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Biology版 - western blot formadehyde cross linked sample?
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m******5
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1
anyone here have experience doing westernblot by extracting formadehyde
cross linked sample?
my target protein is labled by HA-Tag(knocked in into the original loci
expression the same protein)
m******5
发帖数: 1383
2
ding
s******s
发帖数: 13035
3
decrosslink吗?run gel不是问题,wb理论应该没有问题

【在 m******5 的大作中提到】
: anyone here have experience doing westernblot by extracting formadehyde
: cross linked sample?
: my target protein is labled by HA-Tag(knocked in into the original loci
: expression the same protein)

s******y
发帖数: 28562
4
怎么个decrosslink 啊? 我以前试过,如果只是长时间煮的话,
上胶后基本上都是跑出一条smear 来,貌似不是好方法。

【在 s******s 的大作中提到】
: decrosslink吗?run gel不是问题,wb理论应该没有问题
b*****o
发帖数: 150
5
decrosslink by heating at 60C for 30mim

【在 m******5 的大作中提到】
: anyone here have experience doing westernblot by extracting formadehyde
: cross linked sample?
: my target protein is labled by HA-Tag(knocked in into the original loci
: expression the same protein)

s******y
发帖数: 28562
6
有没有更好的方法?比方说加个啥啥啥让那个键破掉什么的。
光是加热的话经常不彻底,有时候拖带太厉害,很难看。

【在 b*****o 的大作中提到】
: decrosslink by heating at 60C for 30mim
m******5
发帖数: 1383
7
我也正悲催地看着 长长的smear 发愁呢。。。

【在 s******y 的大作中提到】
: 怎么个decrosslink 啊? 我以前试过,如果只是长时间煮的话,
: 上胶后基本上都是跑出一条smear 来,貌似不是好方法。

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