d****i 发帖数: 2346 | 1 要观察的分子是对营养丰富与否比较敏感,是个sensor蛋白。我用drug处理细胞做time
course发现,
1)用DMEM+10%FBS的时候,western信号是随着时间延长不断下降。
2)用serum free medium的时候,western信号并没有随着时间变化而变化。
请大牛指点,那个结果更可信?谢谢! |
s********r 发帖数: 312 | 2 这个太正常了,用不同的培养条件细胞本来状态就不一样
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【在 d****i 的大作中提到】 : 要观察的分子是对营养丰富与否比较敏感,是个sensor蛋白。我用drug处理细胞做time : course发现, : 1)用DMEM+10%FBS的时候,western信号是随着时间延长不断下降。 : 2)用serum free medium的时候,western信号并没有随着时间变化而变化。 : 请大牛指点,那个结果更可信?谢谢!
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F******p 发帖数: 2099 | |
d****i 发帖数: 2346 | |
s******r 发帖数: 1245 | 5 挺正常的
不同vendor不同batch的FBS还会有差异呢
能编个说的过去的理由解释一下就行
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【在 d****i 的大作中提到】 : 要观察的分子是对营养丰富与否比较敏感,是个sensor蛋白。我用drug处理细胞做time : course发现, : 1)用DMEM+10%FBS的时候,western信号是随着时间延长不断下降。 : 2)用serum free medium的时候,western信号并没有随着时间变化而变化。 : 请大牛指点,那个结果更可信?谢谢!
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v*******e 发帖数: 11604 | |
w*******u 发帖数: 128 | 7 血清对药物的稳定性影响太大了。很多药物在无血清的条件里降解的非常快 |
h******y 发帖数: 351 | 8 一般情况下,尽量选择用同一种培养液。如楼上说的,FBS的影响很大。FBS中通常含有
很多生长因子,例如IGF,PDGF。还有微量的IL-1,IL-6,TGF-b等。
其次,培养液中的某些离子,尤其是Ca离子的浓度对细胞的影响通常被人忽视。如果你
的细胞是上皮细胞,serum free的medium中通常Ca离子的浓度很低(0.1-0.2mM),而
DMEM中的Ca离子浓度是1.8mM,这对很多细胞粘连蛋白和信号通路都有显著的影响。
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【在 d****i 的大作中提到】 : 要观察的分子是对营养丰富与否比较敏感,是个sensor蛋白。我用drug处理细胞做time : course发现, : 1)用DMEM+10%FBS的时候,western信号是随着时间延长不断下降。 : 2)用serum free medium的时候,western信号并没有随着时间变化而变化。 : 请大牛指点,那个结果更可信?谢谢!
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d****i 发帖数: 2346 | |
x********e 发帖数: 35261 | 10 没看懂你想问什么。既然分子是对营养敏感,血清应该算个变量了。你改了变量得出不
同结果不是很正常吗?两个结果都是结果,不存在一个比另一个更可信的问题。
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【在 d****i 的大作中提到】 : 要观察的分子是对营养丰富与否比较敏感,是个sensor蛋白。我用drug处理细胞做time : course发现, : 1)用DMEM+10%FBS的时候,western信号是随着时间延长不断下降。 : 2)用serum free medium的时候,western信号并没有随着时间变化而变化。 : 请大牛指点,那个结果更可信?谢谢!
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g*********9 发帖数: 3528 | 11 有些实验还得一个批号的血清,一次买10瓶20瓶,确保做到一个project结束。 |