m******5 发帖数: 1383 | 1 anyone here have experience doing westernblot by extracting formadehyde
cross linked sample?
my target protein is labled by HA-Tag(knocked in into the original loci
expression the same protein) |
m******5 发帖数: 1383 | |
s******s 发帖数: 13035 | 3 decrosslink吗?run gel不是问题,wb理论应该没有问题
【在 m******5 的大作中提到】 : anyone here have experience doing westernblot by extracting formadehyde : cross linked sample? : my target protein is labled by HA-Tag(knocked in into the original loci : expression the same protein)
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s******y 发帖数: 28562 | 4 怎么个decrosslink 啊? 我以前试过,如果只是长时间煮的话,
上胶后基本上都是跑出一条smear 来,貌似不是好方法。
【在 s******s 的大作中提到】 : decrosslink吗?run gel不是问题,wb理论应该没有问题
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b*****o 发帖数: 150 | 5 decrosslink by heating at 60C for 30mim
【在 m******5 的大作中提到】 : anyone here have experience doing westernblot by extracting formadehyde : cross linked sample? : my target protein is labled by HA-Tag(knocked in into the original loci : expression the same protein)
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s******y 发帖数: 28562 | 6 有没有更好的方法?比方说加个啥啥啥让那个键破掉什么的。
光是加热的话经常不彻底,有时候拖带太厉害,很难看。
【在 b*****o 的大作中提到】 : decrosslink by heating at 60C for 30mim
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m******5 发帖数: 1383 | 7 我也正悲催地看着 长长的smear 发愁呢。。。
【在 s******y 的大作中提到】 : 怎么个decrosslink 啊? 我以前试过,如果只是长时间煮的话, : 上胶后基本上都是跑出一条smear 来,貌似不是好方法。
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