X******n 发帖数: 914 | |
R*****o 发帖数: 14902 | |
b********i 发帖数: 73 | |
X******n 发帖数: 914 | 4 记得这篇文章刚出来的时候,就有一篇PNAS的文章质疑其结果。 |
z********i 发帖数: 610 | |
s******y 发帖数: 28562 | 6 好狠啊,那不是直接打脸么?
呵呵呵
【在 z********i 的大作中提到】 : junjie chen怎么什么都做,不专攻DNA repair了? : NEDD4成negative control了
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w******y 发帖数: 8040 | 7 PPP Lab结果的不可重复性程度是不是已经和M Karin差不多了?
【在 b********i 的大作中提到】 : 3P had a similar Cell paper about NEDD4 at the same time.
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z********i 发帖数: 610 | 8 怎么没有人讨论这篇文章了?
看了一下这几篇文章,很有可能NEDD4不是PTEN的E3,但是那篇CELL paper的方法和数
据又没有什么问题?jiang是从xiaodong wang实验室出来的,他从in vitro assay的建立
,到寻找组分的方法,和 xiaodong wang的一摸一样,但是为什么最后找到的蛋白为什
么不对呢?我感觉是in vitro assay的问题,虽然E3有很好的substrate specifictiy
,但是overexpressed 或者是in vitro assay的时候就不是这样了,过表达的情况下就
没有底物特异性了,所以在他们的assay 中能看到PTEN ubiquitination.后面可能选择
了符合预期的实验结果。一些相互作用和WB,多做几次总能出现一次想要的。junjie
chen的文章提到nedd4和pten没有相互作用,可以解释为实验条件不一样,比如 buffer
的离子强度。
我也是做生化的,对一些生化的结果总是很困惑。比如做个screening,曾经做过
kinase and phosphatase,发现一些kinase/phosphotase几乎能作用于所有的底物,在
这样的screening基础上接着做难免会出问题。overexpress in vitro效果很明显,但
是KD 就没有什么作用。
【在 X******n 的大作中提到】 : 记得这篇文章刚出来的时候,就有一篇PNAS的文章质疑其结果。
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