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全部话题 - 话题: cip
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L***o
发帖数: 170
1
来自主题: WashingtonDC版 - 有谁知道CIP standards 200个包子
re!
z***y
发帖数: 7151
2
来自主题: WashingtonDC版 - 有谁知道CIP standards 200个包子

打听的差不多了。这个行业做IT的都要有这个认证。
v**n
发帖数: 219
3
来自主题: WashingtonDC版 - 有谁知道CIP standards 200个包子
Re
h*********r
发帖数: 1943
4
来自主题: GunsAndGears版 - 请推荐能射千米以上的猎枪
我感到不太理解,Blaser的结构一样要旋转栓柄闭锁,撑片通过传递的力矩全面撑开
360卡进管子度,据我所知chamber确实精度很高,但只要符合SAAMI或者CIP标准,有些
许的偏差,只要不到No go应该都可以。而且这结构本身也已经证明了强度很高,K31的
例子真的能套在这个完全不同的结构上?我表示怀疑
t******y
发帖数: 5040
5
来自主题: GunsAndGears版 - 请推荐能射千米以上的猎枪

360卡进管子度,据我所知chamber确实精度很高,但只要符合SAAMI或者CIP标准,有些
许的偏差,只要不到No go应该都可以。而且这结构本身也已经证明了强度很高,K31的
例子真的能套在这个完全不同的结构上?我表示怀疑
“Blaser的结构一样要旋转栓柄闭锁”这个不对吧?
BLASER是直推的枪栓,枪柄只前后运行。
如果我没有理解错的话,它的那个独特的八爪鱼的枪机头不是旋转闭锁的,而是膨胀闭
锁的,跟那些高压的气管的接头件的原理类似。
传统的直拉枪机的K31的头是旋转闭锁的。
无论它是涨开的,还是旋转的,直推枪机的物理结构决定了在枪机头上动力臂跟阻力臂
的长度相差无几,所以它的闭锁力量不是很大,所以对那些不太规则的弹就会比较敏感。
对比一下:现在最可靠的前端闭锁的旋转闭锁的枪栓,第一个动作是直推,推到头后往
下压枪栓柄,枪栓头旋转闭锁,这个闭锁的力量要远大于前面说的两种。举个例子吧,
比如一颗自装弹,稍微长了那么一点点,若是直推的,可能就不能闭锁了;若是栓式的
,那股硬推的力量还是有可能闭锁的。你在枪栓柄头上压一下,那力臂有多长啊?
S**********s
发帖数: 4534
6
来自主题: GunsAndGears版 - 有人用。22做家防吗?
我倒没说wikipedia上列的数据是错的, 也没这么想; 厂弹的资料在弹药生产商的官
方网站上就有, 有的零售商也给(厂家给的)资料, CIP, SAAMI等机构也有免费的
资料, 我想大部分wikipedia的资料都是从这扒出来的, 但收集的并不怎么完整, 这
个问题也是这个讨论的重点。 你不能因为wikipedia没列出某种弹药就当它不存在吧?
Buffalo Bore .40 +P, 5" Barrel 1911: 155gr @ 1318fps = 813J / 598ft-lbs
https://www.buffalobore.com/index.php?l=product_detail&p=
P.S: Wikipedia每页最下面都有reference, 也就是资料来源。
w*d
发帖数: 544
7
来自主题: GunsAndGears版 - 原来CZ的223上556没问题
当初拿527的时候dealer还好意告诉我不能上556弹,否则可能会炸膛。
前几天在网上看到有人说CZ的223可以上556,就给cz发了个email确认。 这是他们的回
复:
All of our .223s will happily eat 5.56. Since our factory is in Europe, we
build everything to CIP spec, which doesn’t differentiate between the two
cartridges and just has the higher PSI as its standard. So the CZ .223s will
shoot everything from the cheapest Russian steel to match .223 brass ammo.
这下可以省不少银子了。顺便求推荐精度比较好的钢壳弹。
a***x
发帖数: 26368
8
来自主题: GunsAndGears版 - 9mm 子弹选那个重量的
Can I use +P or +P+?
+P Ammo manufactured to SAAMI/CIP/NATO specs is fine to use as a defensive
round or for occasional range use. Continual use of this round will make it
necessary for more frequent service on the pistol. We do NOT recommend the
use of any +P+ round. This may void your warranty.
http://www.sigsauer.com/CustomerService/Faq.aspx

hold
i*********y
发帖数: 359
9
6) 12/31/11 – 108.8 (早上) 今天去朋友家过New Year 聚餐,小心饮食
Bruch:1/4cup oatmeal+ soymilk + 2片柚子 + 2小鸡块+少许green bean -500卡
3pm: ½ cup 奶茶
Dinner: 4片白斩鸡+4片salami + 2小碗水煮鱼 + 1片ham+ 1egg + 1 mushroom+ 1小
块bre cheese + green salad (no dressing) + 少许水煮毛豆 + 2 cips of wine –
2000卡?
今天肉吃多了,可是脑子里想:我没吃碳水啊。肉是可以吃的。也不晓得对吗? 我总
觉得肉吃多了也会胖。谁能解答这个问题。有3个cheese cake, 我一口都没碰。
睡前:109.5磅,吓死了
S****9
发帖数: 8108
10
来自主题: AudioBook版 - 我在听第三遍四世同堂
额滴神哪,这么多链接,我上传俩小说,一个51回的四世同堂,一个20几回的离婚(老
舍原著,任宝贤和吕中念的),居然一章就是一个文件,一个文件就是链接。。。
https://docs.google.com/leaf?id=0B-FCn2F_
gDHKNTViMWI3ZjctZTQ1ZS00YzVlLWE3YTUtNTJiOGQ4MWYxNDY1&hl=en&authkey=CJro22A
https://docs.google.com/leaf?id=0B-FCn2F_
gDHKZTgzOWFiODQtZTg4YS00MGY1LWI4YjItMTRiZWEyMmNhMWE4&hl=en&authkey=CI-xuusB
https://docs.google.com/leaf?id=0B-FCn2F_
gDHKYjExOTM4OGEtZmUwMS00MTMzLThiNzYtYmYxYjIxM2VjNzFm&hl=en&authkey=CMTdsMYM
https://docs.google.com/leaf?id=0B-FCn2F_
gDHKM2UzYjk0ZTYtZmNlZi00MDU... 阅读全帖
h****n
发帖数: 4960
11
手机装逼指南
最近贺岁大片《亲密敌人》热映,看得出徐导深谙装B之道,但也有硬伤,你怎能
想象一个做投行业务的Banker用乐凤!要装商务B,手机首选黑莓,光有机器还不行,
必须开通BES+BIS服务。如果装B主场在国内,还不能用最新款,只能用运营商定制的死
贵Bold 9788。无他,商务B绝不买水货,就算被宰也有公司买单。买行货好处是定制版
经过优化,据说没有断网毛病,这就足以在水货用家面前扬眉吐气了。如果想更到位地
学黄力行,就用SmarTone(已和Vodafone分家)、3 Hong Kong或PCCW签约机,然后在
内地漫游。号码方面,+8529XXXXXXX要比+8526XXXXXXX更装,因为6字头放号更晚。你
必须经常抱怨有收不完的英文邮件,讲电话时要像内地娱乐节目主持人那样操一口港普
,顺带夹几个merge、hostile bid之类的单词,不熟没关系,到网上找路透金融词典就
行。
如果不用黑莓,就用iPhone。骂iPhone是街机的大多是嫌iPhone贵的。和黑莓不同
,玩苹果图的就是新潮和速度,一定要买最新的4S,64GB那种,还必须是水货——这证
明咱是不差钱... 阅读全帖
z*****a
发帖数: 3809
12
【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: hongkongdog (hongkongdog), 信区: Military
标 题: [书店故事] 年轻辣妈三亚旅游比基尼大分享
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jan 18 00:00:26 2016, 美东)
读万卷书,行万里路。从我知道要做妈妈那一刻起,就开始策划我们的亲子旅行。孕15
周时候,带着肚子里的宝宝去巴厘岛high了一番,如今宝宝已13个月,正是满地跑的可
爱萌龄,我又怎能错过这黄金时期?因为和先生都酷爱海边,初回的亲子旅行首先没有
悬念的设定为海边,之所以选择在三亚,则是由于我们对于三亚的熟悉,恋爱时我俩就
去过三亚好几次,住过好多家酒店,熟悉三亚的道路,甚至有固定的海鲜大排档档口,
作为初回,还是希望给初为父母的我们降低难度,故而选择了熟悉的三亚。
作为班妈,休过了128天焦头烂额的产假,又立刻投身工作,只能充分利用年假给
全家来个休整,工作是忙碌的,见缝插针做攻略,订酒店,订机票……
来张全家福镇楼,接下来就重点说说攻略吧。
★出行人员——我和老公以及宝宝;我妈妈;公婆全家。共五大一小(好... 阅读全帖
s******0
发帖数: 13782
13
Is there additional post-completion OPT available to students working in the
high-tech industry?
F-1 students who receive science, technology, engineering, and mathematics (
STEM) degrees included on the STEM Designated Degree Program List, are
employed by employers enrolled in E-Verify, and who have received an initial
grant of post-completion OPT related to such a degree, may apply for a 17-
month extension.
This extension of the OPT period for STEM degree holders gives U.S.
employers two chan... 阅读全帖
y*******u
发帖数: 930
14
我倒是好奇stanford竟然不是e-verify。。

Is there additional post-completion OPT available to students working in the
high-tech industry?
F-1 students who receive science, technology, engineering, and mathematics (
STEM) degrees included on the STEM Designated Degree Program List, are
employed by employers enrolled in E-Verify, and who have received an initial
grant of post-completion OPT related to such a degree, may apply for a 17-
month extension.
This extension of the OPT period for STEM degree holders ... 阅读全帖
x*r
发帖数: 11073
15
来自主题: Xibei版 - 继续郁闷
我今天比较忙,刚才抽空打电话问了问LD,他大概说了几点,如果你还需要讨论的话,
晚上可以电话:))
1,Colony PCR 不是很可靠,cycle 数目不可多,要少,最好是控制在25个cycle以下。
2,单酶切连接最好用CIP.
3,制备片段的时候,做酶切的酶是不是同尾酶?
4,Promega的连接酶比invitrogen的要好用。
5,连接片断是通过PCR还是通过酶切拿到的?PCR产物的话,确定有粘性末端吗?

新的
s***y
发帖数: 7034
16
来自主题: BuildingWeb版 - 关于网站空间,帮人问
转一封朋友的email,希望xdjm提供些信息:
【背景】
剑花社近来无法访问,是因为网站所在服务器有某些网站未进行CIP备案(参看:http://
www.miibeian.gov.cn),再加上近日中国大学的BBS纷纷关闭,可见中国政府已经加强了
对互联网的监管。虽然剑花社并不涉及政治,理论上并不担心网站的生存,但毕竟网站有
BBS,这也正是政府重点监管的对象。假如有一天,政府即使不关闭所有的BBS,但只要如
果抬高门槛,对于我们这种个人网站来说,还是相当不利的,手续上如果稍微繁琐一点,
我可能就无法抽出时间来办理了。
【问题】
有朋友建议:是否可以考虑使用的美国的空间?我觉得也未必不是一条路子。只是不
知美国虚拟空间的价格如何,以剑花社目前的状况,是希望支持ASP.net,SQL SERVER,
网页空间200M以上,数据库空间也要400M。或者主机托管的价格如何?如果考虑到软件的
费用,相信是LINUX+PHP+MYSQL型的主机或空间较为便宜,但现在我还未写过PHP页面,
真是麻烦。
总之,你先帮我看看价格,考察一下可行性。
n******t
发帖数: 239
17
来自主题: BuildingWeb版 - 关于网站空间,帮人问
Windows dedicated server 也不算贵。每月$100以上。
http://servermatrix.net/

剑花社近来无法访问,是因为网站所在服务器有某些网站未进行CIP备案(参看:http://







R*s
发帖数: 2041
18
ft. 你们用英文是讲不清楚了, 要不就是相互都没pay attention好好看。
GENESIS的意思是不管你用多少细胞,如果你的细胞好,antibiotics质量也好,
ligation做得也clean,那你negative control就应该很clean, 没什么clonie.
跟用了多少细胞没关系。同时ligation plates里应该有大量colonies而且
false positive的比例也应该很少。所以没必要降低细胞量。也没必要因为
clonies多而多做miniprep.
除非你切了后的vector超级sticky, 而且CIP不干净,
导致self-ligation很多(这句偶加的,呵呵)。
当然偶自己做cloning很烂,经常ligation plate才长一个,
一挑还真有insert. 哈哈,倒是省miniprep.
a***a
发帖数: 40617
19
来自主题: Biology版 - 跪求帮助:为什么克隆不出来
你问问题没问对啊
现在你是连接有问题
你是双酶切?酶切是否彻底?是否自连?这些都是问题
你要保证双酶切彻底的情况下用CIP treat以后再用合适的比例进行足够时间的
ligation
克隆问题是板上最常见的问题。我也觉得是最没有必要问的问题
与其这里问,不如问自己lab的师兄、师姐或者postdoc,效果会更好
因为要让别人给你troubleshoot,你至少得写几页的details
X***n
发帖数: 366
20
来自主题: Biology版 - 跪求帮助:为什么克隆不出来
惭愧。我是postdoc,实验室里就我一个人做分生。
双酶切, SacI和SalI,没有CIP处理。
这种情况下3:1链接过夜没问题吧?
只是想问问版上是否自己的设计本身就不合理。
主要是另外7个小的都出来了,这三个耽搁太久了。有些急。
s*******y
发帖数: 2366
21
来自主题: Biology版 - 跪求帮助:为什么克隆不出来
那就一个一个切
看看链的起来不
你ligate的时候没做self ligate的control吗?

惭愧。我是postdoc,实验室里就我一个人做分生。
双酶切, SacI和SalI,没有CIP处理。
这种情况下3:1链接过夜没问题吧?
只是想问问版上是否自己的设计本身就不合理。
主要是另外7个小的都出来了,这三个耽搁太久了。有些急。
a***a
发帖数: 40617
22
来自主题: Biology版 - 跪求帮助:为什么克隆不出来
如楼上所说,比例不是最关键的。关键还是末端是否真的没问题
另外有些constructs成功率本来就是很低
建议你CIP处理一下,然后连接过夜,转化以后全部涂板
T****r
发帖数: 4006
23
来自主题: Biology版 - 跪求帮助:为什么克隆不出来
不大,出来的都是空载体说明你vector没有处理好,或者发生了自连,酶切时间长一点
,之后用CIP处理,跑胶速度慢点,跑久一点让分离效果好点.....小地方要注意,处理
的干净整齐,还有看看你competent cell的效率是不是好...这个的影响是很大的..
J******6
发帖数: 18
24
来自主题: Biology版 - 跪求帮助:为什么克隆不出来
After PCR, do TA cloning first and then cut the inserts out for ligation
with your vector.
It shoud be helpful to treat the vector fragment with CIP beforhand.
n***g
发帖数: 5027
25
Dephospholation之后,空白载体对照老是有克隆,
用的是NEB的CIP,
不管是1小时,还是过夜,都是这样,
怎么才能弄彻底一些呢?
谢谢
h**********r
发帖数: 671
26
我有的是老式的CIAP,超级稳定.效果很好.
我猜想你的酶失活了.NEB开发出新的CIP,好像是温度敏感型.容易灭活,这有利于后
续的连接步骤。但比如说保存时间长点也许容易失活.
C*******e
发帖数: 4348
27
来自主题: Biology版 - 质粒双酶切
反正你要胶回收的
酶切结束以后,只要是NEB的buffer 2,3 或者4,直接加点CIP进去37度1小时就可以了
然后一样胶回收
我不喜欢QIAGEN的胶回收kit
效率不高
绝对没有90%
lz可以试试ZymoResearch的胶回收kit
直接上他们家网站,要free sample
不喜欢也不用花钱买了
b******r
发帖数: 111
28
Anyone has experience of inserting 9kb in a 8.4kb vector? 2 months was gone
,but I get nothing. Would
you like to take a look a this protocol and give me some suggestion ?
Thanks a lot
Purpose: Insert 9kb mouse sequence into vector pPNT6.
Vector pPNT6: Its map is at http://www.addgene.org/pgvec1?
f=c&identifier=11072&atqx=pnt6&cmd=findpl . I have inserted 0.9kb DNA in
this vector at XhoI/EcorI
double sites. I should have no problem in cloning short fragment.
Insert DNA is 9kb.I have cloned t... 阅读全帖
r****r
发帖数: 379
29
我宁愿改造载体的酶切位点,都不会去做9kb的CIP克隆

December
j******i
发帖数: 939
30
来自主题: Biology版 - 克隆失败了
你的情况不应该是vector自身连接了啊,因为这样的话,你可以用培养基培养出来的。
如果你不确定CIP效果的话,可以plate一个只有vector 没有insert的对照。
s******s
发帖数: 13035
31
我都随便混混,这种PCR浓度高的一般总是能连出来的。
你假阳性太多,可以考虑CIP/SAP处理一下vector, PCR加个5p?
c***3
发帖数: 527
32
PCR 片段有加 Pi 吗 (T4PNK 处理)?假如 CIP vector (通常是必须的,否则效率
太太低)。
c****g
发帖数: 93
33
CIP from NEB is pretty good.

of
b******s
发帖数: 1089
34
来自主题: Biology版 - cloning troubleshooting
实验室其他人遇到过经年的KpnI不work。但我自己切没遇到过问题。单酶切你可以上很
浓的质粒,多加点酶,但是不要超过反应体系的10%,过夜,加CIP,应该能做出来。

fragments
ligation
b******s
发帖数: 1089
35
来自主题: Biology版 - 请教:关于DNA克隆里的双酶切
虽说理论上这两个酶在大部分buffer里活性都不错。但实际上并不一定所有的组合都好
用。
尤其是有时候在非最佳的buffer里会有star acticity。如果同时做双酶切出现问题,
可以考虑做sequential digestion。你不必每步都抽提,可以先用离子浓度低的buffer
第一个酶先切,然后换成离子浓度高的buffer,用第二个酶切。如果切的时间足够长,
酶量足的话,我觉得不一定要加CIP,这样会促进其后的连接效率。
b******s
发帖数: 1089
36
来自主题: Biology版 - 请教:关于DNA克隆里的双酶切
限制性内切酶里是有glycerol的,浓度太高会影响酶切反应。两个酶体积加起来最好不
要超过整个反应体系的20%。你以前链接没成果原因很多。试试不加CIP处理,延长酶切
时间看看。

取的。
d**********9
发帖数: 981
37
来自主题: Biology版 - 分子生物学问题求救
本人有过几年的分子生物学的基础,原来作克隆的时候没有遇到过什么大问题,但都是
低于1Kb的PCR产物。但是最近换了一个实验室,一系列分子实验都严重受挫,我也不知
道是什么原因,实在没有招了,多谢高人指点
都是1500bp左右的PCR片断,我在设计引物的时候有在5‘端加了5个bp,PCR都一次能扩
出来,clean-up后酶切,之后再跑胶clean-up,跑了胶确定有条带,还挺亮的。于是跟
相同酶切,CIP处理后,跑胶clean-up的载体相连,室温过夜,也试过16度过夜,但是
transform到商品化的两种不同公司来的感受态细胞之后,都没有克隆出现,几个PCR产
物都是一样的问题
开始觉得可能是PCR产物没有酶切好,尝试先将PCR产物与T载体连接,transform之后也
没有克隆出现
是哪儿有问题,我该如何做?多谢!
C**S
发帖数: 522
38
来自主题: Biology版 - 分子生物学问题求救
不需要跑胶纯化。
pcr产物---PCR purification---酶切---PCR purification
载体---CIP---PCR purification
b******y
发帖数: 627
39
来自主题: Biology版 - 分子生物学问题求救
I never do CIP step. no problem so far after hundreds of constructs made.
d**********9
发帖数: 981
40
来自主题: Biology版 - 分子生物学问题求救
多谢大家帮忙了,我在发帖之前自己也试过很多办法,但是都没有解决问题:
1.我试过在作1500bp片断连T载体的同时,作500bp片断的连接,没有问题,是不是
1500bp片断还是很难连很多?
2.本身我的酶切位点外多5个核苷,应该直接酶切没有问题
3.试过不同公司的ligase,但是transform之后都没有克隆
4。试过不同公司的感受态细胞,但是都没有克隆,对于单纯的质粒,能长克隆,可见
感受态细胞和LB板应该没有问题
5.没有试过不用CIP,接下来要试试
虽然所有的试剂都是到了新的实验室刚买的,但是也都是以前一直用着的。原来觉得实
验很简单,但是一直没有出东西,郁闷!
s******s
发帖数: 13035
41
来自主题: Biology版 - 分子生物学问题求救
没仔细看帖子。
是不是有人连接前CIP了?这玩意儿处理过就很难连了,除非
100%必要,否则宁愿多筛点克隆也不要用这个
i****g
发帖数: 3896
42
来自主题: Biology版 - 本期Cell封面很有中国特色
邓宏魁今年爆发了,又一篇Science:
《科学》(Science) 杂志发表北京大学邓宏魁团队的重大研究成果——使用小分子化
合物逆转“发育时钟”
日期: 2013-07-18 信息来源: 生命科学学院
7月18日,国际学术权威杂志Science杂志(Science Express)刊登了北京大学生命科
学学院邓宏魁教授和赵扬博士带领的研究团队在生命科学领域的一项革命性的研究成果
——用小分子化合物诱导体细胞重编程为多潜能干细胞。该成果开辟了一条全新的实现
体细胞重编程的途径,给未来应用再生医学治疗重大疾病带来了新的可能。
在这项研究中,邓宏魁团队仅使用四个小分子化合物的组合对体细胞进行处理就可以成
功地逆转其“发育时钟”,实现体细胞的“重编程”。使用这项技术,他们成功地将已
经特化的小鼠成体细胞诱导成为了可以重新分化发育为各种组织器官类型的“多潜能性
”细胞,并将其命名为“化学诱导的多潜能干细胞(CiPS细胞)”。
哺乳动物细胞只有在胚胎的早期发育阶段具有分化为各种类型组织和器官的“多潜能性
”,而随着生长发育成为成体细胞之后会逐渐丧失这一特性。人类一直在寻找方法让已
分化的成体... 阅读全帖
i****g
发帖数: 3896
43
来自主题: Biology版 - 这个有点牛啊
邓宏魁:“发育时钟”逆生长
2013-07-19 11:42 来源:光明日报 打印文章 发送给好友 字号 T | T
北京大学生命科学学院邓宏魁教授(中)和他的研究团队。 北京大学生命科学学院提供
光明日报北京7月18日电(记者王庆环)北京大学生命科学学院邓宏魁教授和赵扬博士
带领的研究团队利用小分子化合物诱导体细胞重编程为多潜能干细胞,该成果得到国际
学术界的高度重视,国际学术权威杂志——《Science》杂志(Science Express)美国
时间18日发表了这一研究成果。这项研究成果为未来细胞治疗甚至器官移植提供了理想
的细胞来源,将极大地推动治疗性克隆——克隆组织和器官以用于疾病的治疗——的发
展。
传统观点认为,哺乳动物细胞只有在胚胎的早期发育阶段具有分化为各种类型组织
和器官的“多潜能性”,而随着生长发育成为成体细胞之后会逐渐丧失这一特性。人类
一直在寻找方法让已分化的成体细胞逆转,使之重新获得类似胚胎发育早期的“多潜能
性”,并将其重新定向分化成为有功能的细胞或器官,应用于治疗多种重大疾病。此前
,通过借助卵母细胞进行细胞核移植或者使用导入外源基因的方法,... 阅读全帖
v****a
发帖数: 388
44
来自主题: Biology版 - 这个有点牛啊
Thanks!
Does it mean CIPS can provide safe stem cell transplant therapies for human
being in future?

提供
s******s
发帖数: 13035
45
来自主题: Biology版 - 这个有点牛啊
of coz CiPS is better, but as to this particular case, they still need to ex
amine the final cell more carefully, and also extend to human cells.

human
i****g
发帖数: 3896
46
来自主题: Biology版 - 邓宏魁又发一篇Cell Stem Cell
才发现上一篇关于也CiPS的Science文章,6个共同一作,7个共同二作,剩下的两个为
共同通讯作者。。人必然不少!
a*******g
发帖数: 3500
47
中国科学家7月18日在美国《科学》杂志上报告说,他们用一种简单的化学物质诱导方
法,将成年鼠皮肤细胞制成多潜能干细胞,并用这种细胞培育出多只健康的小鼠,其中
一只叫“青青”的小鼠刚过完100天的生日。这是一项革命性的研究成果,是比克隆羊
“多莉”更彻底更方便的克隆技术。一旦在人体细胞上取得成功,就可以完全用人的自
身细胞实现人体克隆和器官再造。
简单方法实现逆分化
传统观点认为,哺乳动物细胞只有在胚胎的早期发育阶段具有分化为各种类型组织和器
官的“多潜能性”,而随着生长发育分化成为成体细胞之后会逐渐丧失这一特性。人类
一直在寻找方法让已分化的成体细胞逆转(脱分化),使之重新获得类似胚胎发育早期
的“多潜能性”,并将其重新定向分化成为有功能的细胞或器官,应用于治疗多种重大
疾病。
此前,通过借助卵母细胞进行细胞核移植或者使用导入外源基因的方法,体细胞被证明
可以被进行“重编程”获得“多潜能性”,这两项技术因此获得了2012年诺贝尔生理医
学奖。不过,由于这一技术仍然要依赖于外源性细胞核,并不能算是真正意义上的细胞
脱分化。
据了解,在这项研究中,北京大学生命科学学院邓宏魁团队仅使用四个小... 阅读全帖
l*******i
发帖数: 153
48
说“提高了安全性”,现在还为时尚早,因为邓用的那几个小化合物对细胞的潜在影响
(特别是表观遗传学和genome的稳定性)需要进一步评估。另一方面,文章中只是做了
嵌合体实验室,这并不能完全证实CiPS的全能性。应该做四倍体实验来证实。
iPS的应用,最初的前景似乎一片灿烂,随着研究的深入,越来越多的人持谨慎态度。
临床应用的安全性和效率到底如何(从在病人身上取材,到移植到病人身上,最快需要
9-10个月的时间),在进行临床试验之前,仍需充分评估;现在已经有少数研究显示,
不同体细胞诱导的iPSC,做疾病模型,得到的结果不完全一致,这与epigenetic
memory等有关。
t**r
发帖数: 93
49
这篇评论比较有意思的一个地方是说CiPS“摆脱了以往技术手段对于卵母细胞和外源基
因的依赖”。这个好象有些误导了。iPSC导入的是人自身的基因,而且病毒携带的基因
最终会从iPSC中清除。这比起不知有什么副作用,更不知有多少种副作用的外源化合物
,安全性孰高孰低不言自明。我宁可依赖于基因导入,或者是蛋白导入。
至于提高效率,其实也是个噱头。iPSC是高速分裂的细胞,只要有一个重编程成功的细
胞,就可以在短时间内获得大量干细胞,效率高不高根本不重要。
DENG的这篇文章,我觉得最主要的贡献一是降低重编程的成本,二是使重编程的时程变
得可控制。降低成本就不用说了,化合物既便宜又使用简单,方便很多缺乏技术和资金
的实验室开展iPS研究。至于第二点,化合物可以随时加入或去除,可以用来精细地改
进编程或分化过程。相比之下,基因导入后则无法控制,只能是粗糙的重编程。重组蛋
白虽然也可以控制时程,但成本太高。
所以,我的看法,虽然这篇评论有点言过其实,但使用小分子化合物是未来的走向。而
且,当最终这些小分子化合物开始商品化的时候,iPS重编程这个领域也就开始没落了。
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