r*****i
发帖数: 117 | 1 我负责一KO小鼠colony，这个基因和一种免疫细胞相关。
此小鼠一岁时，spleen和liver出现tumor,明显比WT的大许多，见照片。
而且腿骨非常脆，一岁甚至8个月KO小鼠的腿骨就和2岁的WT的腿骨差不多，甚至更脆。
骨髓细胞中CD11b+细胞达到90%，有粒细胞白血病的征兆，正常的一岁的WT小鼠大约60-
70%。
请问大家我如何针对性的进行研究，比如spleen，liver和骨髓细胞。
我是个新手，老板对cancer也不是很熟，而且他也经常不在实验室，飞来飞去。
谢谢 |
r*****i
发帖数: 117 | 2
【在 r*****i 的大作中提到】
: 我负责一KO小鼠colony，这个基因和一种免疫细胞相关。
: 此小鼠一岁时，spleen和liver出现tumor,明显比WT的大许多，见照片。
: 而且腿骨非常脆，一岁甚至8个月KO小鼠的腿骨就和2岁的WT的腿骨差不多，甚至更脆。
: 骨髓细胞中CD11b+细胞达到90%，有粒细胞白血病的征兆，正常的一岁的WT小鼠大约60-
: 70%。
: 请问大家我如何针对性的进行研究，比如spleen，liver和骨髓细胞。
: 我是个新手，老板对cancer也不是很熟，而且他也经常不在实验室，飞来飞去。
: 谢谢
|
r*****i
发帖数: 117 | 3
【在 r*****i 的大作中提到】
: 我负责一KO小鼠colony，这个基因和一种免疫细胞相关。
: 此小鼠一岁时，spleen和liver出现tumor,明显比WT的大许多，见照片。
: 而且腿骨非常脆，一岁甚至8个月KO小鼠的腿骨就和2岁的WT的腿骨差不多，甚至更脆。
: 骨髓细胞中CD11b+细胞达到90%，有粒细胞白血病的征兆，正常的一岁的WT小鼠大约60-
: 70%。
: 请问大家我如何针对性的进行研究，比如spleen，liver和骨髓细胞。
: 我是个新手，老板对cancer也不是很熟，而且他也经常不在实验室，飞来飞去。
: 谢谢
|
r*****i
发帖数: 117 | |
r*****i
发帖数: 117 | |
z****q
发帖数: 18 | |
D*a
发帖数: 6830 | 7 accelerated aging?
很热的，跳吧。 |
D****g
发帖数: 275 | 8 Checking the cell population in blood and bone marrow of young animals to
figure out the abnormality of certain cell lineage, and then pinpoint the
pathway and molecules involved in this lineage abnomormality. Good luck. |
r*****i
发帖数: 117 | |
r*****i
发帖数: 117 | 10 谢谢你， 我有个疑问，血液细胞的异变会引起liver cancer吗？我对liver cancer不
懂。
另外，你觉得用serum （KO vs WT）做个cytokine array如何？
谢谢你
【在 D****g 的大作中提到】
: Checking the cell population in blood and bone marrow of young animals to
: figure out the abnormality of certain cell lineage, and then pinpoint the
: pathway and molecules involved in this lineage abnomormality. Good luck.
|
|
|
L**S
发帖数: 7833 | 11 immunosurveillance挂了呗，cancer就出来了
【在 r*****i 的大作中提到】
: 谢谢你， 我有个疑问，血液细胞的异变会引起liver cancer吗？我对liver cancer不
: 懂。
: 另外，你觉得用serum （KO vs WT）做个cytokine array如何？
: 谢谢你
|
f*******e
发帖数: 354 | 12 这么厉害的基因啊
60-
【在 r*****i 的大作中提到】
: 我负责一KO小鼠colony，这个基因和一种免疫细胞相关。
: 此小鼠一岁时，spleen和liver出现tumor,明显比WT的大许多，见照片。
: 而且腿骨非常脆，一岁甚至8个月KO小鼠的腿骨就和2岁的WT的腿骨差不多，甚至更脆。
: 骨髓细胞中CD11b+细胞达到90%，有粒细胞白血病的征兆，正常的一岁的WT小鼠大约60-
: 70%。
: 请问大家我如何针对性的进行研究，比如spleen，liver和骨髓细胞。
: 我是个新手，老板对cancer也不是很熟，而且他也经常不在实验室，飞来飞去。
: 谢谢
|
o**d
发帖数: 3080 | 13 建议分析一下年轻老鼠的脾，1岁老鼠有这些自发的症状，年轻老鼠也应该会有一些
phenotype。 |
D****g
发帖数: 275 | 14
I am not in cancer field, I can not give exact answer about whether there is
liver cancer originated from blood or not, but I guess the answer should be
YES. Because both spleen and liver get cancer in your mice and both tissues
have cells originated from bone morrow (macrophages for both tissues and
erythroblast precursor for spleen), there is high chance that the cancer is
related with bone marrow, it will be very helpful if you can check the cell
population in the bone marrow, blood and spleen in the young animals.
Probably you can ask some experts to check the section of the tumor in the
spleen and liver and tell the cell type and origin of the tumor.
To me, cytokine array is helpful but it is not the prior test that you
should do. Good luck.
【在 r*****i 的大作中提到】
: 谢谢你， 我有个疑问，血液细胞的异变会引起liver cancer吗？我对liver cancer不
: 懂。
: 另外，你觉得用serum （KO vs WT）做个cytokine array如何？
: 谢谢你
|
n*********b
发帖数: 140 | 15 Sounds like myeloproliferative disorders.
60-
【在 r*****i 的大作中提到】
: 我负责一KO小鼠colony，这个基因和一种免疫细胞相关。
: 此小鼠一岁时，spleen和liver出现tumor,明显比WT的大许多，见照片。
: 而且腿骨非常脆，一岁甚至8个月KO小鼠的腿骨就和2岁的WT的腿骨差不多，甚至更脆。
: 骨髓细胞中CD11b+细胞达到90%，有粒细胞白血病的征兆，正常的一岁的WT小鼠大约60-
: 70%。
: 请问大家我如何针对性的进行研究，比如spleen，liver和骨髓细胞。
: 我是个新手，老板对cancer也不是很熟，而且他也经常不在实验室，飞来飞去。
: 谢谢
|
z*t
发帖数: 863 | 16 spleen和肝脏看起来像myeloid sarcoma，建议外周血，骨髓染色看看
还要做外周血CBC分析
60-
【在 r*****i 的大作中提到】
: 我负责一KO小鼠colony，这个基因和一种免疫细胞相关。
: 此小鼠一岁时，spleen和liver出现tumor,明显比WT的大许多，见照片。
: 而且腿骨非常脆，一岁甚至8个月KO小鼠的腿骨就和2岁的WT的腿骨差不多，甚至更脆。
: 骨髓细胞中CD11b+细胞达到90%，有粒细胞白血病的征兆，正常的一岁的WT小鼠大约60-
: 70%。
: 请问大家我如何针对性的进行研究，比如spleen，liver和骨髓细胞。
: 我是个新手，老板对cancer也不是很熟，而且他也经常不在实验室，飞来飞去。
: 谢谢
|
n*********b
发帖数: 140 | 17 It does, but myeloid sarcoma is generally regarded as a descriptive term for
a subset of myeloproliferative disorders.
【在 z*t 的大作中提到】
: spleen和肝脏看起来像myeloid sarcoma，建议外周血，骨髓染色看看
: 还要做外周血CBC分析
:
: 60-
|
z*t
发帖数: 863 | 18 MPD是应该有的，不过没有CBC/bone marrow imprint不好说
for
【在 n*********b 的大作中提到】
: It does, but myeloid sarcoma is generally regarded as a descriptive term for
: a subset of myeloproliferative disorders.
|
N****n
发帖数: 294 | 19 I am just thinking. Can you find out first the origin of the tumor cells in
liver and spleen? |
r*****i
发帖数: 117 | 20 thank all of you,
I discussed with my boss, he suggested me to do the following experiment:
1. measure the density of bone of KO mice, young KO vs WT, old KO vs WT
2. sections for live and spleen to verify the tumor: myeloid sarcoma,
lymphoma or others,
3. transplantation experiment: KO mice as recipient and donor to check
intrinsic or extrinsic influence,
4. Irradiate young KO mice (sub-lethal) to check DNA damage-inducible
changes in bone marrow, sleen, thymus.
5. analyze different sub-population between WT and KO.
How do you think? |
|
|
i*********0
发帖数: 915 | 21 i think the priority should be 5-2-3/1-4. |
r*****i
发帖数: 117 | 22 THANK YOU
【在 i*********0 的大作中提到】
: i think the priority should be 5-2-3/1-4.
|
r*****i
发帖数: 117 | |
s********n
发帖数: 248 | 24 敲的是跟CSF-1或者phosphoinositide信号通路有关的么？Meyloid progenitor 分化成
monocyte/osteoblast/osteoclast那一类细胞的分化通路受到影响了么？ |
r*****i
发帖数: 117 | 25 thank you for your suggestions.
Differentiation of myeloid progenitor into monocyte/osteoblast/osteoclast
could be influenced. We have litter evidence for it, but not enough.
We found there is more osteoclast in KO mice compared to WT ctl at the same
age. and bone density is less compared to control mice.
As for your suggestion: Meyloid progenitor 分化成monocyte/osteoblast/
osteoclast那一类细胞的分化通路受到影响了么.
How can we check it?
Here is my plan: check MPP, CMP, MEP, GMP and monocyte number for KO and
control mice.
Is there any pivotal pathway invovled in differentiation of myeloid
progenitor into monocyte/osteoblast/osteoclast?
how do you think?
thank you and sorry the language issue because I cannot input chinese by
using this computor in my office.
【在 s********n 的大作中提到】
: 敲的是跟CSF-1或者phosphoinositide信号通路有关的么？Meyloid progenitor 分化成
: monocyte/osteoblast/osteoclast那一类细胞的分化通路受到影响了么？
|
r*****i
发帖数: 117 | 26 This gene I am working on is not related to CSF1 or phosphoinositide.
It is not well known or studied.
【在 s********n 的大作中提到】
: 敲的是跟CSF-1或者phosphoinositide信号通路有关的么？Meyloid progenitor 分化成
: monocyte/osteoblast/osteoclast那一类细胞的分化通路受到影响了么？
|
r*****i
发帖数: 117 | 27 F4/80---->macrophage
CD115&Mac1---->monocyte |
r*****i
发帖数: 117 | 28 some suggestions from my boss:
1. colony forming assay,
2. RBC count,
3. body weight measure,
4. blood smear assay (cytospin) |
j******1
发帖数: 1315 | 29 一岁的老鼠太老了，很难说是自发形成的tumor还是ko的结果 |
r*****i
发帖数: 117 | 30 第一，我的对照小鼠在一岁多的时候没有一个发现tumor，但是我的KO小鼠30%出现
tumor。
第二，有的KO小鼠在8-9个月大的时候，BM里面就出现CD11b+达到90%的状况。
所以，我觉得这不是偶然现象。
【在 j******1 的大作中提到】
: 一岁的老鼠太老了，很难说是自发形成的tumor还是ko的结果
|
|
|
z*t
发帖数: 863 | 31 不仅要做cmp/mep/gmp lt-hsc/st-hsc/mpp staining,还要有完整的lineage analysis:
erythroid: ter119/cd71, myeloid: Gr1, mac1， B cell lineage: CD19, B220 T
cell lineage: CD4,CD8。这些外周血、骨髓，spleen都做一下.对于block of
differentiation,主要还是FACS和giemsa-wright stain来确定。
还有为了排除microenvironment的影响，还要把KO mice的bm移植给wt mice。至于
osteoclast,最近认为lymphnoid progenitor会呆在osteoblast旁边，并受cxcl12调控
。去年的ASH也有人在osteoblast overexpress beta-catenin可以导致leukemia的
same
【在 r*****i 的大作中提到】
: thank you for your suggestions.
: Differentiation of myeloid progenitor into monocyte/osteoblast/osteoclast
: could be influenced. We have litter evidence for it, but not enough.
: We found there is more osteoclast in KO mice compared to WT ctl at the same
: age. and bone density is less compared to control mice.
: As for your suggestion: Meyloid progenitor 分化成monocyte/osteoblast/
: osteoclast那一类细胞的分化通路受到影响了么.
: How can we check it?
: Here is my plan: check MPP, CMP, MEP, GMP and monocyte number for KO and
: control mice.
|
r*****i
发帖数: 117 | 32 thank you.
analysis:
【在 z*t 的大作中提到】
: 不仅要做cmp/mep/gmp lt-hsc/st-hsc/mpp staining,还要有完整的lineage analysis:
: erythroid: ter119/cd71, myeloid: Gr1, mac1， B cell lineage: CD19, B220 T
: cell lineage: CD4,CD8。这些外周血、骨髓，spleen都做一下.对于block of
: differentiation,主要还是FACS和giemsa-wright stain来确定。
: 还有为了排除microenvironment的影响，还要把KO mice的bm移植给wt mice。至于
: osteoclast,最近认为lymphnoid progenitor会呆在osteoblast旁边，并受cxcl12调控
: 。去年的ASH也有人在osteoblast overexpress beta-catenin可以导致leukemia的
:
: same
|
r*****i
发帖数: 117 | 33 western blot发现nfkb１在ko小鼠中显著低表达 |
r*****i
发帖数: 117 | 34 western blot发现p53在ko小鼠中显著低表达 |
i*********0
发帖数: 915 | |
r*****i
发帖数: 117 | |
