l*****e
发帖数: 676 | 1 做实验要用到GE microCT scanner，最近才做了几次实验，在4/24, 5/2,5/10都做了，
大概是７０ｋＶ，４０ｍＡ，７min/scan，4/24 做了1-2h, 5/2 和5/10做了大概３０
ｍｉｎ，当时不知道怀上了，5/12在家测出阳性，然后也在医院确定了，很担心这个x-
ray会有影响，尤其是在刚怀上时，正是细胞分裂的时候，虽然那个scanner有
shielding layer，还是很担心. 大家有没有类似经历，或者知道这个影响大不大啊？
将来产检能查出来吗？
谢谢！！！ |
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d*b
发帖数: 4184 | 2 【 以下文字转载自 GayStudy 俱乐部 】
发信人: dcb (红小将大赤包), 信区: GayStudy
标 题: [大庆]艾滋病感染人群70%是男同性恋者
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jul 25 19:56:23 2014, 美东)
2014年7月21日08:34大庆网 2 条评论
7月17日，记者在市疾控中心了解到，今年上半年，大庆新增HIV(艾滋病)感染者/
病人共68例，均为性接触所致，其中3人已经死亡。
性传播成主要途径
上半年，按照现住址报告，大庆市新增HIV感染者/病人共68例，比去年同期的28例
上升142.86%，其中HIV感染者52例，病人16例，和2013年全年发现的73例几乎持平。
市疾控中心艾滋病防治科科长唐煜辉介绍，艾滋病的传播途径主要有性接触传播、
血液传播、母婴传播、共用针具传播等几种传播方式。
今年发现的均为性接触所致，其中同性传播57例，异性传播11例。从样本来源看，
44例来自咨询检测，13例来自术前检查，其他来源11例。从年龄结构看，20-55岁64例
，超过全部感染者的90%。
唐煜辉说，大庆市艾滋病感染人群70%是男同... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 3 想成立一家技术服务+研发的公司，早期以技术服务为主，在有利润充分保障的情况下
，再考虑向 研发倾斜。
就我自己能力而言，我在质料克隆，基因表达细胞株的建立和某些方面的生物信息学方
面有所专长。
在基因的亚克隆方面（就是把一个基因从一个质粒载体转到客户指定的另一个质粒中）
，我有独门技巧，可以节省不少耗材和时间。亚克隆一个<1kb和5kb基因的质粒的平均
周期分别为3天和10天， 试剂耗材成本平均分别为$15和$80左右。 对于<2kb基因的质
粒亚克隆，以我的方法，一般只要挑选3个克隆即可以得到至少一个阳性质粒克隆，所
以我估计每三天我可以完成至少20个基因以上的亚克隆。我的问题是， 基因亚克隆这
方面市场大不大？
现在市面上的克隆服务多是基因的直接克隆，即用PCR方法将获取的基因插入到公司或
客户指定的质粒中。收费都在$250以上（对<1kb基因而言， 5kb基因大概要上千元）。
这方面我并没有特别的技巧，和那些公司比没有竞争优势。而且基因碱基的多态性太
普遍，PCR克隆到的基因蛋白编码序列不一定会是客户所想要的。暂时无意开展这种类
型的克隆服务。
在基因表达细胞株的筛选与建立方面，... 阅读全帖 |
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i***i
发帖数: 1632 | 4 以生殖器大小测量运动员的运动潜力，不仅在足球领域，在其他领域也存在。苟博士告
诉记者， “我们国内有的田径教练很迷信这一套，他们认为小孩的生殖器大，肌肉的
爆发力就强。但至今国内外的研究都没有证实这一点。况且有些运动，比如体操和跳水
，生殖器过大反而不利于做动作。”
苟博士说，睾酮激素也并非越多越好，“过高和过低，都会对人体的健康造成损害，即
使从事竞技运动的选手也不例外。现在的运动医学已经很发达，如果有的运动员睾酮激
素过低的话，完全可以通过营养液补充。也就是说，即使运动员的生殖器不大，也不是
问题。”
说到底，从事任何运动都是在考验运动员的综合能力，一名从事田径运动的专家告诉记
者：“比如刘翔，作为黄种人，他的睾酮激素肯定不如罗伯斯等黑人选手，但刘翔在巅
峰时期跑得一点也不比他们慢。虽然刘翔绝对爆发力可能不足，但他的跨栏技术好，速
度损失最少，而且他的匀加速能力世界第一，也就是后程加速能力强，而这又与他强大
的心肺功能相关。因而，即使从事田径运动，依靠生殖器选才也是不靠谱的。”
河南省中医院中西医结合生殖中心孙教授认为：“这样来选拔足球苗子，是很有道理的
。生殖器短而粗、阴囊紧绷的... 阅读全帖 |
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d********f
发帖数: 43471 | 5 你做餐馆还兼职做医生？
流行病学研究表明幽门螺杆菌感染了世界范围内一半以上的人口，其发病率各个国家不
同，甚至同一国家的各个地区也不相同。目前已知发病率的高低与社会经济水平，人口
密集程度，公共卫生条件以及水源供应有较密切的关系。也有报道指出，幽门螺杆菌的
感染有明显的季节分布特征，以7～8月份为高峰。在亚洲地区，中国内地、中国香港、
越南、印度等少年幽门螺杆菌的感染率分别60%、50%、40%、70%。慢性胃炎患者的胃粘
膜活检标本中幽门螺杆菌检出率可达80%～90%，而消化性溃疡患者更高，可达95%以上
，甚至接近100%。胃癌由于局部上皮细胞已发生异化，因此检出率高低报道不一。在自
然人群中初出生的新生儿血清中抗幽门螺杆菌-IgG水平很高，接近成人水平，可能从母
体获得被动免疫抗体之故。半年后迅速下降。在我国及大多数发展中国家中阳性率待降至
幽门螺杆菌
10%～20%后又迅速回升。大约在10岁以后即迅速上升达到或接近成人阳性检出率水平。
我国及大多数发展中国家人群幽门螺杆菌感染因地区有所不同。低达20%，高达90%，人
群中总感染率高于发达国家。这些基本资料说明了如下几个问题... 阅读全帖 |
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g********0
发帖数: 15010 | 6 莱姆病
莱姆病或莱姆疏螺旋体病是一种传染性的蜱媒病，由伯氏疏螺旋體 (一种革蘭氏陰性菌
微生物)，导致的疾病。
因为这种病被公认是在1975年10月，在康乃狄克州的老莱姆镇,莱姆镇和东哈丹姆附近
地区首次发现而得名。这种病是由于被感染的蜱叮咬而传染的。1982年，美国国家卫生
总局的威利·伯格多费（Willy Burgdorfer）和同事从丹敏硬蜱（Ixodes dammini）分
离到莱姆病病原体。
莱姆病是一种地区性、全身性、慢性为症性蜱媒螺旋体病。早期以皮肤慢性游走性红斑
为特点，以后出现神经、心脏或关节病变，通常在夏季和早秋發病，可发生于任何年龄
，男性略多于女性。
病因
由蜱传播的Burgdorferi疏螺旋体为病原体。
[编辑] 病理
1、红斑表玻全层血管周围和间质中有淋巴细胞、浆细胞或嗜酸性白细胞浸润，表皮及
真皮乳头水肿。
2、关节受累时的滑膜改变与类风湿性关节炎相似。
[编辑] 病徵
1、皮肤病变：常为首发症状，特征性表现为慢性游走性红斑，初起为红色斑疹或丘疹
，逐渐扩大成环殂损害。一般出现在蜱叮咬后3—32天，好发于躯干、大腿、腹股沟，
、腋下等处。
2、神经系统病... 阅读全帖 |
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f*******2
发帖数: 239 | 7 贴一个我很久以前收集的精油信息吧，希望对mms有用
第三章50种推荐精油
经过长期的开发，到目前为止，芳香疗法所运用的有用植物精油众目何止百种，在这里
只常见、常用以及容易买到的50种精油。
而单一精油的介绍与知识，也可以让运用者更能自由地调配复方精油。
佛手柑
学名：柑橘属Citrus bergamia 科名：芸香科Rutaceae
概说：它是柑橘属，但是不能食用；也是柑橘属中最矮小的一种，约5米高，黄绿色的
果实很小、呈梨形，且表皮凹凸不平，是萃取精油的来源，叶子狭长、开白色的小花。
它是意大利的物产，因为土壤跟气候的关系，在其他地方很少见、也不易生长，所以纯
精油价格并不便宜。除非是以未成熟就掉落的佛手柑果皮蒸馏的精油来替代，但精油效
果并不好，最好的精油还是要以成熟的果皮压榨取得。
精油档案
萃取：压榨果皮而得精油，最高等的佛手柑精油是以手工的方法压榨。
特质：清新淡雅，类似橙和柠檬，略带花香，是香水中最常使用的精油之一。它融合了
果香与花蚝的丰富气味，是香水制造者的最爱。
挥发性：快板
主要成分：芫荽酯、香柑油脂、柠檬烯、松油醇、芫荽醇
属性：阳
主产地：意大利、摩洛哥
... 阅读全帖 |
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p*****e
发帖数: 16417 | 8 刚刚在新浪看到的，原文如下：
化妆品行业近日再次陷入 “致病”风波，又一种致癌物质——邻苯二甲酸酯(PAEs)被曝
光在大众面前。
据北京市疾病预防控制中心调查报告中的数据显示，在此次抽查的国内个人洗护用
品、化妆品及香水等产品中均有相当比例的产品被检出含有一种叫邻苯二甲酸酯的物质
，其中有关香水含该物质的阳性检出率甚至高达92.3%。
报告作者北京市疾病预防控制中心李洁向本报记者介绍，“过多使用含邻苯二甲酸
酯的化妆品，会对人体造成危害。因为邻苯二甲酸酯是危害人类生殖能力的环境激素，
经过动物实验证实为危害人体肝脏与肾脏的有害化学物质。”
部分化妆品曝出有害成分
北京市疾病预防控制中心的《关于化妆品中检出邻苯二甲酸酯情况报告》显示，在
此次针对各类化妆品的“邻苯二甲酸酯大考”中，共有12种香水样品被检出含该成分，
检出率达92.3%，护肤类与洗涤护发类化妆品的检出率则分别为47.1%和30.0%。值得注意
的是，在儿童护肤类化妆品中亦有两件样品分别被检出邻苯二甲酸酯DEP和邻苯二甲酸酯
DEHP。
在塑料包装和化妆品生产中被广泛应用的邻苯二甲酸酯在国外已屡被质疑，矛头直
指其可能对人... 阅读全帖 |
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j******n
发帖数: 21641 | 9 作者：张功耀
我们中国人是很会自欺欺人的。许多我们中国出产，并不那么值钱的东西，
经我们中国某些“著名的科学家”“伟大的文化人”一吹捧和炒作，便可使乌鸡
变成白凤凰，屎壳郎变成宾利车。
冬虫夏草原本是生活在高寒山区的一类“线形虫草菌”（Ophiocordyceps）
寄生在某些昆虫的尸体上，并依靠吸收这些尸体当中的营养生长起来的一种子囊
菌。冬天，这些昆虫在土壤中冬眠。一旦它们感染了某些线形虫草菌（这样的真
菌有800来种），到了气温适宜的夏天，就会长出像草一样的子囊菌来。这便是
被我们中国人吹得神乎其神的“冬虫夏草”（Ophiocordyceps sinensis）。19
世纪的欧洲人把这种东西叫做“中国棒子”（Sphaeria sinensis）。
到目前为止，还没有发现冬虫夏草有任何营养价值。冬虫夏草的药用价值只
有提高动物的ATP（一种通过细胞的代谢过程生成的高能化合物）产量，增加动
物的耐力,在小鼠实验和人体观察中得到了证实。需要增加耐力的体育运动员，
在服用冬虫夏草之后，可明显增加运动员的耐力，而不会被检测出违禁品阳性。
但是，接受这种“植物兴奋剂”对人体的利弊如何，至今没... 阅读全帖 |
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m**c
发帖数: 7299 | 10 【 以下文字转载自 Gay_Pathology_and_Therapy 俱乐部 】
发信人: msgc (为了下一代免遭变态残害), 信区: Gay_Pathology_and_Therapy
标 题: 走近男同性恋群体：艾滋感染率仅次于吸毒人群
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 8 12:37:21 2013, 美东)
新闻调查8月8日播出节目《以生命的名义》，以下为节目内容。
演播室:
在目前的中国,艾滋病处于由高危人群向普通人群扩散的阶段,在严酷的现实面前，
以科学务实的态度来对待高危人群并且对他们进行预防艾滋的有效干预，这是中国政府
的理性
选择。今天的《新闻调查》将带您走进一个特殊的群体。
黑场：调频收音机调台的声音，交叠不同频道，切换，直至出现：“中国官方首次
向世界公布有关男性同性恋人数及艾滋病感染的数据”，切换，又调回，声音逐渐清晰
，出原新闻画面：【中国政府卫生部门进行的一项最新研究调查显示，处于性活跃期的
中国男性同性恋者，约占性活跃期男性大众人群的2%至4%，按此估算，中国有500万至
1000万男性同性恋者。而根据卫生部去年底公布的数字，中国男... 阅读全帖 |
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d*b
发帖数: 4184 | 11 【 以下文字转载自 GayStudy 俱乐部 】
发信人: dcb (红小将大赤包), 信区: GayStudy
标 题: [大庆]艾滋病感染人群70%是男同性恋者
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jul 25 19:56:23 2014, 美东)
2014年7月21日08:34大庆网 2 条评论
7月17日，记者在市疾控中心了解到，今年上半年，大庆新增HIV(艾滋病)感染者/
病人共68例，均为性接触所致，其中3人已经死亡。
性传播成主要途径
上半年，按照现住址报告，大庆市新增HIV感染者/病人共68例，比去年同期的28例
上升142.86%，其中HIV感染者52例，病人16例，和2013年全年发现的73例几乎持平。
市疾控中心艾滋病防治科科长唐煜辉介绍，艾滋病的传播途径主要有性接触传播、
血液传播、母婴传播、共用针具传播等几种传播方式。
今年发现的均为性接触所致，其中同性传播57例，异性传播11例。从样本来源看，
44例来自咨询检测，13例来自术前检查，其他来源11例。从年龄结构看，20-55岁64例
，超过全部感染者的90%。
唐煜辉说，大庆市艾滋病感染人群70%是男同... 阅读全帖 |
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l*****i
发帖数: 51 | 12 http://www.popyard.com/cgi-mod/newspage.cgi?num=912932&r=0&v=0&
女人内裤上的12个小秘密你知道多少呢？下面我们一起来看看这些秘密是不是隐藏着身
体的健康问题。
内裤上的究竟从哪里流出来的呢 内裤上的究竟从哪里流出来的呢
1、“究竟从哪里流出来的呢？”
一部分是由子宫颈腺体分泌的，一部分来自阴道壁，还有很少一部分是由子宫内膜
腺体和阴道口两旁的大腺体分泌的。
2、“到底是些什么东西呀？”
有一些从阴道黏膜上脱落下来的上皮细胞、小阴唇皮脂腺的分泌物、大量阴道杆菌
(学名叫革兰氏阳性嗜乳酸杆菌)、还有少量白细胞……大概有二十多种微生物。
3、“我不喜欢这东西的样子，也不喜欢它的气味，能消除吗？”
不能，因为每个女人都需要它。阴道腔内的酸性环境能阻止外来病菌，不能生存和
繁殖。这就是你听得耳朵都听出茧子也不见得真正明白的“阴道自净作用”。
内裤上有分泌物是自然生理现象 内裤上有分泌物是自然生理现象
....... |
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H********g
发帖数: 43926 | 13 看样子也有聪明人，已经有用蚕做的虫草了
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什么是蚕虫草？
冬虫夏草 | 全部 [收藏]
推荐阅读：虫草曾经是康熙皇帝的赐品
蚕虫草也称桑蚕虫草或家蚕虫草，是用野生天然蛹虫草（cordyceps
militaris）菌株孢子接种到活体桑蚕上人工培育而成的虫菌结合体。我公司生产的蚕
虫草以家蚕（桑蚕）为宿主，人工接种蛹虫草菌，模拟蛹虫草自然生态环境，人工培育
获得成功。从接种到子实体的成熟约 35-45 天。毒性试验表明蚕虫草属基本无毒级，
无致畸、致突变阳性作用，对小鼠骨髓细胞微核出现率无影响。药理试验表明在抗缺氧
、镇静、消炎等方面蚕虫草类似于冬虫夏草，而在抗肿瘤、降血糖方面则优于冬虫夏草。
桑蚕蛹虫草（家蚕蛹虫草）经分析检测证明：所含虫草素、甘露醇、sod 等超
过桑蚕蛹虫草、天然冬虫夏草、北虫草和榨蚕虫草。它的服用效果也远远超过北虫草、
榨蚕虫草，是一种有效成份含量最高、效果最好，真证能与野生冬虫夏草相媲美的虫草。
延伸 |
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d********f
发帖数: 43471 | 14 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: nyimmune (加油), 信区: Biology
标 题: 我被怀疑造假的经历
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Aug 2 21:56:42 2016, 美东)
我自己的经历，被怀疑造假也没什么，不需要什么第三方权威人士验证，把怀疑最厉害
的人说服了就可以的。
前几年离开原来实验室做公司去了，留下一篇基本写好的manuscript，老板让接手的烙
印博后小兄弟做个co first author补点数据准备投个大文章。没想到接手的小兄弟不
好好补数据却去检验我做好的部分，过了些日子老板抱怨我的数据不可重复，因为跟老
板本来关系特别好像朋友一样，如果造假就像坑朋友的饭碗当然是特别严重的。所以特
别安排了一个礼拜的时间回到原来的城市，看看小兄弟究竟有什么实验操作问题，全程
烙印动手我就看看加动嘴皮子。
其中一个实验是endogenous co-IP，烙印说是对照的抗体也有pull-down和阳性的差不
多，而我的数据里面对照是干净的。抗体beads结合完了以后需要清洗，我看烙印把离
心机设定到8000rpm3min，当... 阅读全帖 |
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p*e
发帖数: 6785 | 15 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: desesperado (desesperada), 信区: Military
标 题: 韩春雨：谁重复出了实验，我暂不方便透露
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Oct 11 15:50:21 2016, 美东)
http://news.qq.com/a/20161011/046899.htm
10日晚上，来自中国科学院、北京大学、浙江大学、上海交通大学、华东师范大学、哈
尔滨工业大学、温州医科大学等科研院所的13位课题组负责人实名公开表示，无法重复
韩春雨今年5月2日发表在《自然-生物技术》上有关NgAgo的实验，让几个月来广受关注
的韩春雨事件再添波澜。
11日，身处舆论中心的河北科技大学副教授韩春雨再次接受科技日报采访，并对此作出
回应。对于13个科研人员实名公布无法重复实验，他依然认为细胞污染的可能性最大。
至于谁重复出了实验，他暂不方便透露。“请求大家再有一点耐心。我还是之前的说法
，很快将会有新的消息。”韩春雨说。
他表示，此前他也考虑过假阳性的可能，但目前来就他掌握的信息基本可以排除这种可
能。
他同时... 阅读全帖 |
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i*********n
发帖数: 610 | 16 【 以下文字转载自 SanFrancisco 讨论区 】
发信人: iceui (iceui), 信区: SanFrancisco
标 题: 挑选运动员, “小鸡鸡”形状很重要
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Oct 30 23:36:56 2010, 美东)
以生殖器大小测量运动员的运动潜力，不仅在足球领域，在其他领域也存在。苟博士告
诉记者， “我们国内有的田径教练很迷信这一套，他们认为小孩的生殖器大，肌肉的
爆发力就强。但至今国内外的研究都没有证实这一点。况且有些运动，比如体操和跳水
，生殖器过大反而不利于做动作。”
苟博士说，睾酮激素也并非越多越好，“过高和过低，都会对人体的健康造成损害，即
使从事竞技运动的选手也不例外。现在的运动医学已经很发达，如果有的运动员睾酮激
素过低的话，完全可以通过营养液补充。也就是说，即使运动员的生殖器不大，也不是
问题。”
说到底，从事任何运动都是在考验运动员的综合能力，一名从事田径运动的专家告诉记
者：“比如刘翔，作为黄种人，他的睾酮激素肯定不如罗伯斯等黑人选手，但刘翔在巅
峰时期跑得一点也不比他们慢。虽然刘翔绝对爆发力可能不足，但他... 阅读全帖 |
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d*b
发帖数: 4184 | 17 【 以下文字转载自 GayStudy 俱乐部 】
发信人: dcb (红小将大赤包), 信区: GayStudy
标 题: [大庆]艾滋病感染人群70%是男同性恋者
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jul 25 19:56:23 2014, 美东)
2014年7月21日08:34大庆网 2 条评论
7月17日，记者在市疾控中心了解到，今年上半年，大庆新增HIV(艾滋病)感染者/
病人共68例，均为性接触所致，其中3人已经死亡。
性传播成主要途径
上半年，按照现住址报告，大庆市新增HIV感染者/病人共68例，比去年同期的28例
上升142.86%，其中HIV感染者52例，病人16例，和2013年全年发现的73例几乎持平。
市疾控中心艾滋病防治科科长唐煜辉介绍，艾滋病的传播途径主要有性接触传播、
血液传播、母婴传播、共用针具传播等几种传播方式。
今年发现的均为性接触所致，其中同性传播57例，异性传播11例。从样本来源看，
44例来自咨询检测，13例来自术前检查，其他来源11例。从年龄结构看，20-55岁64例
，超过全部感染者的90%。
唐煜辉说，大庆市艾滋病感染人群70%是男同... 阅读全帖 |
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Z*****l
发帖数: 14069 | 18 陈诗羽鄙视地看了一眼林涛。
“那这是什么？”我指着地面上像是足迹轮廓一样的痕迹问林涛。
林涛说：“这是没有花纹的足迹轮廓，我们穿着鞋套走进现场，踩到了血迹，再踩
回地面的话，都会留下这样的足迹。”
“你是说这是我们民警穿戴鞋套进入现场留下的足迹？”大宝问。
“是。”林涛顿了一下，接着说，“不过，如果凶手也穿着这样的鞋套，也会留下
这样的痕迹。”
陈诗羽忽然蹲下身，用手指蹭了一下尸体旁边地面上的血迹，说：“凶手应该就是
穿着鞋套进入现场的。”
“啊？”大宝吃了一惊，“陈羽毛你是怎么知道的？”
陈诗羽说：“你们看，旁边有几个类似的足迹应该是民警留下的，因为时间不长，
所以还没有完全干掉。而这几枚足迹，已经完全干掉了，说明足迹留下的时间很长。另
外，我叫陈诗羽，不叫陈羽毛，谢谢。”
一个大学生能做出这样的推断，确实让我有些刮目相看。我赞许地点了点头，表示
对她的论断予以支持。
“戴着橡胶手套，穿着鞋套进入现场杀人。”大宝说，“杀的还是精神病人。听上
去好像那部美剧，叫什么《嗜血法医》里的情节啊。”
“难道是美剧迷... 阅读全帖 |
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a******e
发帖数: 570 | 19 我做一个革兰氏阳性菌的microarray，用不同的天然产物（主要是高分子多酚类）处理
细菌，发现基因表达和对照组没有啥区别，连一个基因都没有选出来（P=0.05)，这个
看起来正常么？我怀疑高分子多酚不能渗透到细胞里所以不能影响其表达。希望经验多
的牛人给点意见。 |
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s********r
发帖数: 312 | 20 今天妈妈打电话来跟我说了这个事，她93年做手术时因为输血染上了丙肝，之后7，8年
后才发现，这么多年一直没进行什么治疗，只是定期做肝功能体检。这次检查结果有些
不太好，谷丙转氨酶倒是正常，HCV抗体阳性，病毒RNA PCR结果1*10(5)IU/ml,比正常
搞了100倍，肝脏其他方面情况目前都正常。
然后医生就建议干扰素加抗病毒药物治疗，我妈不知道又从哪听说个什么生物免疫治疗，说效果比那个传统疗法要好。我查了一下，说是法应用本身静脉血的淋巴细胞，在体外诱导，分化扩增成具有杀伤力的CTL细胞，再经静脉回输体内，杀死病毒。
不知道有哪位懂行的能给个建议，那种方法比较好呢，多谢了 |
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c******i
发帖数: 2427 | 21 我当年老板用了一个新方法来研究电生理。 被领域里的一个大牛压了整整两年不让发
在Science上。 理由就是重复不出来。 后来另外一个实验室一不小心重复出来了。 以
前重复不出来的原因就是动物细胞在显微镜下处理的一个微小环节， 30秒钟能解决的
事情却需要一个灵巧的手。 我老板以前是外科大夫， 这点事情对他来说小菜一碟。
但是对其他人来说困难重重（当时的条件）， 很多人大概就省略了这一步。
我想说的是， 重复不出来的原因有很多， 但是常见的一般都是：
1， 实验技术复杂， 需要特别小心；
2, 重复者太笨， 或者不上心；
3. 原作者的protocol和技术有所保留；
4, 原作者非故意地做出假阳性；
5. 故意作假； |
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s********r
发帖数: 312 | 22 肯定有这个情况，撇开PCR设计策略不说，有可能你的colony不纯，只有一部分是
targeted，PCR是阳性，southern就不一定了。因为你最后打进去的只是很少的细胞，
colony不纯就增大失败的概率了 |
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b******3
发帖数: 377 | 23 用磷酸缓冲液会造成代谢物的leakage。但是不洗却会造成对代谢物分析的干扰。谢谢
！ |
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b******3
发帖数: 377 | 25 那样还是会有污染啊，就是不想有培养基的信号出现。 |
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h**********r
发帖数: 671 | 26 做个新鲜培养基的
control
或者
配个不会造成leakage的
buffer |
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s********n
发帖数: 2939 | 27 一堆的buffer可以试，Tris, HEPES, etc. |
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w******w
发帖数: 32 | 28 在这个实验室呆了三年了，现在想起来真是悲催得。
第一年，就听说系里的人在议论，因为人品问题，他要搬家了。可怜的我还不明白发生
了何事。拿着他交到手里的课题，就是重复不出他以前的结果。阴性阳性都好好的，就
是他给的药物没活性。跟他说了，给了另一课题，好不容易找到个活性，他让我和实验
室另一个人合作，结果就是，每次开组会那个人都不回答相关进展，然后，半年后它自
己就那部分数据造了篇文章要发掉！该老板居然持默许态度，而从我手里拿去的样品也
变成老板给的。
第二年，他真的搬家了。我一样没有，只有跟着走。安置，大约就大半年过去了。终于
有机会做课题。自己想了个，他没有反对，当然也算不上支持。到如今，总算有了点数
据，写文章了，压在手里2个月了，还没有看看。也不放我投。第二部分的数据也采得
差不多的时候，晴天霹雳呵，他居然让那个无德的前合作者，换个猪的细胞来做。体系
，药品，思路都完全一样！
大家说说，他是啥意思？我找他谈了，他只是打太极。
我该怎么办？自己付出那么多心血的东西，真是不甘心啊 |
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e********s
发帖数: 93 | 29 看了他们网上自我介绍的内容，不知道有多少是自吹自擂的成分？
哪位熟悉这个领域的大虾能不能介绍一下这个东东的所谓原创性有多高？
国外类似的ADV抗癌基因治疗现在做到哪个程度？安全性的concern如何？
http://www.ship.gov.cn/index.asp?bianhao=9598
“深圳市天达康基因工程有限公司”是一家在深圳市高新区设立的留学生企业暨民营
科技企业，成立于2001年，注册资本1000万元人民币。“重组腺病毒-胸苷激酶基因制
剂”（缩写：ADV-TK），为本公司运用独有的药物发明专利，研制成功的一种目前世界
上新一代的、具有自主知识产权的基因治疗抗肿瘤新药。
ADV-TK 以5型重组腺病毒为载体，属于肿瘤自杀基因治疗的范畴，为目前肿瘤基因治疗
领域研发的主要抗肿瘤药物品种之一，获得2002年国家“十五”重大科技专项“创新药
物品种研究”第一批课题资助。
ADV-TK 通过对人体肿瘤特别是局部实体瘤进行转染，在更昔洛韦的参与下，产生“自
杀效应”和“旁观者效应”，能针对特异性杀灭肿瘤细胞，具有明确、高效的抗肿瘤活
性，且安全性好，临床应用方便，可用于治疗肝癌、肺... 阅读全帖 |
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d****i
发帖数: 2346 | 30 不知道有什么窍门，内参和目的蛋白的total做得出，但是磷酸化做不出.sample用的是
阳性对照的drug刺激细胞后的lysate。
请做过的同学教几招。谢谢！ |
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b******n
发帖数: 4225 | 31 1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区
的实验者而言，感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗
体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），
而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的 价最贵；比较有性价比的是CST的
抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没
有失过手，100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验，还有一个优点是
通常量比100微升多出来10微升，唯一的不足是CST的品种实在不多。Santa的多克隆抗
体质量可以，但是选用 Santa的单抗还是有风险，估计这也是业界共识了吧。
进口抗体国内分装包装我也用过不少，呵呵，毕竟是穷人（420元/100微升），大概好
抗体的比例约为50%，如果能做出来，也存在一个问题，就是... 阅读全帖 |
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p********e
发帖数: 61 | 32 WB抗体最重要，其他都次要。话又说回来，在哪儿抗体不重要呢？ELISA, IP, Flow,
IHC, ChIP, ChIP-seq, Fluorescence Microscopy.......如果抗体好，手笨点，硬件
差点，都是能做出来的。如果抗体不行，上帝他老人家来了也没辙。
其实生物男很多时间都花在尝试不同的抗体，求老板买更多抗体，以及向抗体公司投诉
上了。
可是如何选抗体呢？哥根据自己的经验体会，给大家提点建议。
在美国有300多家卖抗体的公司，全世界范围就更多了。可是我们常接触的就那么几家
。我把他们分成两类："包罗万象型"和"少而精型"。
最著名的“包罗万象型”公司有三家：AbCam, Sigma和Santa Cruz。这三位的产品也太
全了，无论你需要什么抗体，他们都有。至于是否能用，那就再说了。 我个人的经验
是：能用率大约有20％。 所以我很奇怪楼主会觉得AbCam抗体质量好。这三位大哥中
SantaCruz还算好点，毕竟便宜得多，给的量又足。万一赶上你走运遇到一支好的抗体
，够你用到当正教授了。
据我所知，AbCam和Sigma都不生产抗体，所有抗体都是来自OEM... 阅读全帖 |
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i****g
发帖数: 3896 | 33 写得比较有意思，但是不太实用，可能实验条件相差太大。precast gel比自己制的gel
效果要好很多，结果也容易重复。antibody要看运气的，呵呵。
1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区
的实验者而言，感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗
体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），
而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的 价最贵；比较有性价比的是CST的
抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没
有失过手，100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验，还有一个优点是
通常量比100微升多出来10微升，唯一的不足是CST的品种实在不多。Santa的多克隆抗
体质量可以，但是选用 Santa的单抗还是有风险，估计这... 阅读全帖 |
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G********e
发帖数: 528 | 35 我觉得你做的tissue ChIP比我做的是相当高级了，没有直接的经验，不过有一些擦边
的想法
Most likely，你已经指出来实验的问题了，在第三点
你用polii可以拉下来很多，但是这个抗体不行
说明你的ChIP过程是work的，至少对好的抗体来讲。
还有一个问题是信号强度的问题，有可能却是是这个TF在体内信号很低
是否可以考虑同时做个对照，拿已知的可以有很强binding的system
比如说体外培养的细胞，大家公认这个TF在某个promoter有很强的binding
拿着个来作为positive control
如果阳性对照出来了，这个tissue的还做不出来，那有可能却是没有cell culture那么
强的binding，或许体内和体外就是不一样。
有没有试过qPCR来定量分析？
如果你的polii用的是mouse igG2a的8wg16，我觉得它是一个非常好的抗体
在TATA和基因外区域，有些时候可以得到好几百倍的信号差异
所以我觉得qPCR可能会有帮助提高resolution
你的IgGChIP是什么IgG，是否和HA的抗体是同类，还是和PolII同类？
如果不是同... 阅读全帖 |
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b******s
发帖数: 5365 | 36 老板想叫我接着实验室里一个学生做的课题，但听说她做的这个蛋白只能从一个方向被
pulldown，换了bait和pray后就不行。我想知道除了假阳性外可能有其他什么原因吗？
能做的是膜蛋白把细胞内蛋白IP下来，相反就不行-----会不会是lysis buffer不能很
好地分离膜蛋白的问题？但是这个蛋白只有一个transmembrane domain，按理应该不成
问题的啊。 |
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i*******n
发帖数: 48 | 37 姑且定义bait是membrane protein A， Prey是cytosol protein B
多种可能性
1.假阳性
2.细胞内蛋白B比较abundant,而膜蛋白A比较少。
如果是这种情况，跑western的时候减少input的量，增加IP的量，也许能看到。
3.prey蛋白B抗体识别的antigen region可能是bait A的binding region，导致你用
B的抗体IP下来的只能是不结合A的那部分。
如果是这种情况，给B加个tag或者换个抗体试一试。 |
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b****r
发帖数: 17995 | 38 关于将来提高cancer治愈率的一个粗略想法 我是做遗传的，对癌症治疗只有少量涉猎
。但是据我所知最近10多年来对肿瘤的治疗进步比较缓慢。现在Next Gen Seq技术成几
何速度地发展，但是究竟应该如何将这个技术应用于医学领域，似乎也并不太清晰。我
觉得癌症会是一个最靠近的突破口。以我的了解，肿瘤有几大遗传相关的特征：
1.目前普遍认为肿瘤实际上是一种体细胞遗传疾病，DNA的改变是肿瘤发病的最关键因
素。
2.肿瘤相关的突变数量极多。不光如此，同一个体体内的肿瘤还呈现多克隆化，并且新
突变不断产生，有些与致病能力相关，但大部分并没有什么关系。
3.根据每个肿瘤独特的生物学特性针对性用药，是未来肿瘤治疗发展的一个基本方向。
gefitinib对于治疗EGFR阳性肺腺癌的迅速推广就是一个绝佳的例子
以上因素使得肿瘤遗传学成为一个非常有潜力，但是 又非常棘手的方向。目前的遗传
学技术和成本使得找到真正致病突变的可能性还很低。但是现在NGS的发展速度，就我
最近听到的一个seminar，甚至超过了摩尔速度。所以我推测，在接下来3，5年内，应
该会有这样的超大project出现：由全国性/... 阅读全帖 |
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s*******7
发帖数: 399 | 39 这贴子成了电生理的辩论贴了，哈哈。
其实2位的看法都不错，只是角度不一样，于是就有了争论。
比如 kdfox11 提到: 而现实当中的离子电流是这样的：1，voltage-sensor 感应细胞
膜的电荷被charge->2，voltage-sensor形变->3，离子通道形变，能够让离子通过的
pore打开->4，自由离子移动。
我猜测kdfox11想表达的意思是VSD（voltage-sending domain）的S4在gating过程中的
不同开关状态，对于同一VSD亚基，这些多种状态（比如close的C1，C2，C3，到最后的
Open的O），和S4的阳性电荷数（也就是氨基酸R，有些通道还包括K）有关。与此同时
，每个亚基经历的状态也不全同，只有当4个亚基全部处于O，即open状态，通道才会让
离子流通过。整个过程非常复杂，这部分建模的工作，很多牛牛们都有贡献，俺对
Aldrich的工作印象较深刻。
VSD是电压依赖性离子通道（VGIC）的研究热点，也是最受争论的地方，不像VGIC的其
他方向，比如aardlbx 提到的gating currents （主要工作来自Armst... 阅读全帖 |
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P****D
发帖数: 11146 | 40 http://www.guokr.com/post/419081/
谦谦菌子温润如玉……之，再整理版………………#松鼠爱段子#
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游识猷 科学松鼠会网站主编，遗传... ψ
2012-12-28 13:39:16
一切从这个传说中的培养皿开始——
我生菌未生，菌生我已老。
我恨菌生迟，菌恨我起早。
我生菌未生，菌生我已老。
恨不生同时，日日与菌好。
我生菌未生，菌生我已老。
化蝶去寻菌，别忘去过早。
------然后大家纷纷回忆起了那些年一起养过的菌……------
我要得不咯： 一看就是湖北的菌主啊~
糖糖糖霜： 我生菌未生，菌生我已老，紫外灯下照，菌隔我海角。
彭瑞宝 :几度温控成，菌看不言好。妾身重学分，菌意轻偕老。
双鱼座的喵喵： 风雨如晦，鸡鸣不已。既见菌子，云胡不喜
商大庆： 菌生别高兴，没准假阳性。。。
Neverland树树： 与菌离别意，同是宦游人
JiangWang_wjs：接起……相见亦无事，不见常思菌……
duyuguang： .......世上安得双全法，不负如来不如菌....
花良幺的毛卷云： 山回路转不见... 阅读全帖 |
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l***g
发帖数: 19 | 41 没用过这个载体的病毒质粒，不是很清楚。为啥目的基因和GFP之间要有IRES连着，GFP
不能和目的基因直接融合吗？一般IRES和筛选基因连着比较有用吧。如果你的GFP阳性
率偏低并且表达量不高的话，可以试着病毒感染后再挑选单克隆细胞，挑那种表达量高
的。 |
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f*********0
发帖数: 861 | 42 我以前做的Rosa26细胞也是这样.这个东西有自发的翻转或删除.而且表达率还不低,拿
第一代都那样.所以我对科学真得失去了兴致,某些新的发现,其实都是假阳性导致的,可
笑的是一班"科学巨头"发表后,徒子徒生们就不得不从各个方面进行cover. |
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H*******i
发帖数: 196 | 43 LZ你这么笼统的问，有问题的可能性多了去了，你应该详细写出你的步骤（包括片段
酶 载体 这些细节），现象
比如你上面提到转质粒能长，长了多少？ 效率是10^8还是10^9/ug
没有克隆是怎样没有，长出来很多都是假阳性/空载体还是什么都不长
这些你都不写谁知道啥问题啊，都只能猜，有多少步骤就能猜多少可能性出来。
另外1.5K很好连，尽管我不做TA克隆，不过3-5K的片段正常连接我也没遇到过什么大问题
你提到500做出来了，长了多少？阳性率怎么样？至少提一下吧。
要么你就用上面提到的不用酶切连接的几种策略，拿到引物后第二天晚上/第三天早晨
也足够拿到克隆了。你怕操作不熟练就用上面有人提到的infusion kit这种商业化试剂
盒也可以。这个理论上只要你的PCR没问题，转化没问题（包括你的片段载体构建不会
杀死细胞）就能做出来。 |
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W*V
发帖数: 13 | 44 我周一作了四个TRIP-LIGATION 克隆, 筛选都阳性. 今天又作了六个. 集我30年的分
子生物学的工作经验, 我有一套简易,有效的基因克隆方法. 无论片断大小 (>8Kb),
无论酶切类型, 无论何种载体 和感受态细胞, 全都工作,没有问题. 可惜因为版权
关系 (正在写书),其操作步骤现只能非免费提供. 该克隆方法(章节) 转让费为$100.
为证明其可信度,我可以为你作一免费克隆. 你只提供目标片断, 我在三天内交付你
克隆好的质粒. 有兴趣的话,可联系,用此邮箱. |
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W*V
发帖数: 13 | 45 我周一作了四个TRIP-LIGATION 克隆, 筛选都阳性. 今天又作了六个. 集30年的分子生
物学的工作经验, 我有一套简易,有效的基因克隆方法. 无论片断大小 (>8Kb), 无论酶
切类型, 无论何种载体 和感受态细胞, 全都工作,没有问题. 可惜因为版权关系 (正在
写书),其操作步骤现只能非免费提供. 该克隆方法(章节) 转让费为$100.为证明其可信
度,我可以为你作一免费克隆. 你只提供目标片断, 我在三天内交付你克隆好的质粒.
有兴趣的话,可联系,用此邮箱. l******[email protected] |
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a*******a
发帖数: 4233 | 46 我不确定，不排除这个可能
我用pcdna3.1接6k多带n端和c端tag的tet1
转染後用if检测，只有不超过2%的细胞是阳性，换过ubc ef1a启动子都没什么改善。还
做过几个类似大小的蛋白都是类似现象。
但是转9k的lv载体加3k的蛋白再加1.5k的ires gfp，蛋白表达的就很好。排除质粒太大
转染效率不高的可能。
后来我的解决办法是不做这么大的基因了。 |
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i*d
发帖数: 2640 | 47 事情是这样的。
我让细胞高表达cMyc。蛋白表达确实很高。
但是不确定cMyc是不是有活性，是不是跑到细胞核里去激活基因表达。
所以想找个阳性参照。哪种mRNA最具代表性啊？
多谢！ |
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j******n
发帖数: 941 | 48
内能
在一定范围内你师姐说的是对的 尤其是每次提的细胞都差不多的时候 基本可以不测
按照之前的protocol加就行了 你师姐肯定是常做这种scale 心里有数
换一种情况 如果两个样品 一个RNA极端少 一个极端多 在同一个scale的反转中 那个
极端多的样品很可能反转不完全 导致最后结果与实际量比偏少 量太少也可能会导致后
面的PCR反应被背景信号干扰 导致假阳性 结果比实际量偏多 那肯定有就误差了呗 |
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m*****u
发帖数: 15526 | 49 cleaved caspase 9组织核染色阳性有意义么？说明什么？因为正常对照组没有，想问
问。cleaved caspase 3 and cleaved caspase 8染色都是阴性。是上皮细胞。多谢 |
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