由买买提看人间百态

topics

全部话题 - 话题: 缓冲液
1 2 3 下页 末页 (共3页)
m****m
发帖数: 395
1
需要做某透析,根据PROTOCOL,先用TRIS缓冲液(PH8)透析,再用磷酸氢二钠/磷酸二
氢钠缓冲液(PH8)透析,请问这两种缓冲液的作用区别是什么?
n**********1
发帖数: 251
2
为什么感觉Western的商用缓冲液跑胶和转移的速度比自己配的快,而且效率也不
错啊?
应该不是心理作用。其他人也这么说。是不是配方有什么不同啊,大家知道这个配方吗
?如果有自己也可以改进改进,呵呵。
m****m
发帖数: 395
3
来自主题: Biology版 - 急!怎么配PH8的磷酸氢钠缓冲液
现有1M磷酸氢二钠和1M磷酸二氢钠各一瓶,要配成50mM的混合磷酸氢钠缓冲液,PH=8,体积2L
请问该怎么配?
如果把两个溶液都稀释成50mM的溶液再混合,总溶液算不算50M呢?这样PH不一定是8吧?要另外用磷酸和氢氧化钠调?
还是直接算好每种溶液各取多少ML混合后再稀释正好PH=8?
分析化学没学好哎,晕了,不知道该怎么算了
c******e
发帖数: 350
4
来自主题: Biology版 - 请问,缓冲液的选择
面对众多的缓冲液,不知选择的根据是什么。
RNA用MOPS,southern/northern blot用SSC, 细胞培养相关的有Hank's buffer saline
(HBS), HEPES.
请问,在同一PH值下,选择这些buffer的根据是什么?
比如,HBS,HEPES, HBSS什么的,用哪一个?
RNA为什么用MOPS?
多谢!
c***d
发帖数: 142
5
来自主题: Biology版 - 关于TBE缓冲液的配置
配置TBE缓冲液时直接用粉剂的EDTA配的。1000ml。 后来发现里面有些白色的片状的东
西溶不了 测了ph=8.3 知道一般建议先配EDTA母液 但现在已经这样了 如何补
救呢?
s******r
发帖数: 2876
6
来自主题: Biology版 - 关于TBE缓冲液的配置
没什么关系,
EDTA没什么大用,

配置TBE缓冲液时直接用粉剂的EDTA配的。1000ml。 后来发现里面有些白色的片状的东
西溶不了 测了ph=8.3 知道一般建议先配EDTA母液 但现在已经这样了 如何补
救呢?
g*********n
发帖数: 808
7
【讨论】扫描电子显微镜的设计思想和工作原理
扫描电子显微镜的设计思想和工作原理,早在1935年便已被提出来了。1942年,英国首
先制成一台实验室用的扫描电镜,但由于成像的分辨率很差,照相时间太长,所以实用
价值不大。经过各国科学工作者的努力,尤其是随着电子工业技术水平的不断发展,到
1956年开始生产商品扫描电镜。近数十年来,扫描电镜已广泛地应用在生物学、医学、
冶金学等学科的领域中,促进了各有关学科的发展。
一.扫描电镜的特点
和光学显微镜及透射电镜相比,扫描电镜具有以下特点:
(一) 能够直接观察样品表面的结构,样品的尺寸可大至120mm×80mm×50mm。
(二) 样品制备过程简单,不用切成薄片。
(三) 样品可以在样品室中作三度空间的平移和旋转,因此,可以从各种角度对样品进
行观察。
(四) 景深大,图象富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍,比透射电镜
大几十倍。
(五) 图象的放大范围广,分辨率也比较高。可放大十几倍到几十万倍,它基本上包括
了从放大镜、光学显微镜直到透射电镜的放大范围。分辨率介于光学显微镜与透射电镜
之间,可达3nm。
(六) 电子束对样品的损... 阅读全帖
r****o
发帖数: 105
8
来自主题: Biology版 - 关于PVDF
PVDF(Polyvinylidene fluoride) 膜 和硝酸纤维素(nitrocellulose)
膜都具有孔状结构,通过疏水作用把蛋白质固定起来。问题是要使蛋白质
转移到孔状结构里面,需要孔状结构里面充满缓冲液才行。一般的水溶液
根本无法直接充满这些孔状结构,需要先用有机溶剂浸泡,然后逐步置换
成最后的转膜缓冲液。
硝酸纤维素膜疏水性不是很强,所以在转膜缓冲液里加甲醇就可以了。
PVDF疏水性很强,所以一定要先用纯甲醇浸泡十秒钟,然后趁其未干时,
马上再用水和转膜缓冲液浸泡,进行置换。
PVDF的优点是机械性能好,比较耐磨损。
b******n
发帖数: 4225
9
1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲,做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单,买进口抗体捉襟见肘,买国产抗体得需要大无畏的勇气,对于我所在的兰州地区
的实验者而言,感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里,我先后用过进口抗
体,进口抗体国内分装包装,国产抗体,质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失:abcam品种全,质量过硬,但价高(3400元/100微升),
而且说是100微升,但至多能吸出来90微升;Sigma的 价最贵;比较有性价比的是CST的
抗体,现在好像是2200元/100微升,我前后用过二十几种, 1:1000的稀释比下,还没
有失过手,100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验,还有一个优点是
通常量比100微升多出来10微升,唯一的不足是CST的品种实在不多。Santa的多克隆抗
体质量可以,但是选用 Santa的单抗还是有风险,估计这也是业界共识了吧。
进口抗体国内分装包装我也用过不少,呵呵,毕竟是穷人(420元/100微升),大概好
抗体的比例约为50%,如果能做出来,也存在一个问题,就是... 阅读全帖
i****g
发帖数: 3896
10
写得比较有意思,但是不太实用,可能实验条件相差太大。precast gel比自己制的gel
效果要好很多,结果也容易重复。antibody要看运气的,呵呵。

1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲,做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单,买进口抗体捉襟见肘,买国产抗体得需要大无畏的勇气,对于我所在的兰州地区
的实验者而言,感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里,我先后用过进口抗
体,进口抗体国内分装包装,国产抗体,质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失:abcam品种全,质量过硬,但价高(3400元/100微升),
而且说是100微升,但至多能吸出来90微升;Sigma的 价最贵;比较有性价比的是CST的
抗体,现在好像是2200元/100微升,我前后用过二十几种, 1:1000的稀释比下,还没
有失过手,100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验,还有一个优点是
通常量比100微升多出来10微升,唯一的不足是CST的品种实在不多。Santa的多克隆抗
体质量可以,但是选用 Santa的单抗还是有风险,估计这... 阅读全帖
w********h
发帖数: 12367
11
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: bulletin (bulletin), 信区: Biology
标 题: 穷人的劳斯莱斯——五年western经验谈(转)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Mar 2 23:29:05 2012, 美东)
1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲,做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单,买进口抗体捉襟见肘,买国产抗体得需要大无畏的勇气,对于我所在的兰州地区
的实验者而言,感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里,我先后用过进口抗
体,进口抗体国内分装包装,国产抗体,质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失:abcam品种全,质量过硬,但价高(3400元/100微升),
而且说是100微升,但至多能吸出来90微升;Sigma的 价最贵;比较有性价比的是CST的
抗体,现在好像是2200元/100微升,我前后用过二十几种, 1:1000的稀释比下,还没
有失过手,100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验,还有一个优点是
通常量比100微升多出来10... 阅读全帖
w******n
发帖数: 371
12
来自主题: Biology版 - 搞生物之前要想清楚 zt

基本上来说,能发文章,能发好文章的,挣不到什么钱。一帮师兄弟,发JBC出来的,
拿着细胞生物学的文凭,要么继续读博士、读博后,要么进公司卖卖仪器、试剂,别指
望公司能花大价钱请你去搞研发。说个搞笑的事情,我同事的一个朋友开公司,卖一种
试剂,很便宜,基本上接近白送。但是用用PH值就不准了,就需要加缓冲液。缓冲液超
级贵,一升卖两万。很多年之后,这哥们喝多了,说,其实这个缓冲液就是纯水。所以
不要鄙视这些东西木有技术含量,人家一顿饭的钱,比你几年挣得都多。就算辛辛苦苦
熬成教授,不拿个杰青、长江、百人,你想拿出个房子的首付都困难。当然,你熬到11
那份上,该有的基本都能有了。可那也只是现象不是。要走这条路,先掂量掂量你有没
有这个命。

不发文章的、出手也是烂文章的,反而容易挣钱。咱这边工科硕士不要求论文,博士论
文能SCI就行。热门专业比如医疗器械,医疗材料,分析化学之类的,历来挤破头,愿
意自费读工程硕士的一大把,而且好的公司基本都有咱的人,来者基本不拒。另外,咱
这学生有特点,人宅,寡言,动手能力强,忠诚度还奇高。你看上面那个帖子里的师兄
就是华工的,凡事历来站老板这边儿。在... 阅读全帖
a***s
发帖数: 1084
13
http://www.people.com.cn/GB/shizheng/1026/2628906.html
责任人是谁? “疾控中心问责事件”再追踪
2004年07月09日15:34
责任人是谁
北京迎新街100号依然顽强地挺立在那条陈旧拥挤的胡同里。大楼窗户上破碎的玻
璃还没有修复,从实验室伸出的排气口依旧冲着相隔只有几米的居民住家。一个比较容
易看出的变化是,保安从传达室笔直地站到了大门口,开始严格盘查进出人员。
这里是病毒病预防控制所(以下简称病毒所),它是中国疾病预防控制中心(CDC)的
直属研究所。7月1日,卫生部的调查结果证实,由于一位学生的违规操作,这里的腹泻
病毒实验室发生了严重的SARS病毒泄漏事故,从而引发了两个多月前让北京市民不安的
SARS疫情。
“现在里面很乱,到处在搬东西。”值勤的保安说。他还注意到,原来的所长阮力
和副所长董小平不再坐小车了,“他们最近都是走着来上班的。”
卫生部严厉处理了这起重大责任事故,共有5名责任人受到行政处分。但除了疾控
中心主任李立明被公诸报端,有关方面对其他人的姓名尚未公布。
经调查,相关责任人还有:疾控中心分管设备实... 阅读全帖
t*c
发帖数: 6929
14
2004年4月,SARS疫情重又进入人们的视线。只是在这次SARS疫情中,肇始之地显得身
份特殊。没错,这一次SARS疫情正是源自实验室:随后的调查证实这次SARS疫情源于中
国疾病预防控制中心病毒病预防控制所(以下简称病毒所)的实验室感染(在2003年
SARS疫情平息后,病毒所被卫生部指定为SARS毒株的6家保管单位之一)。这次疫情,
北京和安徽两地共出现9例SARS确诊病例,在短短的几天内有862人被医学隔离。
事情过程
中国疾控中心病毒所是卫生部指定的SARS毒株的6家保管单位之一。其病毒应急技
术室和病毒资源中心室承担着SARS毒株的保藏任务,另外在腹泻病毒实验室和麻疹病毒
室这两个科室也存有部分SARS毒株和潜在感染性材料。
任小莉(化名)从磷酸盐缓冲液中取出了装着SARS病毒的试剂盒,直接走出了生物安
全三级实验室。今年春节过后,她经常这样来到隔壁的普通实验室,她需要使用那里的
一台电镜设备。按照以前的经验,磷酸盐缓冲液和十二烷基硫酸钠等去污剂组成的溶液
配方可以分离出病毒的活性蛋白。
任小莉是病毒所腹泻病毒实验室的博士生,在洪涛和王健伟的指导下,她和杨某... 阅读全帖
p***n
发帖数: 17190
15
http://news.sohu.com/20110413/n305695901.shtml
阴滋病传言致使“HIV试纸”大卖 专家称不科学
来源:现代快报 2011年04月13日04:23我来说两句 (0) 复制链接打印大中小大中小大
中小  4月6日,针对近期公众普遍关注的“阴性艾滋病”事件,卫生部正式表态,“
阴性艾滋病”只是恐艾症状,没有什么未知病毒,所谓“阴滋病”与艾滋病无关。尽管
如此,由此引发的连锁反应却远未停息。在网络上,曾沉寂一时的HIV自测试纸再次热
销,打出了“15分钟判定结果”、“消除内心恐惧”的口号,成为一些民众排除对“阴
滋病”和艾滋病恐惧的救命稻草。
恐惧成噱头
网上叫卖HIV试纸
在网上搜索“HIV试纸”,会发现有数量众多、类型纷繁的网站都在兜售这种试纸
,有的艾滋网站自称是“中国第一个专业的提供艾滋病预防与检测咨询服务的平台”,
有的则自称“艾滋病官方检测门户网”。近期的“阴滋病”传言,更成为不少网站的宣
传噱头,网站根据新情况出了广告词:一张试纸就能让您在15分钟内脱离恐慌。自助检
测只要用配套提供的采血针,在指尖或耳垂上采血后,滴入试纸加样孔,10... 阅读全帖
t*****z
发帖数: 1598
16
来自主题: Biology版 - Cloning: don't use Invitrogen products
喜欢Fermentas的酶。RE都换成FastDigest格式的,全部缓冲液通用,和其他修饰酶也
可以通用,做什么都不用换缓冲液,而且连loading dye也给你加好了,非常适合我这
种懒人。T4连接酶,号称室温五分钟(我没试过这么短的)。
克隆载体方面Fermentas有个pJET,便宜又好用,传统的平端T4连接,但是效率很高,
我每次只连15-30分钟,就长出很多克隆。阳性率100%,假阳性率0%,我有时甚至都可
以省下筛选这一步,直接养菌抽质粒了。美中不足的是载体上的常见的酶切位点少了点
。与之相比的QIAGEN的pDrive,也挺好用,但是阳性率不是那么高,。每次还是不得不
挑那么四五个菌落来做PCR鉴定。Invitrogen的TOPO TA载体们,我们实验室和隔壁实验
室用起来都很不顺利,我现在弃之不用。
Invitrogen的Gateway载体们,虽然贵,没办法,只能买他们的,感觉Gateway这么方便
的东西还是只此一家。效率不高,有时会出问题,但是勉强够用了。我曾自己试图构建
类似于pDONR的载体,失败,原因复杂,一言难尽。不喜欢NTI,宁可用最土的BioEdit
s******y
发帖数: 28562
17
That really depends on the chemistry of your reaction and your product.
Tris has free amino group that may quench some reactive group.
Phosphate don't have amino group but it may precipitate with certain ions.
So that really depends on what the reaction really need to have or need to
avoid
T**********t
发帖数: 1604
m****m
发帖数: 395
19
谢谢!!明白了
p*******i
发帖数: 449
20
用分子筛柱脱盐 没必要透析那么复杂 用低盐缓冲液走一遍分子筛应该就差不多了
猜测你的蛋白用尿素之类的缓冲液做的纯化 所以关键不是用什么脱盐 是你的蛋白质由于
疏水性的问题必然不能达到你要的盐浓度
如果后续检测不影响的话 可以考虑用DMSO促溶
仅仅是点建议 以前做蛋白质的功夫快忘没了
e********r
发帖数: 147
21
最近在用Co-IP的方法检测细菌细胞内的蛋白磷酸化水平(32P标记)。最后洗完
Protein-A agarose后,加2 X SDS上样缓冲液,如果直接吸一是太粘吸不出来,另外这
样的缓冲液里也没蛋白信号(文献上说37度处理5 min,试过不行,难道beads用的不一
样?)。如果100度煮5 min倒是能把蛋白从protein-A agarose上分离下来,但预实验
表明100度处理大概会使50%的磷酸化蛋白信号消失。请问做体内蛋白磷酸化检测的朋友
,还有别的什么着数可以用吗?
s****2
发帖数: 19
22
来自主题: Biology版 - basic PCR求救
开始也怀疑是缓冲液太久没有换,后来我就是每次跑胶都换新的缓冲液.
请问上样/跑胶的时候怎么能引起漂移呢?
s******y
发帖数: 28562
23
哎,大家怎么这么喜欢较真啊。我说的那个4度变性是指那个总蛋白的抽提物。
里面有各种各样的蛋白酶什么的,在4度里面,你再加什么抑制剂也挡不了
它们慢慢起作用,再加上氧化反应。。。
而纯化后的蛋白一般都没有那些杂七杂八的东西,而且都是保存在适合的
缓冲液里面的,而且是在密封的管子里的。当然不会那么容易变性。
但是假如把一个细胞总蛋白随便的放在某个不三不四的缓冲液里面,
然后把盖子掀开透气,4度放过夜之后应该会沉淀了吧?
当然,透析的时候,总会有一些蛋白因为盐析的原因,或者和透析膜有各种接触,
而沉淀的。不过这个具体到底是什么原因我似乎没有看见有人去分析过。
d****h
发帖数: 4291
24
来自主题: Biology版 - SDS-PAGE 蛋白电泳的问题。
实验室需要磨洋工和灌水的
啥都买了
你要在洋大爷实验室还好
要是华人屁艾,看着你闲着,他的心会心绞痛的,即使不说话一会儿在你眼前晃一下,
一会儿晃一下
晃的你想撞墙
以前呆过一个lab,从缓冲液到lb等大家能共用的东西都是楼里配好的,所有耗材也是
楼下stock有的
也就是一般溶液只需要兑兑水就好了,水也是灭好的,要多少拿多少
于是生产力就解放出来了
你要是坐电脑跟前,歇会儿,即使不是浏览网页,就算是看上一会儿文献,老板就会持
续不断的在你眼前晃。多晃几次你不起来就脸色铁青
后来哥就觉悟了,胶自己配,有时候缓冲液也不用他们配好的,摆一桌子东西,搞的很
忙的样子,活儿比以前出货少了,但是老板就总是笑容满面的了

发帖数: 1
25
来自主题: Biology版 - 方舟子第三篇质疑文章
  韩春雨论文的实验结果是不是伪造的?
  ·方舟子·
河北科大副教授(据闻已突击评为正教授)韩春雨因发明基因编辑新技术,
被称为“诺贝尔级成果”,一夜成名,号称“诺公招手”了(注)。但是有多家
实验室反映重复不出其论文中最关键的图4结果。有人仔细研究图4图片,发现其
电泳结果不合理;还有人对这些图片做了亮度、对比度处理,发现有拼接的痕迹。
这是怎么回事呢?
我先给不是生物医学领域的读者粗略介绍一下其中的背景知识。论文图4是
对DNA片段做电泳的结果。DNA片段带有电荷,把它添加到凝胶中,放进缓冲液,
通上电,DNA片段就能在凝胶中移动,片段大的移动得慢,片段小的移动得快,
染色以后可以看出这些片段在哪里,再跟已知大小的标识片段做对比,就可以知
道片段的大小了。这就是所谓电泳。
论文图4a是对DNA进行了编辑后产生的不同片段进行电泳的结果。DNA是由一
个个核苷酸链接而成的,核苷酸越多,DNA片段就越大。经过剪切之后,图中的
G6和G13相差30个核苷酸。这个大小差别是不是能在电泳上看出来,取决于凝胶
的浓度和电泳的时... 阅读全帖
l***s
发帖数: 115
26
来自主题: Chemistry版 - 固相萃取问题请教
用waters 的Oasis HLB 96-well µElution Plate, 2 mg Sorbent per Well, 30
µm Particle Size 从血浆从提取一个小分子。小分子带了一个羧基。 上样前加
pH=3 的缓冲液, 1比1 的体积比加的。小分子的reocver有时候能有90%, 有时候就只
有50%。 请问为什么重复性这么差呢? 缓冲液pH 没有问题,每次用前都会测一下。有
时候在同一块板子同时重复三次,两次在90%, 一次就只有50%。 难道是plate质量不
行 ?
a****a
发帖数: 389
27
来自主题: Chemistry版 - 固相萃取问题请教
是不是load样品的速度不一样?
[在 llyes (zz) 的大作中提到:]
:用waters 的Oasis HLB 96-well µElution Plate, 2 mg Sorbent per Well,
30 µm Particle Size 从血浆从提取一个小分子。小分子带了一个羧基。 上样前加
:pH=3 的缓冲液, 1比1 的体积比加的。小分子的reocver有时候能有90%, 有时候就
只有50%。 请问为什么重复性这么差呢? 缓冲液pH 没有问题,每次用前都会测一下。
有时候在同一块板子同时重复三次,两次在90%, 一次就只有50%。 难道是plate质量不
:...........
l***s
发帖数: 115
28
来自主题: Chemistry版 - 固相萃取问题请教
用waters 的Oasis HLB 96-well µElution Plate, 2 mg Sorbent per Well, 30
µm Particle Size 从血浆从提取一个小分子。小分子带了一个羧基。 上样前加
pH=3 的缓冲液, 1比1 的体积比加的。小分子的reocver有时候能有90%, 有时候就只
有50%。 请问为什么重复性这么差呢? 缓冲液pH 没有问题,每次用前都会测一下。有
时候在同一块板子同时重复三次,两次在90%, 一次就只有50%。 难道是plate质量不
行 ?
a****a
发帖数: 389
29
来自主题: Chemistry版 - 固相萃取问题请教
是不是load样品的速度不一样?
[在 llyes (zz) 的大作中提到:]
:用waters 的Oasis HLB 96-well µElution Plate, 2 mg Sorbent per Well,
30 µm Particle Size 从血浆从提取一个小分子。小分子带了一个羧基。 上样前加
:pH=3 的缓冲液, 1比1 的体积比加的。小分子的reocver有时候能有90%, 有时候就
只有50%。 请问为什么重复性这么差呢? 缓冲液pH 没有问题,每次用前都会测一下。
有时候在同一块板子同时重复三次,两次在90%, 一次就只有50%。 难道是plate质量不
:...........
i***s
发帖数: 39120
30
韩春雨实验室所在的四层老楼新安装上智能门。
韩春雨论文中的关键实验环节。
韩春雨瘦了,一位接近他的人说,最近韩春雨经常做实验到凌晨两三点钟。
他的实验室在河北科技大学一座四层老楼里,红色的外墙伏满了爬墙虎,韩春雨在这一待就是10年。今年5月2日,一篇关于新基因编辑技术NgAgo的论文在国际顶级期刊《自然·生物技术》(Nature Biotechnology)在线发表(后在该刊第34册7月号纸质版发表),作者是河北科技大学副教授韩春雨领衔的课题组。发表后,不仅他个人,连他所在的实验室,都获得了前所未有的关注。为了安全,学校不得不给实验楼安装上刷卡入内的智能门,还布了摄像头。
韩春雨有两间研究室在三楼走廊的尽头。在接待过一波又一波记者,甚至有长江学者来访的房间里,一张白色纸片嵌在插座缝里,上面写着“Arrival of the Argonautes 1.0T and 2.0 Smart! (Ago1.0T和2.0Smart版本的到来!)”,后缀为两个笑脸。实验室在等NgAgo优化版2.0尽快问世。
但NgAgo1.0仍然摇摇欲坠。由于多个实验室无法重复实验,被认为可以超越时兴的CRISPR... 阅读全帖
g****g
发帖数: 1828
31
来自主题: Military版 - 瘦肉精
瘦肉精是一类动物用药,有数种药物被称为瘦肉精,例如莱克多巴胺(Ractopamine)
及克伦特罗(Clenbuterol)等。将瘦肉精添加于饲料中,可以增加动物的瘦肉量、减
少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因为考虑对人体会产生副作用,各国开放
使用的标准不一。
目录
简介
瘦肉精
基本信息
检测方法
研究历史
用途
作用
毒性
1. 毒理简介
2. 临床表现
3. 急救治疗
识别和预防
1. 识别方法
2. 预防方法
其它相关
瘦肉精的危害
其他危害
鉴别瘦肉精猪肉方法?
用量规定
瘦肉精事件
1. 安徽雨润午餐肉瘦肉精事件
2. 瘦肉精猪肉检疫走过场
3. 查处
央视新闻频道
1. 农业部开展“瘦肉精”专项整治行动
瘦肉精中毒新闻
简介
瘦肉精
基本信息
检测方法
研究历史
... 阅读全帖
x*****7
发帖数: 7326
32
来自主题: Military版 - 人生快要完整了
如果经过三次显著地震。
本虾已经经历了两次。
第一次是在上海读书时,东海地震,对上海影响本来不大。但我们研究所的大楼似乎是
危楼,晃得很厉害。我正在做RNA琼脂糖胶电泳,突然发现我的胶变卷曲了,而电泳槽
里面的缓冲液都漫出到桌上了,大为吃惊(那个时候我的内耳平衡管还不像今天这么敏
感),两个上海师姐大喊:“地震了,快跑!” 于是我们都跑下楼。全所几百人都到
楼下广场避险。几十分钟以后得知安全了,我们开始上楼,发现遗弃或断裂的高跟鞋或
鞋跟若干,包括我两个师姐中一个的一个高跟。
第二次就是北维州这次。
我没算去年马里兰州那次小地震。那次我半夜里突然觉得有人摇床,大约摇了一分多钟
w********t
发帖数: 12853
33
爱国愤青、卖国贼、带路党的三角关系
润涛阎
http://blog.creaders.net/laoyan/user_blog_diary.php?did=101496
上文讲了卖国贼与带路党,今天接着讲爱国愤青,因为这三股势力左右着腐败专制政府
的命运。上文说过,卖国贼专指有权力出卖国家利益的贪官污吏与既得利益集团,以“
宁送外敌,不予家奴”的方式出卖国家和人民的利益。而带路党则是一旦外敌入侵便给
洋人当狗腿子出卖国家与人民的利益。不论是卖国贼还是带路党,都是汉奸,因为双方
都出卖国家利益。二者的关系是:先有卖国贼,后有带路党。一旦带路党当政,便逐步
变成卖国贼,依次反复,连绵不绝,直到专制制度灭亡。
为了阐述卖国贼、带路党、爱国愤青三者的关系,首先需要给出“爱国愤青”的定义。
这里的“青”不仅仅是生理年龄属于青年人,也包括心理年龄属于青年人的中老年人。
比如,谭嗣同死时三十二岁,但他仍然属于爱国愤青。至于爱国愤青里的爱国,指的是
他(们)言必谈爱国,行必为国家利益而牺牲自己的一切。如果他们抗议的政府不认同
他们的爱国热情,他们就如丧考妣。这种爱国行动有两种情况:一是他们看到国家将走... 阅读全帖
w********t
发帖数: 12853
34
小破熊非常给力,有才,有才。
附上润涛阎原文,大家参考:
爱国愤青、卖国贼、带路党的三角关系
润涛阎
http://blog.creaders.net/laoyan/user_blog_diary.php?did=101496
上文讲了卖国贼与带路党,今天接着讲爱国愤青,因为这三股势力左右着腐败专制政府
的命运。上文说过,卖国贼专指有权力出卖国家利益的贪官污吏与既得利益集团,以“
宁送外敌,不予家奴”的方式出卖国家和人民的利益。而带路党则是一旦外敌入侵便给
洋人当狗腿子出卖国家与人民的利益。不论是卖国贼还是带路党,都是汉奸,因为双方
都出卖国家利益。二者的关系是:先有卖国贼,后有带路党。一旦带路党当政,便逐步
变成卖国贼,依次反复,连绵不绝,直到专制制度灭亡。
为了阐述卖国贼、带路党、爱国愤青三者的关系,首先需要给出“爱国愤青”的定义。
这里的“青”不仅仅是生理年龄属于青年人,也包括心理年龄属于青年人的中老年人。
比如,谭嗣同死时三十二岁,但他仍然属于爱国愤青。至于爱国愤青里的爱国,指的是
他(们)言必谈爱国,行必为国家利益而牺牲自己的一切。如果他们抗议的政府不认同
他们的爱国热情,他... 阅读全帖
w****6
发帖数: 169
35
本来看到说施一公解结构是用各种microscopy就不想看下去了,不过一抬头看居然不是
生物版而是军事版,就把那一段看完了。我以前也做过一段时间的结构,怎么说呢,结
构的解析当然还是比较重要的,要不然nature,Science上也不会经常出现结构的文章。
但是离应用还是比较远的,因为生物体内的蛋白其实是很动态,很复杂的。用X-ray解
的结构(这是一公最常用的方法)只是一个静态的结构,你可以想象一个蛋白在发挥机
制时就像一个电影有成千上万帧的画面,而他解的结构只是其中的一帧,而且还可能(
估计99%的可能)不是生理状态下的一帧,因为他要得到那个结构,必须要使蛋白在体
外特殊的缓冲液下结晶,而这种密集有秩序且自由能最低的状态很可能离生理状态已经
十万八千里了。当然一般发好文章时还需要生化试验来辅佐解析或预测机制,但这个就
有点说远了。另外,这只是讨论一个蛋白的情况,但生物体内不仅仅是一个蛋白的问题
,而是成千上万个蛋白/DNA/RNA/脂类/糖类等等组成的复杂网络。像你说的病毒什么的
,并不是解蛋白结构就能解决的。说实话,解结构在美国应该算是比较过气的议题,如
果不和其他手段结合,是很... 阅读全帖
m******r
发帖数: 4351
36
来自主题: Military版 - 转基因作物的毒性问题 zz
转基因作物的毒性问题4
作者:石老人

现在还没有技术能够将一种生物中的所有物质检测出来。即便最强大的色谱,其检测能
力也是很有限的。

此外生物体内还有很多未被发现的化合物。

最后,对生物有害的化合物被人类明确掌握的比例并没有想象的那么高,很多化合物对
人体究竟是否有害,目前并不很明确。某种我们熟知的习以为常的东西也许在某个时间
就可能被认为可以诱发某种疾病。很典型的,中国古代认为可以延寿的丹药现在被认为
导致慢性中毒,包括现在仍然被迷信的藏药蒙药;水银曾被当成补药,放射性镭也曾被
认为是大补的物质。现在,这些东西的危害已经很明确了。

只能说,人类度所掌握的知识还实在是太少。

代谢组学正在努力尝试去做,但代谢组学也只能尝试去寻找1对或更多样本之间存在哪
些差异,但能找到的差异只是样本之间真正存在的差异中的很小很小比例的一部分。而
且这些差异对哪个性状差异负责,需要通过另外的方法去找出来。

总之问题是现在技术方面还不能胜任这项工作。如果能找到转基因前和转基因后的水稻
产生的大米的成分有哪些差异,而且这些差异必须是稳定的,这以后才可能通过色谱的
方法进行对转基因大米进... 阅读全帖
s***n
发帖数: 1114
37
来自主题: Military版 - [投稿]2015作文,浙江卷
古人说“言为心声,文如其人”。性情偏急则为文急促,品性澄淡,则下笔悠远,这意
味着作品的格调趣味与作者的人品应该是一致的。金代元问好《论诗绝句》却认为“心
画心声总失真,文章宁复见为人”,艺术家笔下的文雅不能证明其为人的脱俗。这意味
着作品的格调趣味与作者人品有可能是背离的。要求考生选自列观点自拟题目。
师妹的空间
论文刚被plos one接收,整整一年时间.老板宣布这个消息的时候,我和师妹一起欢
呼,我想趁机拍拍她的肩膀,却被她机智的躲开,晃了我一下,闪到了腰,半天没缓过来,好
保守的女
生,我喜欢!
这一年来,师妹帮我配过两次缓冲液,其中一次ph不太对,被我偷偷倒了,没告诉她,
怕她的小心脏受不住---毕竟,她是一个情感细腻的姑娘,从她的QQ空间上的照片就能看
出来:在秋天,她会关心小松鼠的过冬食物,把她自己的零食装在Celine的包包里,分给小
松鼠吃,在冬天,她会独自堆一个小雪人,俏皮的给雪人围一条hermes的丝巾,然后在雪人
下面画个大大心形,在春天,她独自一人跑到奥兰多玩,空间里全是沙滩照,... 阅读全帖
C**********e
发帖数: 23303
38
由此可见华人本性的丑陋
华人想保留一些技术秘密有多末难
生物界简直是一群精神病嘛
令人难以想象
看篇论文就想重复试验
真是脑子烂掉了
谁会把关键技术放在论文里?
————————————————————————
在韩春雨的舆论风波逐渐发酵之时,8月8日,韩春雨向非盈利性质粒共享信息库
Addgene提交新版的详细实验方法,并补充了数项应当注意的问题。
中国青年报·中青在线记者在Addgene网站中看到,新版实验方法分为细胞培养、
质粒/gDNA 共转染、基因组提取三个部分,一些实验细节与其在《自然-生命科学》中
发表的论文有所不同。
据 “科学美国人”中文版《环球科学》的微信公众号“科普圈”介绍,新实验步
骤有几处改变,其中包括“血清品牌由Hyclone 变更为Gibco”,“溶解和稀释质粒及
gDNA 的缓冲液变更为水(pH 8.0)”,“建议在质粒/gDNA共转染的8小时、12小时或
24小时后,补转一次gDNA(旧版方法中只提及了‘24小时’)”等内容。
此外,韩春雨还在新版实验方法中列出了4项注意事项,其中包括“NgAgo/gDNA 系
统对细胞中胞内菌和支原体感染敏感,在实验... 阅读全帖
l*******1
发帖数: 16217
39
“溶解和稀释质粒及gDNA 的缓冲液变更为水(pH 8.0)
我测过实验室用的超纯水和去离子双蒸水的pH值都是5-6之间,你们测出过碱性的纯水
w*******e
发帖数: 15912
40
哥不懂生物,还请各位千老们给哥指点迷津
http://news.ifeng.com/a/20160810/49751762_0.shtml
论文被疑造假 韩春雨公开详细实验方法
2016年08月10日 11:29
来源:中青在线
3434人参与 240评论
原标题:韩春雨公开详细实验方法
中青在线讯(中国青年报·中青在线记者叶雨婷)在韩春雨的舆论风波逐渐发酵之时,
8月8日,韩春雨向非盈利性质粒共享信息库Addgene提交新版的详细实验方法,并补充
了数项应当注意的问题。
中国青年报·中青在线记者在Addgene网站中看到,新版实验方法分为细胞培养、质粒/
gDNA 共转染、基因组提取三个部分,一些实验细节与其在《自然-生命科学》中发表的
论文有所不同。
据“科学美国人”中文版《环球科学》的微信公众号“科普圈”介绍,新实验步骤有几
处改变,其中包括“血清品牌由Hyclone 变更为Gibco”,“溶解和稀释质粒及gDNA 的
缓冲液变更为水(pH 8.0)”,“建议在质粒/gDNA共转染的8小时、12小时或24小时后
,补转一次gDNA(旧版方法中只提及了‘24小时’)”等内容。
此外... 阅读全帖
p********7
发帖数: 18007
41
来自主题: Military版 - 生化是胶和缓冲液生物是老鼠
哈哈哈哈哈哈哈哈哈
C**********e
发帖数: 23303
42
韩春雨终于被海外千老逼得交待了技术秘密
韩国丹麦摘桃
由此可见华人本性的丑陋
华人想保留一些技术秘密有多末难
————————————————————————
在韩春雨的舆论风波逐渐发酵之时,8月8日,韩春雨向非盈利性质粒共享信息库
Addgene提交新版的详细实验方法,并补充了数项应当注意的问题。
中国青年报·中青在线记者在Addgene网站中看到,新版实验方法分为细胞培养、
质粒/gDNA 共转染、基因组提取三个部分,一些实验细节与其在《自然-生命科学》中
发表的论文有所不同。
据 “科学美国人”中文版《环球科学》的微信公众号“科普圈”介绍,新实验步
骤有几处改变,其中包括“血清品牌由Hyclone 变更为Gibco”,“溶解和稀释质粒及
gDNA 的缓冲液变更为水(pH 8.0)”,“建议在质粒/gDNA共转染的8小时、12小时或
24小时后,补转一次gDNA(旧版方法中只提及了‘24小时’)”等内容。
此外,韩春雨还在新版实验方法中列出了4项注意事项,其中包括“NgAgo/gDNA 系
统对细胞中胞内菌和支原体感染敏感,在实验前要仔细确认所使用的细胞株未被污染或
污染已被彻底清... 阅读全帖
U**********A
发帖数: 261
43
不可能不够!不就是一组引物,加点酶及缓冲液么!
不会有公司供这个发国难财吧!
B***o
发帖数: 549
44
【李兰娟:武汉检测试剂不够,不是每个人能得到检测】2日,中国工程院院士、国家
卫健委高级别专家组成员李兰娟带队赴武汉站参与救治工作。3日,她在接受央视采访
时表示,武汉目前检测试剂数量不够,因此不是每个人能够得到检测

: 不可能不够!不就是一组引物,加点酶及缓冲液么!

: 不会有公司供这个发国难财吧!

w*******e
发帖数: 91
45
https://mp.weixin.qq.com/s/Ptg26lQmLxz8rpLk0GZzbw
Original 杨柳综合 知灼 Today
2月15日即今天,科技部社会发展科技司司长吴远彬在国务院联防联控新闻发布会上介
绍,为加强规范管理和服务,高效有序推进全国应急科技攻关,科技部出台了《关于加
强新冠病毒高等级病毒微生物实验室生物安全管理的指导意见》。
吴远彬介绍,《意见》要求实验室发挥平台作用,服务科技攻关需求。同时,各主管部
门也强调要加强对实验室,特别是对病毒的管理,确保生物安全。
确实,病毒研究利国利民,但与此同时,对病毒的安全管理也非常重要。吴远彬的这次
讲话,让人想起一件16年前的SARS病毒泄露往事。实际上,由于时间太久,此次病毒泄
露事件,很多人已经淡忘了。
事件发生在2004年4月,当时,肆虐全球的“非典”过去不到一年。
十年后的2014年7月25日,《中国科学报》刊发的一篇文章说:2004年4月,SARS疫情重
又进入人们的视线。只是在这次SARS疫情中,肇始之地显得身份特殊。没错,这一次
SARS疫情正是源自实验室:随后的调查证实这次SARS疫情源于中国疾... 阅读全帖

发帖数: 1
46
2020年2月15日,科技部社会发展科技司司长吴远彬在国务院联防联控新闻
发布会上介绍,为加强规范管理和服务,高效有序推进全国应急科技攻关,
科技部出台了《关于加强新冠病毒高等级病毒微生物实验室生物安全管理
的指导意见》。

吴远彬介绍,《意见》要求实验室发挥平台作用,服务科技攻关需求。
同时,各主管部门也强调要加强对实验室,特别是对病毒的管理,确保
生物安全。

确实,病毒研究利国利民,但与此同时,对病毒的安全管理也非常重要。
吴远彬的这次讲话,让人想起一件16年前的SARS病毒泄露往事。实际上,
由于时间太久,此次病毒泄露事件,很多人已经淡忘了。

事件发生在2004年4月,当时,肆虐全球的“非典”过去不到一年。

十年后的2014年7月25日,《中国科学报》刊发的一篇文章说:2004年4月,SARS疫情重
又进入人们的视线。只是在这次SARS疫情中,肇始之地显得身份特殊。没错,这一次SA
RS疫情正是源自实验室:随后的调查证实这次SARS疫情源于中国疾病预防控制中心病毒
病预防控制所(以下简称病毒所)的实验室感染(在2003年SARS疫情平息后,病毒所被
卫生部指定为SA... 阅读全帖
x****u
发帖数: 44466
47
面粉专题:小麦面筋 - [面包]
版权声明:转载时请以超链接形式标明文章原始出处和作者信息及本声明
http://sweetscience.blogbus.com/logs/7764272.html
小麦面筋
根据种子蛋白的溶解特性,可以把这些蛋白质分为四大类:
(1)水溶性蛋白质(即“白蛋白”albumin),可溶于水或者稀的缓冲液(buffer),
遇热凝固,这类蛋白质通常为酶。
(2)盐溶性蛋白质(即“球蛋白”globulin),不溶于水,可溶于盐溶液,比如0.
4mol/L的NaCl溶液,遇热较不易凝固。
(3)碱溶性蛋白质(即“谷蛋白”glutelin),不溶于水,可溶于稀的酸或碱溶液。
(4)醇溶性蛋白质(prolamin),可溶于70-90%的乙醇溶液,不溶于水。
对于小麦而言,其麦白蛋白约占4%、麦球蛋白约占8%、麦胶蛋白(即麦醇溶蛋白)约占
39%、麦谷蛋白约占49%,这只是一个特例的数据,影响蛋白质的比例的因素非常多。麦
白蛋白和麦球蛋白易溶于水,为非面筋性蛋白质;麦胶蛋白(Gliadin)和麦谷蛋白(
Glutenin)不溶于水为面筋性蛋白质。
(上图:麦胶蛋白(
C******e
发帖数: 11790
48
来自主题: Living版 - 打了HD一闷棍。。
磷酸盐缓冲液
t******y
发帖数: 6206
49
加一点酸就变酸,加一点碱就变碱。
做市商没有实力,全靠国家队来接盘、做buffer;无论大、小基金、群众都是墙头草,
这不是扯淡么。
O**l
发帖数: 12923
50
最主要就是一个赌场 谁都不清楚这帮玩意到底值多少钱
所以只能一触即溃
1 2 3 下页 末页 (共3页)