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Biology版 - 求fat tissue 中提取蛋白protocol )做western,谢谢
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话题: tissue话题: fat话题: 蛋白话题: protocol话题: 提取
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K**R
发帖数: 193
1
发现fat tissue 如果用裂解液直接煮不行,样品会很粘稠,上样后条带曝光很差。请
教大家有什么好方法吗?非常感谢
e****s
发帖数: 1125
2
methanol percipitation?
K**R
发帖数: 193
3
? 这个是什么方法
y****i
发帖数: 2194
4
匀浆,4c离心半小时,弃沉淀弃浮油 取中间层

【在 K**R 的大作中提到】
: 发现fat tissue 如果用裂解液直接煮不行,样品会很粘稠,上样后条带曝光很差。请
: 教大家有什么好方法吗?非常感谢

K**R
发帖数: 193
5
谢谢您啊,我有两个问题,第一转速是多少? 12000rcf?
另外直接加lysis buffer 半个小时4度离心 蛋白会不会降解?

【在 y****i 的大作中提到】
: 匀浆,4c离心半小时,弃沉淀弃浮油 取中间层
y****i
发帖数: 2194
6
用台式离心机的最高转速, 12000够了
lysis buffer里面根据需要补充各种inhibitor(protease, phosphatase等等)

【在 K**R 的大作中提到】
: 谢谢您啊,我有两个问题,第一转速是多少? 12000rcf?
: 另外直接加lysis buffer 半个小时4度离心 蛋白会不会降解?

K**R
发帖数: 193
7
谢谢!

【在 y****i 的大作中提到】
: 用台式离心机的最高转速, 12000够了
: lysis buffer里面根据需要补充各种inhibitor(protease, phosphatase等等)

n***w
发帖数: 2405
8
我就是超声匀浆,四度离心15分钟,收supernatant,测蛋白跑胶
1 (共1页)
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问一下western blot sample sticky 的问题RNA降解的问题
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