p*****9 发帖数: 32 | 1 本人想用nocodazole treat NIH3T3 cell 看G2/M phase arrest. 请问用100ng/ml
treat 20 hour 后细胞形态应该是什麽样的呢? G2/M phase 的细胞都应该是圆圆的吗
,好象还比较小。
以前没用过nocodazole, 请用过的人指点一二。多谢 | y***i 发帖数: 11639 | 2 是,一吹打就能洗下来。
【在 p*****9 的大作中提到】 : 本人想用nocodazole treat NIH3T3 cell 看G2/M phase arrest. 请问用100ng/ml : treat 20 hour 后细胞形态应该是什麽样的呢? G2/M phase 的细胞都应该是圆圆的吗 : ,好象还比较小。 : 以前没用过nocodazole, 请用过的人指点一二。多谢
| p*****9 发帖数: 32 | 3 请问Nocodazole treat 后 多少percentage 的细胞会变圆, arrest 到G2/M? 是 100%,
或是大多数的细胞吗? 我做只有10-20% 细胞变圆, 感觉不太对头呀.
多谢了. | p*****9 发帖数: 32 | | F******p 发帖数: 2099 | | y***i 发帖数: 11639 | 6 google Nocodazole synchronization
必须用 Thymidine-Nocodazole double treatment。而且之前必须从让cell不断的分
裂几次,让cell处在活跃的proliferation 状态才行。结果好坏部分靠运气。最好能到
7~80%。
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【在 p*****9 的大作中提到】 : 请问Nocodazole treat 后 多少percentage 的细胞会变圆, arrest 到G2/M? 是 100%, : 或是大多数的细胞吗? 我做只有10-20% 细胞变圆, 感觉不太对头呀. : 多谢了.
| p*****9 发帖数: 32 | 7 多谢高人指点, 请问在 double thymidine treat 前, 一般plate 多少cell density
比较合适? 自己觉得不能plate 太高的density, 20% 左右(double thymidine
treatment 开始时) 合适吗? | l******g 发帖数: 83 | 8 3T3 用Nocodazole synchronization 的效果是不太好,我以前做的时候,几个cell
line, 3T3 treat后变圆的比例最少。用在Hela 还有293 上效果很好。
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【在 p*****9 的大作中提到】 : 请问Nocodazole treat 后 多少percentage 的细胞会变圆, arrest 到G2/M? 是 100%, : 或是大多数的细胞吗? 我做只有10-20% 细胞变圆, 感觉不太对头呀. : 多谢了.
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