T**********t
发帖数: 1604 | 1 应该没有吧。
如果激发光是488nm，已经是介于蓝色和绿色边缘了。发射光的波长只会比激发光更大
，所以至少是绿色，甚至会是黄色。
看一下光谱： |
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l******u
发帖数: 2314 | 2 看完这篇文章，我个人的感觉就是一句话：Eyes on the Wrong Ball。
为什么一定要牵强地扯到对聚合物本身存在的杂质被酸化多壁管的能量转移而发生荧光
的增强，而不简单地从酸化多壁管本身（包括表面缺陷/碳片）的荧光解释？
通常越简单的解释似乎越正确。
本文口口声声说488nm激发后产生的荧光是酸化后的多壁管表面的缺陷/碳片吸取能量再
转移到尼龙里的发色杂质，再由此杂质发光。文章仅仅和这个论点相符合的论据不放，
而置其他相左实验事实和大量文献事实不顾，令人费解。
尼龙的发色杂质在488nm激发后发弱光的位置、半峰宽和峰型和加了酸化多壁管后的
composite的发光几乎相同。这一点大概是唯一“支持”论点的证据，但是多壁管的
visible PL形状何尝不是如此类Gauss？
文中出现了明显和论点违背的实验事实：325nm激发复合物产生的荧光和尼龙的发色杂
质荧光完全不同。这么明显的多壁管的发光，为什么一定要看那个不存在的shoulder，
硬说是尼龙的发色杂质？
文献中，Ya-Ping Sun博士对这种荧光的来源早有经验解释 - 文中其实也已列出：经过
功能化的碳管表面的缺陷 |
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b*s
发帖数: 82482 | 3 我认为是488nm
那指甲什么颜色给科普科普，目测波长是５００纳米 |
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a*****s
发帖数: 2663 | 4 现在红（633nm），绿（532nm），紫（405nm）的都很便宜。405nm一度挺贵，蓝光普及
后就便宜了。真正蓝光（488nm）现在还很贵，还有橙色的只有自己DIY了。做
presentation 绿光1mW足够，红，紫可以考虑5mW。5mW以上太危险，大人不小心闪到会
出问题，更不用说小孩。还有laser照到眼睛出事一般都是没法挽救的。 |
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b******s
发帖数: 1089 | 6 多谢sunny。
confocal有俩pinholes。bleach在axis上的厚度应该只与入射光的pinhole有关。而且
一般软件里给的估计值是基于point spread function，入射光波长488nm的时候，axis
上估算值大概是500nm。但是在一个给定的ROI内，scanned的points很多，这样最后在
axis上被漂白的区域远远不止500nm。不知道这样理解对不对？
微镜 |
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b******s
发帖数: 1089 | 7 bleach可以达到90%（如果以florescence intensity为标准的话）
但是如你所说，一般bleach都是用接近100%的laser，对细胞有一定程度的伤害。以前
看过文章提到细胞有丝分裂会有一定程度的抑制。这种情况下，可以多做一些control
比较。
PA tag用的laser强度都很小，10%就可以了，但是先有的PA tag基本都是用405nm的
laser，对细胞也是有伤害的。dendra2据最早的报道可以在488nm下convert，但是没有
任何别的组能重复这个结果。 |
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k***g
发帖数: 4904 | 8 先说一下问题背景：没有生物背景的在使用细胞做实验。。所以希望大牛能给我扫盲一
下。。
原来在用Celltracker Orange，$225/1mg, 稀释到5ug/mL使用。似乎working solution
不能储存太长时间，而且最近快用完了，考虑有没有更便宜，操作也简单的染料，替换
这个Celltracker Orange。最好是488nm左右激发的，可以有更多显微镜可以用，不过
别的波长的如果很便宜又好用也可以考虑。做的细菌有革兰氏阳性和阴性的，希望这个
染料就是随便什么细菌都可以染，而且基本保持细胞活性，最好不改变细胞膜状态，而
是钻进膜后固定在细胞内，可以维持一段时间荧光性能。请问有什么染料可以推荐的吗？
多谢多谢了！ |
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k***g
发帖数: 4904 | 9 非常感谢ls几位啊！不过这是紫外激发的，俺们这没有这种激光啊。。。
有没有488nm左右蓝光激发的。。 |
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b******s
发帖数: 1089 | 10 如果你使用的是一般的laser scanning confocal的话，根据laser source的不同，有
几种固定波长的laser，可以选择。即使不是正好在所谓的maximum上，前后一定范围内
的也是很好用的。488nm既可以激发GFP，也可以很好的激发YFP。你可以设置搜集的
emission的波长，尤其是有两种颜色的荧光的时候。
mRFP和mCherry等都是从最早的DsRed改造过来的。m代表他们大多是单体（我印象里是
这样的），因为dsRed很容易形成四聚体。但是经过改造之后，excitation和emission
都有所变化。但是基本上580nm/610nm都可以很好用。mCherry荧光强度最高，但是mRFP
也很不错。
怎么查？google就可以了。虽然mRFP有很多突变体，Q66M或者是你的Q66T等，主要是促
进了蛋白折叠成熟，用580nm/610nm应该没问题。 |
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K**********t
发帖数: 42 | 11 用在fluorescence correlation spectroscopy 下。 吸收光在488nm左右的 |
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m***m
发帖数: 324 | 12 哪里可以查到Photoresist在不同波长下的n&k?
比如G-line和I-line resist在488nm波长？ |
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