g********n 发帖数: 4054 | 1 先占一个H1b 在目前的老板。慢慢转到男友处。
或者直接结婚F2 。 |
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b********n 发帖数: 22 | 2 Postdoctoral Fellowship – Restriction Enzyme Division – Job Code 1042HZ
The Restriction Enzyme Division invites applications for the position of
postdoctoral fellow. Projects will be part of a basic research program
focusing on restriction enzymes specific to 5-hydroxymethylcytosine. The
project will involve cloning, overexpression, purification, assay-
development, and engineering of such enzymes, and their application to
questions of epigenetics. Research will be undertaken in a highly
coll... 阅读全帖 |
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b********n 发帖数: 22 | 6 这种酶的工作我们也做了快两年了,不过不太好做。相关的文章已经在NAR付印。现在
是需要更多的人手做更为细致的研究。 |
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B******o 发帖数: 496 | 7 哦哦哦,看来俺是想错了,以为这种做起来会很快... |
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c*****n 发帖数: 233 | 9 小弟还是上次那个问RT_PCR问题的那个,谢谢各位前辈的热心解答。我不是科班的生物
学生,最近刚开始学这些技术,如果问的问题太菜,大家见谅。
这次把我total RNA的结果贴上来,让大家看看rna的质量怎么样。关于purity, 260/
280>=1.7。然后浓度在600ug/ml左右。大家觉着我这个total rna能用来RT吗?
最近还是没有什么进展,我怀疑是reverse transcription有问题。大家有没有推荐的
酶?我目前用的new england biolab的kit.
图片里的marker也贴上了。 |
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q**********0 发帖数: 335 | 11 Which company's phusion is better, Thermo Scientific or New England Biolab?
Thanks. |
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b****o 发帖数: 123 | 12 我以为她的意思是 biolab里每件东西都是biohazard, 所以没必要专门开个桶了。 |
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a*q 发帖数: 2109 | 13 Grace Biolabs有spacer卖。
另外双面胶的厚度大概130微米左右。 |
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j******i 发帖数: 939 | 14 6kb插到8kb是很难的,这不是个别现象。可以尝试高溶度的t4 ligase(biolab), t7
ligase, Gibbson Assembly. |
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j*********j 发帖数: 124 | 15 好像可以化学合成,大于$1000
可以用E coli system 表达,试了IMPACT™ Kit from New England Biolabs (因
为我们要native sequence的蛋白质---没有任何tag),效果不是很好,得到的蛋白很少。
请问有没有人用过其他的体系表达native sequence的蛋白质啊?还有什么更好的方法
吗?
十分感谢!! |
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j*********j 发帖数: 124 | 16
加氨基酸影响很大,因为我们设计的氨基酸序列要折叠成精确的三维结构,所以任何序
列改变都有很大的影响。所以我们试了IMPACT™ Kit from New England Biolabs
,这个kit可以给我们精确的氨基酸序列。
我们不知到如何检测,没有抗体,我们的蛋白没有活性,我们要的是她的结构。我们的
终极目标是得到X-ray的结构。(虽然目标比较遥远) |
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M******g 发帖数: 152 | 17 you can try SHuffle strain from New England Biolabs. It expresses DsbC in
the cytoplasm. |
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M******g 发帖数: 152 | 18 You can try cas9 from New England Biolabs. |
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D***a 发帖数: 516 | 19 从一篇文章上抄来的:
cDNA encoding 'artificial' SUMO-2 'polymers' was generated by ligating PCR
products encoding DeltaN11–SUMO-2 while simultaneously digesting with
restriction enzymes specific for BamHI (N-terminal site) and BglII (C-
terminal site) in T4 DNA ligase buffer, 150 mM NaCl, 0.1 mg ml- 1 BSA at 22
°C for 5 h (enzymes and buffers from New England Biolabs). This created a
range of cDNAs encoding DeltaN11–SUMO-2 cDNA 'monomers' and 'multimers'
that were separated by agarose gel electrophoresis ... 阅读全帖 |
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s*********y 发帖数: 579 | 20 海内外学者、读者热议“韩春雨”现象
原创 2016-05-10 知识分子 知识分子
韩春雨(右)及其合作者沈啸(左)、高峰(中)。供图:沈啸
编者按:
5月8日,《知识分子》发文(详见《韩春雨:“一鸣惊人”的中国科学家发明世界一流
新技术 | 特稿》)介绍了河北科技大学副教授韩春雨团队发表的NgAgo-gDNA基因编辑
技术的学术贡献和意义后,引发巨大反响。文章发表仅一天,通过《知识分子》在微信
、微博、今日头条、知乎上的传播渠道,就获得超过320万阅读量,近2600条评论。国
内外生命科学界学者纷纷就这项技术的突破性意义发表评论,各方读者也就韩春雨的“
另类出身”在网络上展开评论。《知识分子》搜集并摘编了部分精彩观点,与读者分享。
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01
高屋建瓴派
饶毅:北京大学讲席教授
韩春雨的工作对基因编辑技术的推进作用是国际一流的。与现有CRISPR相比,可以看到
的优点是新技术使用DNA,因而更稳定,但还需要更多的研究才能真正比较二者优缺点
以及适用范围的异同。此外,韩春雨在条件有限的情况下做出这样的工作,让我们更加
关注中国广大科技工作者。
鲁白:清华大学医学院教授
在一所不太... 阅读全帖 |
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n**********g 发帖数: 196 | 21 1) The current low (zero) verified success rate is sufficient for people to
question the story.
When will your statistic data collection be completed? Let's talk about the
success
rate then.
Your comments are so interesting. If you do not know the science, just be
patient and wait for more answers.
2) “Do you think 1.3 mm difference (resolution)
can be achieved on peaks with a width of 1.5-2 mm?” The answer is yes
because of Fig 4e. Your statement is “difference
sample preparation” is completely... 阅读全帖 |
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m****a 发帖数: 270 | 22 第四类“重复” 验证实验信息:实名, 网络、论坛发布
- 重复、拓展验证实验不能支持NgAgo基因组编辑功能
- 包含有具体实验信息(eg实验材料,步骤,etc)以及发布方具
体信
息的发布报告
信息简述:
- 发布方:蔡宇伽 博士
- 发布时间:2016-8-17
- 发布平台:科学网
- 发布方国家:丹麦
- 发布方城市:Aarhus
- 发布方研究机构:Aarhus University
- 实验室PI:JACOB GIEHM MIKKELSEN
- NgAgo的来源:Addgene
- 应用验证实验结果: 无法验证韩春雨NgAgo基因编辑的实验结果
- ... 阅读全帖 |
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m****a 发帖数: 270 | 23 第四类“重复” 验证实验信息:实名, 网络、论坛发布
- 重复、拓展验证实验不能支持NgAgo基因组编辑功能
- 包含有具体实验信息(eg实验材料,步骤,etc)以及发布方具
体信
息的发布报告
信息简述:
- 发布方:蔡宇伽 博士
- 发布时间:2016-8-17
- 发布平台:科学网
- 发布方国家:丹麦
- 发布方城市:Aarhus
- 发布方研究机构:Aarhus University
- 实验室PI:JACOB GIEHM MIKKELSEN
- NgAgo的来源:Addgene
- 应用验证实验结果: 无法验证韩春雨NgAgo基因编辑的实验结果
- ... 阅读全帖 |
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m****a 发帖数: 270 | 24 其他部分大同小异,贴一下关键的note部分
Note:
1. NgAgo/gDNA system is extremely sensitive to contamination of
intracellularbacteria (including mycoplasma) which are widespread
and leave no visible signs of presence. Carefully excluding the
presence of intracellular bacteria before performing experiments.
2. Because Agos need magnesium, avoid EDTA when detaching and seeding cells
into the plates for transfection. Alternatively, supplementing Mg 2+ to 5 mM
(may need optimization to your cell type).
3. Avoid using L... 阅读全帖 |
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c********n 发帖数: 225 | 25 问题总结
1.实验材料来源(Hyclone vs Gibco的培养基,以及原文没有特别提到的“Biolab”T4
PNK)会影响可重复性吗?
HyClone以及其他 T4 PNK 供应商,你们是不是要想一想自己的问题在哪里了?
还有,ThermoFisher可要注意了,你们的Lipofectamine® 3000可能有问题!
2.原文用于plasmid和guides (DNA)的0.5xTE,更新后 改成NaOH调出来的pH8.0的水。
先不谈怎么来用NaOH调出这个稳定的没有缓冲液的pH8.0的水,如果原因是由于NgAgo对
于EDTA这么的敏感,那么原文中用到的大约0.015-0.025mM的EDTA,是怎么做出的NBT文
章中的结果的?
3.关于细菌污染问题。从新闻报道和照片上看,韩春雨老师他们做实验是经常不戴手套
的,看来他们这样做细菌污染机率会减少。所以这些重复NgAgo实验的人们,你们重复
NgAgo实验的时候,带手套了吗?你们的实验材料有没有被细菌污染呢?
4.看来Mg2+的浓度,在不同的cell type也需要optimize
5.看来ss gDNA 二次转染... 阅读全帖 |
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p*****y 发帖数: 46 | 26 【 以下文字转载自 Returnee 讨论区 】
发信人: primeny (wu), 信区: Returnee
标 题: 第十三批国家“千人计划”青年项目拟入选人员公示
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Dec 29 10:43:25 2016, 美东)
第十三批国家“千人计划”青年项目拟入选人员公示
2016-12-29 12:08:28
第十三批国家“千人计划”青年项目申报3048人,经形式审查、通信和面试评审,
601人通过终审,拟予引进。根据规定,现予公示,为期7个工作日,从2016年12月29日
—2017年1月9日。公示期间对人选如有异议,请于2017年1月10日前将意见发至邮箱(
[email protected]/* */)。
海外高层次人才引进工作专项办公室
2016年12月29日
第十三批国家“千人计划”青年项目拟入选人员名单
序号 姓名 性别 出生日期 申报单位 落地省份 国外单位
1 冯仁杰 男 1983/01/22 北京大学 北京 [美国]马里兰大学帕克
分校 [美国... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 28 公司在下沙经济开发区,附近房价还好。去年G20前,附近的房价不到1w,现在涨到1.
4w左右,相比上海要便宜太多太多。而且公司待遇在同行业中属于上游水平,和目前公
司在proteomics领域的地位相称。
关键公司蛋白质组学、蛋白质修饰组学、修饰抗体研发、生物信息部门都有,而且PTM
修饰的地位目前没有人能撼动。对比之下很多公司连MS仪器都没有,都是外包出去。 |
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F*******t 发帖数: 2186 | 29 给多少钱,前面就有人问了
比如博士加5年质谱学经验
说多少钱才算有诚意
PTM |
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M***6 发帖数: 26 | 30 听说这家公司做的不错,赚了很多,主要做科研服务吧?
不过用的质谱仪,像orbitrap,应该还是国家经费买的仪器吧,
但的确听说这家公司效益很好 |
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l*******1 发帖数: 16217 | 31 居然还有托儿,杭州的房子都没暖气吧,别给我说地暖 |
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发帖数: 1 | 32 钱可以和HR商量的,反正在业内是靠前的。最重要的是有好的平台发挥大家对才能,对
吧。否则没必要回国是吧
: 给多少钱,前面就有人问了
: 比如博士加5年质谱学经验
: 说多少钱才算有诚意
: PTM
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发帖数: 1 | 33 公司是私企,是自己的仪器,不是国家的。
: 听说这家公司做的不错,赚了很多,主要做科研服务吧?
: 不过用的质谱仪,像orbitrap,应该还是国家经费买的仪器吧,
: 但的确听说这家公司效益很好
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c**********e 发帖数: 70 | 34 公司业绩不错,领导都算是科学家出身,待遇在领域内也算很好,当初因为留在科研没
有过去,祝发展越来越好。 |
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k****x 发帖数: 2751 | 38 DNA concentration 应该UV-vis 吸收可以搞定吧,biolab经常用这样的assay.
polyamide上有没有别的functional group? |
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w********g 发帖数: 447 | 39 Outsourcing M&A Year In Review
By Michael A. Martorelli
Several large outsourcing firms made important tuck-in acquisitions, many
mid-sized firms expanded their platforms with strategic acquisitions, and
one outsourcing firm successfully tapped the equity market for an Initial
Public offering (IPO). But the big stories in the pharmaceutical outsourcing
industry in 2009 involved seven “going private” transactions and fifteen
separate divestitures. During the past few years, both in these annual
r... 阅读全帖 |
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N***i 发帖数: 2063 | 42 【 以下文字转载自 Stock 讨论区 】
发信人: ll111 (Stealth), 信区: Stock
标 题: Events and ERs for week Aug 9-13
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Aug 7 22:26:20 2010, 美东)
Monday, Aug. 9
Scheduled for around noon: President Obama to deliver remarks at University
of Texas in Austin.
No data scheduled.
Tuesday, Aug. 10
House returns for one day to vote on state aid bill.
9 a.m.: Federal Reserve's Federal Open Market Committee meets on interest
rate and monetary policy. Statement to be released at 2:15 p.m., at Fed
headquarters.
8... 阅读全帖 |
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f**********g 发帖数: 2252 | 43 BIO CEO Conference Live Blog: Day 1
By Adam Feuerstein 02/14/11 - 04:23 PM EST
quotes in this article:EXAS, MDVN, EXEL
http://www.thestreet.com/story/11005968/1/bio-ceo-conference-li
NEW YORK (TheStreet) -- Small and midsized biotech companies get a turn in
the investor spotlight this week as the 13th annual BIO CEO & Investor
Conference kicks off here this morning.
I'll be live-blogging from the BIO CEO conference over the next two days,
presenting news updates and analysis live from the pre... 阅读全帖 |
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f**********g 发帖数: 2252 | 44 BIO CEO Conference Live Blog: Day 1
By Adam Feuerstein 02/14/11 - 04:23 PM EST
quotes in this article:EXAS, MDVN, EXEL
http://www.thestreet.com/story/11005968/1/bio-ceo-conference-li
NEW YORK (TheStreet) -- Small and midsized biotech companies get a turn in
the investor spotlight this week as the 13th annual BIO CEO & Investor
Conference kicks off here this morning.
I'll be live-blogging from the BIO CEO conference over the next two days,
presenting news updates and analysis live from the pre... 阅读全帖 |
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