k*****n
发帖数: 9823 | 1 一周前就收到版主寄来的Vsonic R03样品，直到今天才有时间仔细听了听，还望各位多
多包涵。
先说外观，和R02相比，用的线、插头等没有明显区别，耳塞部分短一点，圆形的设计
我认为更漂亮。取消了Vsonic的商标标识，左右更容易区分。不过少了R02那个很有用
的夹子。不过这个是工程样品，最终产品外观可能有所改变。白色的耳机和ipod很是般
配（见附图）。
鉴于耳塞的定位是面向随身听的，我就先选择ipod 40G播放自己压制的mp3 (from ape
files, lame, VBR ~250bps)作为测试平台。作为参考的是R02和Yuin PK2，以及Phil耳
放接HD600。在夜深人静的时候躺在床上做了个简单的试听，以下就说说R03播放不同种
类音乐的表现。
先听大编制的交响乐，选用的是RR公司的Mephisto & Co.（国内叫红魔鬼）以及RR公司
的Exotic Dances。给我的第一印象就是音场比R02要宽了不少，虽然没法和HD600比，
但是在耳塞里是我听过最好的。声音比较厚重但不失层次，管弦乐齐奏时不同乐器仍清
晰可辨。低音表现无论是质和量而言都令我满意，打击 |
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发帖数: 1 | 2 Ticker: GNC
日期：2-25- 18
当前价格：4.42美元
目标价：5.75美元
时间周期：6个月
基于以下几点，我们建议在4.5美元以下买入GNC，目标价5.75:
短期债务问题已基本解决
美国的生意趋于稳定而和哈制药的合作提供了在国内加速发展的可能， 基
于这两点，目前EV/EBITDA的估值偏低
较高的卖空率提供了短期挤空的可能
GNC的股价从2017最高11美元下跌至目前4-5美元区间，短期债务问题是主要原因。
然而，上周五的债务延期公告加上哈制药300M的投资，我们认为GNC的短期债务问
题已基本解决。 上周五的公告主要针对GNC 1.13B 2019的现有定期债（Term
Loan），有以下几点：
87%的债权人同意延期债权
尽管没有达到哈制药原来要求的90％的标准线，哈制药同意继续300M的投资
同意延期的债权人持有大约0.87*1.13B=983M, 其中275M将转为2022到期的
资产抵押债（ABL），利息Libor＋700bps，剩下的708M将... 阅读全帖 |
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R****g
发帖数: 110 | 3 我在做illumina测序的样品，胶上切下来后再Qiagen column纯化的250bp的条带用
Bioanalyzer检测就成了350－
400bp了，不知道相信胶还是Bioanalyzer了。版上有没有朋友碰到过同样的问题，怎么
解决的？能直接送去测序吗？多
谢。 |
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R****g
发帖数: 110 | 4 不是，我是原来DNA打碎后加的Adaptor的，然后用PE引物做了emulsion PCR，PCR产物
250bp切胶回收后又用PE引物
重新扩增。总之，用PE引物扩增的产物用E-gel和bioanalyzer检测的大小差100bp左右
。我现在想想可能是引物的问题，
原来illumina的引物我用完后就用invitrogen合成的，不知道illumina是不是把引物做
了修饰所以特别好用，或者和我自己
的引物序列都不一样。 |
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c***y
发帖数: 615 | 5 又做了一些实验，有了新的结果，所以想再听听意见。
鉴于有些cis-regulatory elements是多个基因共享的，所以同时检测了一下它在
luciferase 5'end 的效应。结果是，无论它在5'end 还是3'end, 都增强luciferase的
表达。
由于这个片段(长约250bp)含有转录因子的consensus(8bp)序列，所以做了个deletion
突变，去掉这个consensus序列。再去检测luciferase的活性，发现如果片段位于
luciferase 5'end, 突变后luciferase活性降低到只有原来的 20%；这应该是个好结果
，因为证明了5'end端的增强基因表达作用确实是由转录因子介导的。
奇怪的是，如果片段位于luciferase 3'end, 突变好像对luciferase的活性没影响。
该怎样这样的矛盾结果？
processing |
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s********2
发帖数: 138 | 6 我最近调一个基因的基因组序列，根据cDNA序列的5'和3’UTR区域设计了一对引物，在
基因组里扩增，结果发现了能扩增出来三条带。经测序，发现外显子的序列是一致的，
但是内含子的序列差异很大。这三种情况，内含子的插入位置是一致的，并且是都只有
两个内含子。第一种和第二种相似，但是第二种比第一种在内含子上多了250bp的序列
。而第三种的内含子和这两种就完全不同了。我不知道大家遇到过类似的基因么？如果
遇到这种情况，接着往下做的思路是怎么样的呢？这个基因可能是和抗病相关，我本来
是打算做这个基因外显子部分的SNP和抗病的相关性分析的。但是出来这样的结果，觉
得可以往下做点东西，但是又没有什么思路。希望大家能够给予指导。谢谢! |
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t**k
发帖数: 16 | 7 最近发现一个promoter上有一个CpG的G突变到T(我不确定这个CGCG就是transcription
factor的binding site,但是这个CpG的位置就在转录起始点上游大概250bp左右,看chip
-sequencing结果,位置比较像)
我想证明一下,这个可能和甲基化有关,并且有可能影响蛋白表达水平的提高. qPCR显示
表达水平提高了,但是不知道是不是就是这个突变造成的.
哪位老师帮忙设计个可行的办法,我是新手,请大家多多帮忙! |
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w********r
发帖数: 1431 | 8 这个size没问题，我们做的是超声到peak的中心在250bp，比你这个稍微大一点点。
不过我觉得片段稍微小一点的话测序也没问题，RNA-Seq的片段还要更小。况且后来还
要按照size回收DNA。
有的用input做control，有的用IgG IP做control，都可以。开会问过一个大牛，他说
他们input和IgG两个control都做。 |
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发帖数: 1 | 9 哪位大侠能否帮我看看这个DNA shear/sonicating之后的跑胶图。用的ladder是100bp
的ladder.我有两个问题：
1. 前三个的bandsize是不是太小了？我用的protocol上说sonicate后至少要750-250bp.
2. 后三个究竟是under-shearing还是over-shearing?
我从来没做过CHIP,所处的实验室也不是做这个的。
P.S.前三个和后三个是不同的细胞系。 |
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