A*******0 发帖数: 27 | 1 做样品制备的时候,如果检测样品数量大,需要两块以上96-well plate。每块板都需
要有自己的calibration curve和QCs吗?还是做在一块板上就可以了?
谢谢! |
S***x 发帖数: 2012 | 2 最好每个plate是个独立的set,不过如果你把standard and QC 分配到两个plates里,
只要最后能过,也能解释得了
【在 A*******0 的大作中提到】 : 做样品制备的时候,如果检测样品数量大,需要两块以上96-well plate。每块板都需 : 要有自己的calibration curve和QCs吗?还是做在一块板上就可以了? : 谢谢!
|
A*******0 发帖数: 27 | 3 多谢回复!
也就是说最好每块板都要做独立的标准曲线和QC,计算样品的时候每块板单独核算,是
吗?这个主要是考虑不同板之间的差别?
另外“把standard and QC 分配到两个plates里”这个具体怎么操作?
【在 S***x 的大作中提到】 : 最好每个plate是个独立的set,不过如果你把standard and QC 分配到两个plates里, : 只要最后能过,也能解释得了
|
S***x 发帖数: 2012 | 4
对
比如你有8个standard 和6个QC.每个plate里放4个standard和3个QC
【在 A*******0 的大作中提到】 : 多谢回复! : 也就是说最好每块板都要做独立的标准曲线和QC,计算样品的时候每块板单独核算,是 : 吗?这个主要是考虑不同板之间的差别? : 另外“把standard and QC 分配到两个plates里”这个具体怎么操作?
|
A*******0 发帖数: 27 | 5 谢谢解释!
我刚刚搜索到一篇文献,和你说的类似,推荐模式是两块板以上的情况,每块板包括一
条标准曲线和3个QC。
另外可不可以再请教一下,你们一般怎么确定outlier呢?
【在 S***x 的大作中提到】 : : 对 : 比如你有8个standard 和6个QC.每个plate里放4个standard和3个QC
|
S***x 发帖数: 2012 | 6 不客气,举手之劳
根据FDA的要求,for GLP, no more than 15% for all standards and QC except
lowest standard which can be 20%;for non-GLP, usually 20% for all
【在 A*******0 的大作中提到】 : 谢谢解释! : 我刚刚搜索到一篇文献,和你说的类似,推荐模式是两块板以上的情况,每块板包括一 : 条标准曲线和3个QC。 : 另外可不可以再请教一下,你们一般怎么确定outlier呢?
|
c******m 发帖数: 884 | 7 如果你所有的板子都是一起准备的,而且是在同一天之内完成LCMS,应该一个
calibration curve 就够了。
不过 Sciex 给的答案更专业。(Sciex不会是在AB上班的吧?) |
s*******c 发帖数: 179 | 8 看你是GLP还是non-GLP。原则上讲,如果是GLP的检测,方法里要validate用一套
calibrators和QCs能通过的最大样品量。validation完了,就可以用一套calibrators
和QCs做一块或两块96-well plate,只要小于你validated最大样品数就可以了。一般要
在头和尾都有calibrators包围样品. non-GLP的话,who cares.
【在 A*******0 的大作中提到】 : 做样品制备的时候,如果检测样品数量大,需要两块以上96-well plate。每块板都需 : 要有自己的calibration curve和QCs吗?还是做在一块板上就可以了? : 谢谢!
|
S***x 发帖数: 2012 | 9 对。但我估计他可能还没validate method
calibrators
【在 s*******c 的大作中提到】 : 看你是GLP还是non-GLP。原则上讲,如果是GLP的检测,方法里要validate用一套 : calibrators和QCs能通过的最大样品量。validation完了,就可以用一套calibrators : 和QCs做一块或两块96-well plate,只要小于你validated最大样品数就可以了。一般要 : 在头和尾都有calibrators包围样品. non-GLP的话,who cares.
|
i***l 发帖数: 9994 | 10 Sciex and superstic, 二位能不能给推荐一本书或者综述,讲解如何做标准曲线,QC
和Validation的?多谢。 |
S***x 发帖数: 2012 | 11 看一下2001 FDA Bioanalytical Guideline, 2007 Crystal City Report,还有这几年
CVG的White Paper
QC
【在 i***l 的大作中提到】 : Sciex and superstic, 二位能不能给推荐一本书或者综述,讲解如何做标准曲线,QC : 和Validation的?多谢。
|
i***l 发帖数: 9994 | 12 many thanks..
【在 S***x 的大作中提到】 : 看一下2001 FDA Bioanalytical Guideline, 2007 Crystal City Report,还有这几年 : CVG的White Paper : : QC
|
A*******0 发帖数: 27 | 13 正在做method validation.估计实际样品大约有100个,一块板肯定不够。
【在 S***x 的大作中提到】 : 对。但我估计他可能还没validate method : : calibrators
|
A*******0 发帖数: 27 | 14 谢谢回答,对于这个“方法里要validate用一套calibrators和QCs能通过的最大样品量
”比较糊涂,具体怎么实现呢?
btw,是GLP
calibrators
【在 s*******c 的大作中提到】 : 看你是GLP还是non-GLP。原则上讲,如果是GLP的检测,方法里要validate用一套 : calibrators和QCs能通过的最大样品量。validation完了,就可以用一套calibrators : 和QCs做一块或两块96-well plate,只要小于你validated最大样品数就可以了。一般要 : 在头和尾都有calibrators包围样品. non-GLP的话,who cares.
|