e********r
发帖数: 147 | 1 用甲醛-MOPS变性琼脂糖胶跑细菌总RNA电泳，发现样品完全降解。做实验逐一排除，发
现MOPS缓冲液，去离子甲酰胺和总RNA分别混合后65度处理都没问题，而只要把甲醛和
RNA混合后就会降解。奇怪的是，换了几瓶甲醛都是这个结果，而别人的总RNA用同样的
甲醛没问题，极为郁闷，难道我们的总RNA和甲醛不对付？RP不够？
各位说说看这该如何是好？ |
a***e
发帖数: 1010 | 2 run other lab's sample side by side with your sample.
then use their protocol. |
a***y
发帖数: 19743 | 3 好可怜
前些天我提RNA在普通TBE琼脂糖胶上跑都不降解。
不过我没经验所以不能给你建议了。
【在 e********r 的大作中提到】
: 用甲醛-MOPS变性琼脂糖胶跑细菌总RNA电泳，发现样品完全降解。做实验逐一排除，发
: 现MOPS缓冲液，去离子甲酰胺和总RNA分别混合后65度处理都没问题，而只要把甲醛和
: RNA混合后就会降解。奇怪的是，换了几瓶甲醛都是这个结果，而别人的总RNA用同样的
: 甲醛没问题，极为郁闷，难道我们的总RNA和甲醛不对付？RP不够？
: 各位说说看这该如何是好？
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e********r
发帖数: 147 | 4 很郁闷，因为以前都没出过这种事，难道这一批Trizol有点问题？ |
t******t
发帖数: 1123 | 5 Note: sometimes the smear signal is not due to degradation of RNA, instead
due to genomic DNA in the samples (which occurs above the rRNAs bands). It
causes a lot of trouble for the following assays. And it also makes the
results look like degradation.
It may not be your case. Just a reminder. |
f****e
发帖数: 184 | 6 Check your loading buffer, this is the most common problem. |
