcription Factor E2F Interacts with the
Retinoblastoma Product and a p107-Cyclin A Complex in a Cell Cycle-
Regulated Manner." Cell 68, no. 1 (1992): 157-166.
Hayles, J., D. Fisher, A. Woollard, and P. Nurse. "Temporal Order of S
Phase and Mitosis in Fission Yeast Is Determined by the State of the
p34cdc2 Mitotic B Cyclin Complex." Cell 78, no. 5 (1994): 813-822.
oaixil AT hotmail.com
x**********o
发帖数: 142
18
来自主题: Biology版 - 气功大师发表的SCI,牛啊
Cell Physiol Biochem. 2013;31(1):113-22. doi: 10.1159/000343354. Epub 2013
Jan 25.
External Qi of Yan Xin Qigong inhibits activation of Akt, Erk1/2 and NF-&#
312;B and induces cell cycle arrest and apoptosis in colorectal cancer cells.
Yan X, Shen H, Jiang H, Hu D, Wang J, Wu X.
Background/Aims: Colorectal cancer (CRC) is the second leading cause of
cancer death in the Western countries. Novel approaches of treatment are
needed for CRC. The purpose of the present study was to investigate
cytotox... 阅读全帖
b*****t
发帖数: 1700
19
来自主题: ChinaNews版 - 国内人一个很奇怪的论点
你只转了他原话的一次,再来几次,都说的“专利费”,从未有“奖金”二字出现
我有一个专利,几年前我在做研究的时候,我当时和同事们克隆了一个基因,这个基因
产品和艾滋病治疗有关系,所以有药厂买了我们这个专利,每年支付一些专利费用,这
些可以保证我的一些基本生活费用
[新华网采访:《海外学人方舟子谈“学术腐败”》,方舟子自己贴于xys]
http://www.xys.org/xys/netters/Fang-Zhouzi/science/xinhuanet2.t
我现在属于自由职业,收入比较杂一些。一个是我还在做科学研究的时候,我们那个实
验室就克隆了一个基因,这个基因跟艾滋病有一些关系,可以用它来做药,药厂会支付
专利费。
[央视国际采访:《方舟子:揭穿“皇帝新装”》]
我是一个自由职业者,收入比较零散。例如,我在做科学研究的时候,我们那个实验室
克隆了一个基因,这个基因跟艾滋病有一些关系,可以用它来做药,所以有药厂来用,
这样他们会支付专利费
[《南方人物周刊》曾繁旭、吴虹飞、陈磊采访:《方舟子 我是过渡人物》]
今年34岁的方在美国受的训练,是一家生物信息公司的咨询顾问,并从一家生物技... 阅读全帖
g*********r
发帖数: 9366
20
来自主题: ChinaNews版 - [合集] 国内人一个很奇怪的论点
☆─────────────────────────────────────☆
grasshopper (大肚子哥哥 (singing crickets)) 于 (Mon Jan 2 14:26:47 2012, 美东) 提到:
就是 “ 你一个美国大学的生物化学博士, 不好好做科研....."
靠, 为啥美国大学的博士就得去做科研?
为啥你们这些学这个那个的就可以去开公司办企业,写书走穴当领导? 莫非你们大学
专业是CEO管理和精英管理?
还不是看方舟子打假出了名,羡慕嫉妒恨呗
☆─────────────────────────────────────☆
bibicat (bibicat) 于 (Mon Jan 2 15:01:35 2012, 美东) 提到:
国内人吗,觉得出国读博士的都是科学家
肘子在美国估计还真混得不怎么样,主要靠给国内报刊杂志写写文章和写中文科普书籍
拿稿酬为生
不过现在成为名人了,随便一个讲座的出场费就不少,书出了20多本来,土豆上都有视
频专栏了,估计年收入怎么也超过$20w了吧
肘子回国还是对的,多年逃税在美国被IRS查到不得了... 阅读全帖
o******e
发帖数: 575
21
来自主题: Military版 - 没人818方舟子为什么回国吗
《也谈方舟子“最聪明”“非常适合作科研”》
方舟子的今天的一番自我煽情,真是说可以笑死人。全文付在下面,这里
先引一段:
》我的导师认为我是他见过的最聪明的学生,非常适
》合做科学研究工作,在我申请博士后、研究基金时,
》都给予最强烈的推荐。
英文俗话说,YOU CAN TALK THE TALK,CAN
YOU WALK THE WALK?再简单明了点,就是SHOW
ME THE MONEY。方的导师居然如此高评方舟子,那么我们
不妨先来看看方舟子在读博士期间发表了什么文章:
RNA Polymerase II-associated Protein (RAP) 74 Binds
Tran????ion Factor (TF) IIB and Blocks TFIIB-RAP30 Binding.
S.M. Fang and Z.F. Burton
The Journal of Biological Chemistry, 270, 11703-11709 (1996).
A cDNA encoding RAP74, a General Initiation Factor for
Tra... 阅读全帖
M******r
发帖数: 38
22
来自主题: Medicine版 - 朋友淋巴瘤求助(长, 慎入!)
病情概述:
患者女性,32岁,乙肝携带者,病前装修新房兼小孩,较累。2010年3月1日发现左耳后
,左颈部,左侧锁骨淋巴结全部肿大起来,当地省立医院做的病理:
一、当地医院做的病理
滤泡性淋巴瘤(FL1-2级,滤泡型为主)
免疫组化结果:BcL2(+++),BcL-6(++),CD10(+),CD20(+++),CD3(-),
CD43(+),CD79a(++),Ki67(80%),CD21(++),CD5(-),Cyclin D1(-)
PET-CT:脾脏体积增大,达8个肋单元,SUV最大值10.1。左侧颈部、左锁骨区、腹腔、
腹膜后、盆腔及右侧腹股沟区见多枚高代谢的淋巴结,大小介于0.5CMx0.5CMx0.5CM-4.
8CMx3.0CMx3.5CM之间,SUV最大值介于5.9-20.8之间.
定为三期,没做骨穿,不知道当时是否有骨侵。
LDH:311,B2微球蛋白正常.乙肝病毒DNA:4.98E5 copies/ml,乙肝表面抗原>250IU/ml,
乙肝e抗原2.3S/C.O,乙肝核心抗体9.71 S/C.O,治疗开始一直服用博路定-恩替卡韦片.
r*********d
发帖数: 42
23
今天出了肠镜取样的免疫组化结果。
CD3 (-); CD20 (+); CD79a (+); Bcl-2 (+); CD23 (-); CD5 (-); Cyclin D1 (-);
Ki67 (约60% +); EBER (原位杂交) (-); CD10 (+); MPO (-); TdT (-)
医生认为是非霍奇金B细胞淋巴瘤,考虑弥漫大B细胞淋巴瘤或B淋巴母细胞性淋巴瘤,
建议查找血象和骨髓像进一步明确。
这一个“或”字,需要继续骨髓穿刺检测,又要一个礼拜的时间。而老爸已经奄奄一息
,不知道届时结果出来,是否还能承受任何化疗。。。因为这个结果,明天可以找肿瘤
科医生面谈,不知道是否能尽快先用药治疗。。。
求各位建议,谢谢。
B*********e
发帖数: 273
24
来自主题: NextGeneration版 - [合集] 急问,刨腹产的问题,在线等
☆─────────────────────────────────────☆
tinaD (天娜) 于 (Sun Aug 23 15:31:44 2009, 美东) 提到:
急问,明天刨腹产拆线,19日刨腹产,貌似明天是先拆肚皮的那几个貌似订书针一样的
东西,23日才正式拆线。第一次刨腹,不是很明白,请问有类似的姐妹,这样拆线疼吗
?怎莫拆?
☆─────────────────────────────────────☆
suking (蜗牛妈) 于 (Sun Aug 23 16:21:40 2009, 美东) 提到:
不痛。
☆─────────────────────────────────────☆
cyclin (joyce) 于 (Sun Aug 23 17:01:32 2009, 美东) 提到:
为什么外面要缝线呢? 我外面只订了订书订。

☆─────────────────────────────────────☆
tinaD (天娜) 于 (Sun Aug 23 17:36:30 2009, 美东) 提到:
我说的就是订书订
b********o
发帖数: 772
25
☆─────────────────────────────────────☆
everafte (ever) 于 (Tue Sep 29 01:15:22 2009, 美东) 提到:
五天的小孩子,三个小时喂一次,每次能吃多少奶?
我家宝宝现在能吃60ml,本来很有成就感,一个护士不停的夸宝宝很能吃,very
strong,本来很有成就感。结果晚上换了一个护士,就跟我们说,有的小宝宝最多可以
吃120毫升,顿时很泄气。姐妹们觉得可能吗?
☆─────────────────────────────────────☆
cyclin (joyce) 于 (Tue Sep 29 01:37:41 2009, 美东) 提到:
5天能吃60ml 很好了,2个月的baby 才3 小时吃120ml

☆─────────────────────────────────────☆
frada (微风轻哨) 于 (Tue Sep 29 02:46:18 2009, 美东) 提到:
我基本上全胸喂,完全不知道宝宝吃了多少,吃饱了没有。好担心饿着宝宝啊!
☆─────────
y***u
发帖数: 1467
26
来自主题: Immigration版 - 一篇中文审稿 (gone)
"胃癌中CDC4和CyclinE的表达及临床意义"
from a just so so chinese journal.
If you are interested in, please contact me at y*****[email protected]
s**a
发帖数: 1995
27
http://www.guardian.co.uk/environment/ethicallivingblog/2009/aug/17/bike-
blog-robbery
It is horrible to imagine someone will use your expensive kryptonite chain
lock to hit you.
h******2
发帖数: 1498
28
Why was he riding through the ghetto of London? Would you ride your bike
through Harlem?
s**a
发帖数: 1995
29
I used to ride in Halem after dark in fall 2008 in my daily commute.
Probably 3 miles in Harlem

bike
h******2
发帖数: 1498
30
time to buy life insurance :)
s**a
发帖数: 1995
31
Have two million on me. :)
f****i
发帖数: 20252
32
Riding through the ghetto area on a Walmart bike is way better than
walking through it.
b******n
发帖数: 1269
33
Dude, if you took RSD, then it doesnt qualify as "riding through Harlem"...
That said, Harlem isnt that bad...
w********6
发帖数: 12977
34
terrible experience for anyone, but should try to remember even one of the
faces.
r**r
发帖数: 171
35
A good CSF extract should be arrested @ metaphase.
After the addition of calcium or fertilization which causes a transient
increase in cytoplasmic calcium conc., the CSF will be inactivated, following
by APC activation, cyclin B destruction and mitotic exit. And this process is
roughly 30 min. It is easy to collect phosphorylated separase before the
addition of calcium. To collect the unphosphorylated one, like you say, you
can throw sperm chromatin into extract and monitor the progresstion by D
c*********r
发帖数: 1312
36
来自主题: Biology版 - wnt 通路还有得做没?
说道微调,刚看了篇文章说Wnt pathway和cell cycle相关,LRP S1490在G2/M期被
CDK14/Cyclin Y磷酸化导致Beta-catenin富集,还是挺有意思的。wnt和细胞周期、纺
锤体、centrosome、oriented cell division等等等等都能扯上点关系。。。
另外,Wnt的主要components基本上发现的差不多了,但不同的条件下哪些蛋白参与了
,怎么参与了还不清楚。比如海葵海胆早期发育(很早很早)时wnt pathway是激活的
,但似乎不需要Wnt ligand的参与;比如LRP、dishevelled等有那么多磷酸化位点,具
体怎么被磷酸化的,还不是很清楚。。。
y********e
发帖数: 104
37
http://journals.prous.com/journals/servlet/xmlxsl/pk_journals.xml_summary_pr?p_JournalId=2&p_RefId=1444203&p_IsPs=N
An overview on the cyclin-dependent kinase 9-related pathway
Romano, G.
Drugs Fut 2010, 35(1): 59
z****a
发帖数: 1
38
Hi,
Could somebody upload again the article:
http://journals.prous.com/journals/servlet/xmlxsl/pk_journals.x
An overview on the cyclin-dependent kinase 9-related pathway
Romano, G.
Drugs Fut 2010, 35(1): 59
I would urgently need it!
Thanks!
s******y
发帖数: 28562
39
来自主题: Biology版 - Sigma这个垃圾公司气死我了!
因为我用了很高的浓度 (50-100ug/mL), 不光我自己想看的蛋白不降解,
连几个常见的内参比蛋白cyclin D, IKBa都不降解。两年前我也用过同样的
浓度和同样的产品,那个时候就好好的没有什么异常。隔壁实验室的产品和
我们订的是一批,他们也有类似问题。
那个anti-FLAG (M2) 早几年的批次非常好,但是今年我们碰到一个不好的。
p*****m
发帖数: 7030
40
倒也没有。。细胞周期的那个奖放了一下狗才想起来,像cyclin这种发现上了教科书的
反而不容易记住什么杂志发的。还有,gene targeting那个奖 出了capecchi其他两个
我都不知道做了什么。。太土了 不是做老鼠的我
O******e
发帖数: 4845
41
老鼠的没做过,但你这个50KD也太大了点吧,磷酸化的也应该是离35不远。
你用的哪家的抗体?
j*****d
发帖数: 787
42
好像不对哦
http://www.cellsignal.com/products/2926.html
CycD1作IHC好使的
s******u
发帖数: 81
43
有没有其它Posttranslational modification的可能,比方SUMO?
s******y
发帖数: 28562
44
不知道啊!所以上来问大家啊。
我是第一次涉及这个蛋白。
i*****l
发帖数: 51
45
应该是抗体非特异性条带。该公司每个蛋白都有好几种抗体,特异性也不同,换DCS6抗
体试试。
s******y
发帖数: 28562
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嗯,明天我向他们抗议一下,让他们给我换抗体。
h**********8
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SUMO倒是有可能
不过貌似非特异的条带吧?
d****7
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我现在也有类似的情况,可能是抗体的问题,比如我现在用的一个Cell signaling的
FOXO3a抗体,
在大概90kD有条带,在70kD也有条带,70kD那条带的表达量随细胞周期变化,90kD那条
带却很稳定,
而Cell signaling网页上的图却只有恨特异的一条带。呃。。。
s******y
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嗯。他们网页上也是只有35的一条强带,根本就看不到50的带。
而且最让我晕倒的是50的带的变化和我们实验设想的非常吻合,
而35的带根本就和我们的假说南辕北辙。
所以弄不好我们得把50的带IP 下来送去查查看到底是什么东西
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