d******r 发帖数: 124 | 1 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: disaster (--), 信区: Biology
标 题: 问一个whole cell recording的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jun 4 17:23:09 2011, 美东)
本人菜鸟,刚开始学习whole cell recording,记录culture neuron的mEPSC。目前遇
到一个问题,giga封接很好,但是把膜吸破后,膜电阻一下变得很低,只有40-50兆欧
。请问这是什么问题?是细胞状态不好?还是我技术还不到家? |
f**d 发帖数: 768 | 2 形成giga后,你的电阻是多少?常规应该在>10 Gohm
吸破后,briage balance电阻一般在4-20 Mohm
input resistance will depend on cell type (30-200Mohm for pyramidal cell,
200-400 for interneuron genrally)
不知你的是多少
【在 d******r 的大作中提到】 : 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】 : 发信人: disaster (--), 信区: Biology : 标 题: 问一个whole cell recording的问题 : 发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jun 4 17:23:09 2011, 美东) : 本人菜鸟,刚开始学习whole cell recording,记录culture neuron的mEPSC。目前遇 : 到一个问题,giga封接很好,但是把膜吸破后,膜电阻一下变得很低,只有40-50兆欧 : 。请问这是什么问题?是细胞状态不好?还是我技术还不到家?
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w********y 发帖数: 288 | 3 有可能是细胞的问题,不过如果你说你是新手还在练习的话,更可能是技术不到家,破
膜那一下太猛了,温柔点儿,呵呵。btw,破膜是用嘴吗?不是的话考虑用嘴
试试。
【在 d******r 的大作中提到】 : 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】 : 发信人: disaster (--), 信区: Biology : 标 题: 问一个whole cell recording的问题 : 发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jun 4 17:23:09 2011, 美东) : 本人菜鸟,刚开始学习whole cell recording,记录culture neuron的mEPSC。目前遇 : 到一个问题,giga封接很好,但是把膜吸破后,膜电阻一下变得很低,只有40-50兆欧 : 。请问这是什么问题?是细胞状态不好?还是我技术还不到家?
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d******r 发帖数: 124 | 4 形成giga之后,一般小于10 Gohm,很少达到10以上
bridge balance电阻是Ra吗?有时候小于20,但也有时候达到40以上
input resistance倒是在30-200Mohm之间。
【在 f**d 的大作中提到】 : 形成giga后,你的电阻是多少?常规应该在>10 Gohm : 吸破后,briage balance电阻一般在4-20 Mohm : input resistance will depend on cell type (30-200Mohm for pyramidal cell, : 200-400 for interneuron genrally) : 不知你的是多少
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d******r 发帖数: 124 | 5 我是用嘴吸的,有时候用力太轻,又吸不破。
【在 w********y 的大作中提到】 : 有可能是细胞的问题,不过如果你说你是新手还在练习的话,更可能是技术不到家,破 : 膜那一下太猛了,温柔点儿,呵呵。btw,破膜是用嘴吗?不是的话考虑用嘴 : 试试。
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n****r 发帖数: 246 | 6 这个就得多练
【在 d******r 的大作中提到】 : 我是用嘴吸的,有时候用力太轻,又吸不破。
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f**d 发帖数: 768 | 7 then you need to study what is bridge balance first.
and what is your question again?
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【在 d******r 的大作中提到】 : 形成giga之后,一般小于10 Gohm,很少达到10以上 : bridge balance电阻是Ra吗?有时候小于20,但也有时候达到40以上 : input resistance倒是在30-200Mohm之间。
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d******r 发帖数: 124 | 8 我就是想记mEPSC,看看neuron的synaptic input的有没有变化。
我是应该补充下理论知识,有什么书籍资料推荐吗?
【在 f**d 的大作中提到】 : then you need to study what is bridge balance first. : and what is your question again? : : ,
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f**d 发帖数: 768 | 9 我不知道你用来记录的是MULTIPLECLAMP 700B还是其他仪器
下面这个说明书的tutorial部分,你照着做完,也基本就明白一些基本知识
说明书用的是model cell(简单的RC电路)作为记录样品
www.autom8.com/docs/MultiClamp_700B.pdf
还有本全面的理论学习的书
http://www.psychiatry.wustl.edu/zorumski/Axon_Guide.PDF
【在 d******r 的大作中提到】 : 我就是想记mEPSC,看看neuron的synaptic input的有没有变化。 : 我是应该补充下理论知识,有什么书籍资料推荐吗?
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d******r 发帖数: 124 | 10 我们用的正是700B,axon guide我也有,就是一直没有静下心来看。
多谢热心帮助!
【在 f**d 的大作中提到】 : 我不知道你用来记录的是MULTIPLECLAMP 700B还是其他仪器 : 下面这个说明书的tutorial部分,你照着做完,也基本就明白一些基本知识 : 说明书用的是model cell(简单的RC电路)作为记录样品 : www.autom8.com/docs/MultiClamp_700B.pdf : 还有本全面的理论学习的书 : http://www.psychiatry.wustl.edu/zorumski/Axon_Guide.PDF
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