m*********y
发帖数: 10616 | 1 北京时间8月15日消息，罗迪克最近的日子并不好过，比赛连战连败、排名也下降跌到
了11位，拿手的发球也威力大减。在接受美联社的采访时，罗迪克向记者透露，过去的
几个月他都被单核细胞增生症所困扰，只是一直都没有发现。
“按照医生的建议，我放弃了罗杰斯杯的比赛。我去华盛顿和德克萨斯做了两次血
检，结果都证明我染上了单核细胞增生症。很开心能及时的发现问题，这种奇怪的感觉
令人恐惧，你不知道接下来会是怎样，有些天你会精神饱满，而有的时候却非常糟糕，
这样让你变的更加的软弱。现在事情已经明朗了，我想这不会再困扰我了。”
罗迪克并不是第一个被单核细胞增生症困扰的球员，费德勒、海宁、安西奇都曾被
这种怪病所影响，其中安西奇的病情最为严重，克罗地亚帅哥几次尝试重回赛场，都以
失败而告终，职业生涯已经处于半退休状态。
罗迪克在最近几个月的表现确实有些诡异，在迈阿密拿下了冠军后，大家都相信安
迪将成为温布尔登有力的竞争者，但他却意外的输给了卢彦勋，上周在华盛顿他的表现
也十分糟糕，败给了落魄的法国帅哥西蒙。华盛顿的比赛结束后罗迪克感觉非常的差，
所以他去华盛顿的一家诊所接受治疗，最后被发现患有轻度单核细胞 |
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b*****d
发帖数: 61690 | 2 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: buce (buce), 信区: Biology
标 题: 习近平：免疫细胞治疗促进人民群众健康，了不得！ (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Tue May 10 03:16:57 2016, 美东)
发信人: buce (buce), 信区: Military
标 题: 习近平：免疫细胞治疗促进人民群众健康，了不得！
发信站: BBS 未名空间站 (Tue May 10 03:14:20 2016, 美东)
新华社 2016-05-10 11:32
26日上午，习近平来到中国科技大学先进技术研究院，观看了高新技术企业科技成果集
中展示。在智能语音、智能机器人、装备制造业、新材料、生物医药、智慧新能源等展
区，总书记同科研单位和企业人员亲切交流，询问科研进展、成果转化、应用前景等。
习近平在中国科技大学先进技术研究院同科技人员交谈时强调，创新居于五大新发展理
念之首。我国经济发展进入新常态，必须用新动能推动新发展。要依靠创新，不断增加
创新含量，把我国产业提升到中高端。习近平指出，我国的经济体量到了现在这个块头
，科... 阅读全帖 |
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s****y
发帖数: 688 | 3 作者：王怀民 鲁伟 发布时间：2008-09-30-08-52 浏览次数: 6528
武汉大学在细胞抗病毒天然免疫领域取得重要进展
近日,生命科学学院舒红兵研究组用表达克隆的方法发现了一个新的在病毒感染诱
导I型干扰素的信号传导过程中具有关键作用的蛋白,研究人员命名为MITA。这是继舒红
兵研究组三年前发现VISA蛋白之后在细胞抗病毒天然免疫领域取得的又一突破性成果,
并于9月25日被免疫学领域的权威杂志Immunity（影响因子19.3）在线发表。
抗病毒天然免疫最重要的方式之一是通过I型干扰素（a/b干扰素）来介导的。病毒
感染细胞后，诱导细胞产生具有抗病毒功能的I型干扰素。病毒感染诱导I型干扰素表达
的分子过程是过去几年中竞争非常激烈的研究领域。
早在2005年，舒红兵研究组及其它三个实验室各自独立地发现了一个在病毒感染诱
导I型干扰素表达的信号传导中不可缺少的蛋白,并被分别命名为 VISA, MAVS, IPS-1和
Cardif。当时的研究结果表明，VISA是连接RIG-I与下游信号传导蛋白的一个接头蛋白
。该项成果被 Sc |
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v*********i
发帖数: 40 | 4 全细胞蛋白做WB。
以前我是这样做的：
转染之后，6 cm 板（5×10^6)直接拿200 ul PBS冲下来，加过量的5 × SDS PAGE
loading buffer （我一般加80 ul），95度煮30 min；然后 13000 rpm 离心 10 min。
基本看不到沉淀。
然后取10 ul 跑胶WB；因为转染起始细胞数目一样，所以基本不调平，看到的beta-
actin就是平的。
现在的老板说我这样做不对，因为没有测蛋白浓度。他要看到我把每个样品的浓度都写
到本子上；还说直接煮不能溶解全部的蛋白（FT）。他很固执，我只好按他的做：
转染之后，6 cm 板用RIPA buffer 800 ul, 加那个Roche Cocktail蛋白酶抑制剂， 冰
上放30 min，然后 13000 rpm 离心 10 min，结果看到大量沉淀。我感觉沉淀跟直接低
速离心收细胞的沉淀差不多。是不是细胞都没破裂啊?
哎，连个成熟的protocol都木有……
谁能给我个完整成熟可靠的呀?说的详细点。
谢谢。
p.s.
我不放心，现在把那个裂解液又拿去超声了；可是超声仪太古老，上面没有能量显示… |
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D******9
发帖数: 2665 | 5 在养人ips细胞时， 发现在好的ips克隆周围有一些长得像FIBROBLAST的细胞，我的ips
已经挑选过了， 现在长在MATRIGEL上， 想知道这些细胞是由HUAMN ips来的， 还是污
染的MEF 细胞？thx |
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s******y
发帖数: 28562 | 6 我们用的也是B16 F10，
细胞用肉眼看是淡淡的灰色（非常不明显的），离心后沉在一起就是中度的黑色。
细胞培养液在新鲜的时候当然是红色的，培养几天如果发黄了就是该换的时候了。
如果你在分养细胞的时候分得不够稀疏（一般应该1瓶分出10瓶来），会让细胞过早达到
confluent 消耗养分过多然后一起死掉。
在我印象中f10 分泌melanin 不是很快，所以你可能会等不到看到培养液变黑就该换溶液了 |
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s******y
发帖数: 28562 | 7 我们做的实验和你们的不一样，我们并不关心颜色所以我没有比较过用a-MSH后
细胞是不是变黑了。
B16我们是在别的实验室要来的。一直在split，没有什么问题。反正这个细胞是
癌细胞，理论上是可以没完没了的传代的。
treat的细胞，也就是control组颜色更黑？假如是的话，α-MSH或IBMX 这一组的
medium 颜色不是黑的吧也就是说没有细胞死吧？ |
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c*******y
发帖数: 1657 | 8 流式细胞测量的是一群细胞的信号，一群细胞内的单个细胞在一定信号范围内有强有弱 |
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o**4
发帖数: 35028 | 9 我转染的时候细胞密度有点低，
转染之后细胞又生长很慢。
现在已经快72个小时了，
还能让细胞再生长么？ |
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i********d
发帖数: 7 | 10 3T3-L1细胞转了lentivirus，用10ug/ml的Blasticidin筛选，现在9天了，LacZ-
Lentivirus转的细胞死的差不多了，能看见单个clone了，不过我自己做的lentivirus
转的细胞还是很多，下面该怎么办？提高Blasticidin的浓度？
或是我这个基因对细胞有保护作用？多谢指教！ |
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s*********6
发帖数: 44 | 11 有些细胞静态悬浮培养一段时间后，会形成很多clumps。怎样区分clump 里的细胞是分
裂来的还是自发地凑在一起的？我记得当年学细胞生物学时Meselson和Stahl用同位素
标记法，子细胞新合成的染色体比母细胞重一些。有没有其它简单的方法，比如说荧光
染色啥的？谢了先。 |
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s******r
发帖数: 2876 | 12 分别转染GFP和RFP，然后在一起养。
有些细胞静态悬浮培养一段时间后，会形成很多clumps。怎样区分clump 里的细胞是分
裂来的还是自发地凑在一起的？我记得当年学细胞生物学时Meselson和Stahl用同位素
标记法，子细胞新合成的染色体比母细胞重一些。有没有其它简单的方法，比如说荧光
染色啥的？谢了先。 |
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w*********n
发帖数: 439 | 13 本人在做新生小鼠心肌细胞的增殖.主要用BrdU标记然后用BD的FITC-BrdU的kit染色，
然后做FACS。
发现基本不work，没有BrdU阳性的心肌细胞。但是在荧光显微镜能看到BrdU染色的心肌
细胞，请问有没有大虾作类似的心肌细胞研究？
多谢， |
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w*********n
发帖数: 439 | 14 多谢大虾
我们把心肌细胞消化出来以后放在体外培养,然后在培养液里面加入BrDU，发现有BrDu
阳性细胞
如果给小鼠注射BrdU，FACS发现只有心脏里面的杂细胞是Brdu阳性， 心肌细胞几乎没
有。 |
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S*****s
发帖数: 287 | 15 你是不是检查一下你的 FACS Buffer？ 比如PBS 的 pH 值，是 1X 还是 10X PBS，FBS
有没有过期，或者 7-AAD 买了多久了？我也用 293T 做 Flow，样品分解成单细胞后
要花六到七个小时染色，然后每个样品里加 7-AAD 做对照。我的样品里 7-AAD
positive 的细胞都不多。我在 Negative 的细胞里 gate 一部分出来作为 P1，P1 一
般都在 70% 以上，另外有一部分 Negative 的细胞 FSC 和 SSC 值都很大我都不分析
了。你这个 50-60% 听起来有点吓人。或者你换一个染料来做这个实验，比如 DAPI？
如果 DAPI 的值和 7-AAD 的不一样说明两个药品当中有一个坏掉了。
AAD+ （做 FACS的时候离 trypsinization差不多5-6小时吧）。刚刚trypsinized的细
胞，然后立即作FACS， 7-AAD+的细胞比例很低，只有1-2%左右吧。 |
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s*****g
发帖数: 7857 | 16 在细胞量大而死细胞多时用Ficoll centrifuge分离.得到悬浮的活细胞.
而量少时就要耐心等待.慢慢长多了,再传代.否则有限的活细胞会丢失很多. |
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s******y
发帖数: 28562 | 17 没有这么做过，我们都是用荧光蛋白的。
如果是用Gal-Lacz系统的话，就必须把细胞给固定了，这样筛出来的就不是
活细胞了.
而且LacZ染色一般都是黑咕隆咚的，属于absorption-based screening,
我不知道一般的sorting device 有没有能力用这种方法来分细胞，即使有，也
需要比较强的光才能分出染色和没有染色的细胞。 |
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d*p
发帖数: 534 | 18 CD19 其实是B cell mark. 治疗的方法就是把大部分B细胞都清除掉，对免疫系统的影
响主要在于hormonal immunity,就是抗体，但是其他部分都还在，实际影响不大，所以
清除正常B CELL 这方面的副作用基本可以忽略。
Tumor infiltrated lymphocyte 本身就有很多是肿瘤抗原特异性的，目前实体瘤免疫
治疗的关键问题不是在抗原，而是怎么把肿瘤的抑制性环境转变为inflammatory
environment. 或者说让肿瘤抗原特异性的T CELL能够在肿瘤环境下正常工作，否则进
去的免疫细胞都将失去功能。
晚期病人扩散以后，放化疗做不到清除这些扩散的细胞，治愈的希望几乎没有，对正常
细胞的损伤非常严重。而T cell能够随血液遍布全身，并具有抗原特异性.FDA近期批准
的ipilimumab (anti-CTLA4)，是目前唯一一个对晚期黑色素瘤有效果的药，除了平均
存活时间延长外，long-term survival提高了10%。 |
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i*****g
发帖数: 11893 | 19 人类唯一的流体（！）器官是血液细胞。血液全身都是，
正统观念和标准观念是，所有血系细胞（T,B,DC,red blood cell, macrophage,
neutrophile, platelet etc etc）都来自HSC。
这个HSC本身又是heterogenity，据老鼠实验，至少可以分为3个系，每个系都可以生成
全部血系细胞，但有不同的下游细胞生成倾向。
生物，够麻烦的。 |
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c**n
发帖数: 73 | 20 很久之前所以既不清楚了
但肯定是转染后过了好几天
用的是polyclonal的细胞作dilution
在dilution之前并没有经过挑阳性细胞这步
我用的是corning 的single cell cloning protocol
你google就能找到
是同一批细胞.
dilution
降低一半表达量也降低一半的细胞是同一批吗？ |
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c******r
发帖数: 3778 | 21 这玩意儿就是一个体力活儿。都是实验室常规。
做起来也简单。就是ls说的。你先不要挑clone。直接pool用药到足够cell，然后seed
到96孔板上。数好细胞数，大概是每个板放50个细胞，就是每个孔0.5个细胞的样子。
seed几个板，4-5个其实就够了。这样大概一共seed了200到250个细胞。还是要在药里
面长，也可以浓度减半。如果够狠，多seed几个板，正常浓度的药也能长起来的。然后
就是说confirm一下表达，挑表达量合适的留下几个clones就可以了 |
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m******h
发帖数: 32 | 22 我想观察细胞内一对蛋白相互作用对ATP的依赖性，因此通过调节ATP的浓度来试试。因
为胞内一般ATP的浓度在1－10mM之间，我闭门造车的想了以下方案请大家帮忙参考：
1，选择已报道的药物，刺激细胞自身的ATP合成或者消耗来改变。但是不知道是否有这
方面的药物？而且ATP背景浓度很高，担心很难数倍的改变其浓度。
2，在medium里加高浓度的ATP，通过detergent或者streptolysin这类的试剂来帮助起
穿膜，从而达到调节胞内ATP浓度的效果。
自己感觉这些方法对细胞的损伤肯定是很大的，但是只要细胞能撑过半个小时，让我完
成实验就好，所以对毒副作用方面不是太介意。
想听听各位的意见建议，多谢多谢！ |
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L****S
发帖数: 76 | 23 可能主要会是缺氧。
CO2 是维持培养液PH (7.4),但是一般培养液都会加入NaHCO3 和HEPES,而且HEPES对酸
碱度的调节作用受CO2 浓度影响小。
细胞自己代谢过程中产生的有害气体？我觉得要看觉体细胞的数目 （细胞数/ml培养液
或者细胞数/cm2）还有细胞的耐受程度。 |
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s******r
发帖数: 2876 | 24 这个depend on你的细胞，如果你的细胞耐粗饲，那没问题。
试一下好了。
谢了。
不过不是担心plasmid的量，而是担心质量
有时候只转很少的细胞，mini prep的量是够的，做max太麻烦
想知道mini的到底能否转染细胞
but |
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w***e
发帖数: 269 | 25 显然不是lipid droplet。lipid 的refractive index比水高
，所以lipid droplet会很亮。如何亮呢？普通的显微镜不用开光源，lipid droplet也
会比背景的细胞亮很多也就很容易看到了。做过脂肪细胞分化的人就会明白，pre-
adipocytes放在显微镜上，不开光源，什么也看不到除了死细胞或者细胞残片。
adipocytes放在显微镜上，不开光源，lipid droplet看的一清二楚。这个图片的所有
结构一样亮，所以那个泡状结构里面是水不是油。还有一个就是感觉了。lipid
droplet有种饱满的质感，这个看起来像是个vacuole之类的东西。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 26 transfection 主要和两个因素有关：
１。膜的活跃程度：喜欢ruffling 的细胞容易转
２。细胞周期状态。频繁处于复制周期的细胞就容易转。
个头大的细胞挺多，但是既好转又容易铺开的。。。我还真不知道。 |
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I***a
发帖数: 13467 | 27 结果是令人兴奋的：本来应该老态龙钟的小鼠全都看起来都很健康：第一批小鼠的各种
衰老迹象都被延缓了，包括白内障、脂肪流失、肌肉萎缩等；第二批小鼠虽然过了大半
辈子才开始吃药，已经发生的衰老迹象无法逆转，但进一步的衰老也被阻止了。而且两
组小鼠的体力和运动能力都很出色。
这让研究者们非常振奋，能毫无危险地将衰老细胞从动物身上移除，为他们打开了很多
新思路：“有一天，我们也许能打破年老和许多疾病之间的联系，从而为治疗老人的慢
性病找到一种革命性的疗法。如果你把衰老程序遏制在了萌芽状态，那你是不是同样遏
制了许多跟年龄相关的疾病呢？癌症、老年痴呆症、动脉硬化、糖尿病、超重和它们的
并发症是不是可以一起打包解决掉呢？”
下一步，梅奥中心的研究者决定在非转基因小鼠身上重试这项试验，看看能否延长小鼠
的寿命。因为参与这次实验的小鼠全都经过基因改造，衰老得比较快，活到十几个月时
就会心脏病发而早亡。之后，他们会开始在其他物种上实验。
如果这种效果能通过进一步研究得到证实，未来的研究方向可能分为两种，一是研制出
能清除人体衰老细胞的药物，二是研制能重新激活免疫系统的清除功能的药。但是，细
胞正常衰老能够... 阅读全帖 |
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x****n
发帖数: 1454 | 28 谢谢!
请问bio-safety hood有特别要求吗? 我们有个a laminar flow hood.其它的你提到的
我们都有. 小屋也可以腾出来, 大概有4*4米. bio-safety hood 需要放在culture
room里面吗?
另外购买或做人类细胞有没有需要什么部门批准? 实验本身对操作者或同实验室的人有
没有健康危害? 因为要用到癌细胞, 所以有点害怕.
现在老板一直在寻找对疾病,包括癌症,免疫系统疾病有恢复作用的食物, 但是发现做人
类实验实在是太贵了, 现在想还是在实验室先做细胞实验, 如果自己的实验室能做, 就
可以自己掌握实验进度, 可以化学分析和细胞实验同时进行.
另外,如果想看看对免免疫系统有没有加强作用, 有没有合适的细胞可以采用? 我看到
有的文献提到natural killer cell. 这个可以买的到吗?
多谢大家!
culture |
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k*********7
发帖数: 49 | 29 最近小弟我需要从较少细胞量（~1000）中提取genomic DNA，但是由于细胞量不多，始
终找不到很好的裂解提取的方法。
希望看到的高手可以教一下哈。
具体情况是这样的：材料是细胞，不是组织。不想使用kit，想自己配置一些裂解液，
比如tris-HCL，SDS，EDTA等，但是不清楚比例啊，加入裂解液后又该如何处理，比如
温度啊什么的。
求救啊，万分感谢，有知道的同学可以留言，也可以给我发邮件。
Thanks |
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e**r
发帖数: 1144 | 30 CHO K1细胞，前一天用150uM H2O2处理过，养了一天，大部分细胞漂起来了，剩下贴壁
的细胞在相差显微镜下看大部分都有两团亮的东西在核的两侧
之前也看到过一次这种东西，那次是因为在DMEM里养了几天，大概是因为没有proline,
所有细胞都变成了这个样子。换成F12养了一天就恢复正常形态了。
谁知道这种亮的东西是什么结构？ 低倍用眼睛看似乎是一些小泡构成的簇
Hela, 293T上没见过这种东西。 |
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t******y
发帖数: 716 | 31 实验中需要用到把原代细胞永生化。不知道有哪位朋友能够提供永生化效率比较高的质
粒或lentivirus。
还有一个问题：永生化质粒表达的蛋白，有些是肿瘤基因，有些是端粒酶，有的是表达
细胞周期的蛋白。有谁知道这些不同的蛋白表达对细胞有何影响。譬如，如果我需要原
代细胞保持分化潜力，希望基因组能够保持稳定，不形成染色体变异，应该选择哪些质
粒？
谢谢 |
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s******y
发帖数: 28562 | 32 这个说得对。
适应环境的变迁有好几种方法，一个是让结构变得更复杂，用同一个机体去
应付不同的环境，这个就有可能会导致多细胞的产生，
另外一种策略是去改变代谢途径／方式来适应环境，这个并不会导致多细胞
的产生。现代的大部分单细胞生物大部分都是已经特化了的单细胞，很难
再从中产生多细胞结构了。
当然，某些小概率下面，在现代应该也还存在从单细胞往多细胞进化的事情，
但是我们并不一定能够观察得到就是了，因为人类的观察能力和范围是有限的，
比方说说不定在某些什么海底火山口里面仍然有这样进化着的事例，但是
我们不知道就是了。 |
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s*****i
发帖数: 315 | 33 HEK293 是人胚肾细胞，应该是间质细胞或是上皮细胞来源的永生化细胞系
293T是经过largeT antigen transform的 HEK293 细胞系 |
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t****g
发帖数: 120 | 34 在做prostate cancer cells的实验，有一个实验结果发现在10%FBS-medium和serum
free medium条件下的结果很不一样，不由得好奇，到底在serum free medium的情况下
细胞会发生什么样的变化？ 我用的是PC-3细胞，在serum free medium里细胞的
adherence和生长都还好，只是显微镜下看细胞的形状有变化。
欢迎大家讨论一下。 |
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G***G
发帖数: 16778 | 35 对一个指定的人，每个细胞所含的dna是完全一个的吗？
这个人的一半染色体来自于父亲，一半染色体来自于母亲
现在发现了Aa genotype
在测定这个genotype的方法是哪一种
1）在染色体中发现了A，也发现了a，但是不知道这个a是和A是否在对立的loci。
2）在染色体中发现了A，并在其对立位置发现了a
好像现在的方法都是用的是1),
所以我想问的问题是，可不可能这个是AA，aa 和Aa的混合体。也就是
他的某些细胞是AA，某些细胞是aa，某些细胞是Aa？ |
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h**********r
发帖数: 671 | 36 长假刚回来。我承认我逻辑更加混乱了。一直有这么个问题纠结：基因表达成蛋白质时
，需要细胞生长吗？比如说E. coli，细胞生长仅仅是稀释作用吗？最简单的IPTG诱导
时，IPTG加得过晚，整个表达量也不会高。那么这个受IPTG诱导的蛋白质的表达，主要
在新分裂的细胞中吗？E. coli的单个细胞也有从小长到大的过程吧？E. coli是不是也
有个“可遗传的诱导状态”？
也许有很多模型解释了，我也没有查。大家能发表点看法吗？多谢！ |
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e**r
发帖数: 1144 | 37 最近用puromycin杀细胞
发现puro超过一定浓度后（3ug/ml左右）,再增加浓度细胞死的反而越来越少了，一直
增加
到几百ug/ml,远远超过正常浓度，存活的细胞仍然是增加的趋势
最极端的，用10mg/ml stock泡了两天，存活的细胞居然比3ug/ml要多
有人注意到过这种现象没？
这是为什么？ |
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C****b
发帖数: 90 | 38 加样之前混合均匀，加入每个孔后，不要马上把板放回培养箱，而是放在静止的桌子上
等45～60分钟后再放入培养箱， 这样细胞会很均匀。
原理很简单。培养箱里有个小马达，为保持恒温，不断工作。这样， 处于悬浮状态的
细胞也会随着不断震动，导致挤在中间。桌面静止一段时间， 细胞靠重力自然沉降，
非常均匀。
不要担心。90分钟细胞没有CO2， 没有关系。
这个方法同样适用于384，96和别的孔板。尤其是对用scope来分析结果的大有好处。
我一直沿用这个方法已经有5年了。
祝好运！ |
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s******n
发帖数: 233 | 39 谢谢回复，但这与细胞周期没关系。我以前发现同样细胞开始可被retrovirus 感染，
但如果长满后不传代，拖延1-2天后，再消化传代后细胞就不被感染，应该和细胞表面
病毒受体变化有关系，但不知怎么解决。 |
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q**********0
发帖数: 335 | 40 Lipofectamine 2000 转染细胞后，发现细胞形态学变化很大，可能是由于
Lipofectamine 2000的高细胞毒性造成的吧。请教， Lipofectamine 2000 转染的细胞
适合作cell cycle analysis 吗？Thanks |
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s******s
发帖数: 13035 | 41 马上用肯定会有影响，这玩意儿还是比较伤细胞的。
你如果要测活细胞的性质，最后恢复一两天至少，如果
测酶估计没事。我就理论分析，自己没做过 |
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q******g
发帖数: 3858 | 42 我觉得你应该先做western，看看你的目的基因表达是否降低。你说，只是生长慢于对
照细胞，很有可能是抑制细胞生长。你可以先用筛选后的细胞来做些试验，MTT，
AnnexinV，cell cycle, colony之类的，看看是否引起apoptosis还是作用于cell
cycle。然后可以做个xenograft看看。从机理上，你要看看这个蛋白调控什么信号通路
，或者和哪些蛋白作用。
如果引起细胞死亡，我还是觉得用inducible system比较好。 |
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l***g
发帖数: 19 | 43 很奇怪啊，H460好像是肺癌细胞吧。我原来用过不同浓度（0-30uM）的cisplatin处理
过A549细胞36小时，细胞凋亡可以检测到cleaved PARP，beta-actin的条带不会受到影
响的，我可以检测出来。我是用的SDS sample buffer直接裂解的细胞。 |
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m******t
发帖数: 44 | 44 有个问题想请教大家，就是能不能对一种细胞做两种转染,比如一种让这个细胞带上
luciferase gene，这样可以做影像，同时在对这个细胞转染一种oncogene, 这样来看
它对细胞的影响。同时做两种转染会不会使得数据分析复杂化，也就是说不容易确定
oncogene的作用，如果将来写成文章的话。 |
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p**********s
发帖数: 72 | 45 受友之托，在美国寻求治疗恶性嗜铬细胞瘤的机会。
******
以下是患者家属介绍的情况：
“嗜铬细胞瘤的英文名字是PHEOCHROMOCYTOMA(PHEO)。具体病情简单叙述一下：男，
1996年发现肾上腺长一瘤子，确诊为嗜铬细胞瘤，当时说是良性的。2007年腰疼厉害，
一检查腰椎第三、四节之间有瘤子压迫。转年做手术，术后能正常生活。后来随着瘤子
的继续发展，不能正常行走。现在每四个月做一次碘131的治疗，可效果不太明显。对
于做手术的地方好象效果不理想。这种病就是分泌的儿茶酚胺过多，没地方释放，就长
在身体里，一碰就会到处乱窜。
患者在北京协和医院看的是内分泌科的专家曾正培，他告诉我们：NH医疗机构或麻省总
医院（MASSACHUSETTS GENERAL HOSPITAL)这两个医院正在临床试验治疗嗜铬细胞瘤的
新药（以前用碘131-MIBG治疗），我们在国内现在就用碘131治疗。具体科室就找肿瘤
科或内分泌科就可以，他那医院肯定知道这个病。
现在主要是了解一下新药的进展程度。如果确认有新药，我们家人亲自去一趟再做进一
步了解。”
**********
我曾试着给MGH的内分泌科... 阅读全帖 |
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f********t
发帖数: 6999 | 46 【 以下文字转载自 Dreamer 讨论区 】
发信人: Dreamer (不要问我从哪里来), 信区: Dreamer
标 题: 细胞的分子生物学的忧郁
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jun 10 19:49:13 2013, 美东)
念本科的时候托在欧洲某国的家人给自己买了一本当时最新版的Molecular biology of
the cell,千里迢迢背到国内，砖一样的书，爱不释手。
折腾了半天托福GRE，考了还不错的分数，又背着这本书去了美国念PhD。不料曾经笑容
可掬的老板不幸是个变态，干了两年一场空，天真的我告诉ta去意，ta连推荐信都不愿
意给。不能再忍受ta，又觉得那间学校研究氛围不够好，加上缺推荐信也不想再多浪费时
间，赌气quit，离开美国，拿了旅游签证去欧洲找出路，仍然背着那本细胞的分子生物
学。
命运多舛，本来以为可以在家人在的国家找到全奖的PhD，其实我的dream lab也在那里
，但也许是我实力不济，也许是我这种丧家犬看着可疑，也许是经济危机，总之几次看
到曙光后无果而终。
现在拿到了另外一个国家研究所的面试机会，却必须回国办签证。咬咬牙，试... 阅读全帖 |
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n***w
发帖数: 2405 | 47 这两年视觉研究的地震不少，
rd8这个新的突变于12年报导出来，对搞视觉研究的震撼很大，所有实验室回去筛选有
没有这个mutation，因为这个mutation和其他的rd突变不太一样的一点是除了直接的导
致视网膜退变，还有一些其他的表型，这个突变在c57bl/6n的老鼠里，c57bl/6j的没有
事儿。以至于之前有用这个6n做的模型发在很好的期刊上的文章，作者立马回去检查，
重复，确保表型和这个突变无关。
而这段时间的地震是RGC-5这个细胞系，大家也许都听过这个细胞，这个最开始是rat
ganglion cell line，但是呢，最近发现，这个细胞系其实没有在originator's实验室
外存在过，现在流传的RGC-5实际上已经mouse origin的cone photoreceptor cell
line。。。。这个很震惊，因为从最开始到现在已经过去了10多年的时间，用这个细胞
株发表的文章也超过了200多篇，也就是说，究竟有多少结论是站得住脚的，我们无法
得知了。
所以几个vision的journal都相继出社论来警告尤其用细胞系来做实验的，建议要用in
vivo或者pr... 阅读全帖 |
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D*a
发帖数: 6830 | 48 细胞培养小白，想看点比较基础的书补一下知识，求推荐点书/资源？比如分化细胞和
干细胞，胚胎细胞的不同点啊，针对不同点需要加什么样的培养基啊什么的。能介绍各
种成分的作用和对细胞影响的最好，不是照着做protocol大全。
多谢~ |
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n***3
发帖数: 663 | 49 有多少细胞飘着？一般情况下是flask都长满了，没有多余的地方贴壁的情况才会有少
量细胞飘着。
做conditioned medium的时候飘着的细胞应该是BM cells。 我一般在配conditioned
medium以后最后一步过滤一下，去掉floating L929 cell. |
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w***r
发帖数: 709 | 50 4) 比如我把细胞养到第10代了，然后冻起来了，再复苏，算p0 还是p10？
still p10 because liquid N2 is not foundtain of youth, and cannot restore
the cell state.
5) 为了能用低代数细胞做实验，可不可以传代时候细胞密度适当低一点多分几个dish
，这样就有足够的低代数细胞做实验了？
No,passage number is used to estimate the cell doubling cycles.
dish
样。 |
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