p*******r
发帖数: 156 | 1 最近本人在将一个6000-8000bp连接到pcDNA 3.1（+）(5400bp)中去, 使用普通的连接
酶至今都没有连接进去，真心向各位大虾请教，大家通常如何使用什么神奇的连接方法
和kit,thanks a lot | r**a
发帖数: 121 | 2 我觉得联接酶，应该不会有什么问题的，常用的T4，至少我连6000片段到8000载体没有
什么问题。
你看看前面的步骤，酶切位点有没有特殊性，切没有切好（保护碱基啊），我觉得初问
题可能性更大
【在 p*******r 的大作中提到】
: 最近本人在将一个6000-8000bp连接到pcDNA 3.1（+）(5400bp)中去, 使用普通的连接
: 酶至今都没有连接进去，真心向各位大虾请教，大家通常如何使用什么神奇的连接方法
: 和kit,thanks a lot
| s***o
发帖数: 1189 | 3 要trouble shooting就很费工了。insert和backbone的compatibility，目的籽粒和宿
主菌的compatibility都有可能会影响结果。 |
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