h*****e
发帖数: 1330 | 1 眼下这个地方只有HPLC-UV detector和MALDI-TOF，没有LC-MS这种高级武器（别笑话，没办法）。本来的想法是HCL全水解交联蛋白后PITC柱前衍生化，然后HPLC分离PITC-AAs，可能会得到未知交联的氨基酸（PITC-AA1-AA2-PITC），然后用MALDI-TOF测分子量（PITC衍生的交联的产物PITC-AA1-AA2-PITC的分子量可能在500~600)，但用了DHB常规MALDI或则NALDI试了试，连PITC-AAs的分子量都看不了。
目前只看到一国内文章上说PITC柱前衍生化的方法只能用UV detect，是不是MS对这种衍生物不work。英文的也没有这样说的 |
h*****e
发帖数: 1330 | 2 质谱高手看看
，没办法）。本来的想法是HCL全水解交联蛋白后PITC柱前衍生化，然后HPLC分离PITC-
AAs，可能会得到未知交联的氨基酸（PITC-AA1-AA2-PITC），然后用MALDI-TOF测分子
量（PITC衍生的交联的产物PITC-AA1-AA2-PITC的分子量可能在500~600)，但用了DHB常
规MALDI或则NALDI试了试，连PITC-AAs的分子量都看不了。
种衍生物不work。英文的也没有这样说的
【在 h*****e 的大作中提到】
: 眼下这个地方只有HPLC-UV detector和MALDI-TOF，没有LC-MS这种高级武器（别笑话，没办法）。本来的想法是HCL全水解交联蛋白后PITC柱前衍生化，然后HPLC分离PITC-AAs，可能会得到未知交联的氨基酸（PITC-AA1-AA2-PITC），然后用MALDI-TOF测分子量（PITC衍生的交联的产物PITC-AA1-AA2-PITC的分子量可能在500~600)，但用了DHB常规MALDI或则NALDI试了试，连PITC-AAs的分子量都看不了。
: 目前只看到一国内文章上说PITC柱前衍生化的方法只能用UV detect，是不是MS对这种衍生物不work。英文的也没有这样说的
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W*******R
发帖数: 1224 | |
h*****e
发帖数: 1330 | 4 已经酸解成氨基酸了，再PITC衍生， 然后HPLC，接着MS（用MALDI/NALDI-TOF），感觉
测不出来
【在 W*******R 的大作中提到】
: 晕！你是要用PITC做edman降解吗？
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W*******R
发帖数: 1224 | 5 PITC对氨基的衍生物在酸性下很不稳定，你过柱子柱子如果是硅胶柱等弱酸性物质，你
当然什么都拿不到。好好看看edman降解是怎么回事，机理要搞懂。
【在 h*****e 的大作中提到】
: 已经酸解成氨基酸了，再PITC衍生， 然后HPLC，接着MS（用MALDI/NALDI-TOF），感觉
: 测不出来
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