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e********r
发帖数: 147 | 2 我们用最常用His tag + Ni-NTA（未加detergent）纯化到了一个可溶的细菌膜蛋白（
pET30a, 两个跨膜区）。虽然量很少，但有活性。Western blot和MS都鉴定该蛋白是正
确的。我们用这个蛋白做了论文里所有的实验。诱导条件是12度，24小时，0.5 mM
IPTG。
论文审稿后问题不大，但有个审稿意见让我们说明一下是“怎么纯化得到膜蛋白的”。
我猜专家是做蛋白结构的所以觉得很意外，但我怎么回答他比较合适呢？总不能说“我
纯化到了，所以我纯化到了吧”，这样审稿人会发怒滴，呵呵。请各位给个合理的建议
，谢谢。 |
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e********r
发帖数: 147 | 3 我们用最常用His tag + Ni-NTA（未加detergent）纯化到了一个可溶的细菌膜蛋白（
pET30a, 两个跨膜区）。虽然量很少，但有活性。Western blot和MS都鉴定该蛋白是正
确的。我们用这个蛋白做了论文里所有的实验。诱导条件是12度，24小时，0.5 mM
IPTG。
论文审稿后问题不大，但有个审稿意见让我们说明一下是“怎么纯化得到膜蛋白的”。
我猜专家是做蛋白结构的所以觉得很意外，但我怎么回答他比较合适呢？总不能说“我
纯化到了，所以我纯化到了吧”，这样审稿人会发怒滴，呵呵。请各位给个合理的建议
，谢谢。 |
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e********r
发帖数: 147 | 4 我们用最常用His tag + Ni-NTA（未加detergent）纯化到了一个可溶的细菌膜蛋白（
pET30a, 两个跨膜区）。虽然量很少，但有活性。Western blot和MS都鉴定该蛋白是正
确的。我们用这个蛋白做了论文里所有的实验。诱导条件是12度，24小时，0.5 mM
IPTG。
论文审稿后问题不大，但有个审稿意见让我们说明一下是“怎么纯化得到膜蛋白的”。
我猜专家是做蛋白结构的所以觉得很意外，但我怎么回答他比较合适呢？总不能说“我
纯化到了，所以我纯化到了吧”，这样审稿人会发怒滴，呵呵。请各位给个合理的建议
，谢谢。 |
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i***l
发帖数: 1656 | 5 “不用Detergent，还是可溶的细菌膜蛋白”？
这会是每个人的都有疑问--为什么没有Detergent就能提纯？还有活性？
（你也没说怎么破碎的 哪里表达的，Assuming是大肠，超声波。）
我估计，可能极少数穿莫蛋白和细胞膜在破碎过程中形成MICELLS，然后过柱子时候被你
拿到了。如果NTA柱子挂了蛋白后变成黄色，或者你的Elute是浅黄色，就很有可能是有
膜成分共同被结合，洗脱了。当然如果及少量，也可能看不到颜色变黄。
不怕麻烦的话，可以挑个简单的实验 加温和的Detergent （OG，DM，等等温和但是CMC
大点儿的），看看结果是不是一样。
Pierce的手册里有很好的关于Detergent的介绍 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 6 我是觉得把可溶的也denature比较不可思议
至于包涵体
我觉得很有可能大量表达的时候在细胞里就是局部浓度超级高的
不管后面提纯的时候蛋白表现出来的是可溶还是不可溶
很多时候发现蛋白不可溶
然后就归结为包涵体的有点太笼统的
很多情况下其实跟如何破碎细胞
还有是如何提纯的有很大关系
我就遇到过多次普通protocol下破细胞后不可溶的蛋白（离心后在沉淀里）
换别的提纯方法最后发现其实是可溶的（在上清里）
push |
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发帖数: 1 | 7 九、冶炼
方法一三氧化二铝保护碳电极，水冷铁护套，隔离冶炼土壤岩石。粉碎，填满空隙。
电极，空气不要氮气保护。碳酸钠氢氧化钠溶液吸收废气。电流冶炼。把高电阻岩石投
入低电阻岩浆
1、三氧化二铝保护层，碳芯，渗铝钢，水冷或空冷氮气吹气保护气体。划刻敲碎凝结
玻璃。
2、石墨碳电极高压交（直）流电放电电流加热。
3、二氧化硅蒸发，沸点前，后，2230度。碳化硅管道，高温胶，空冷。
左右移动后置式吹风扇。
烟雾冷却管道，或水冷（帘喷雾）吸收，或负压水冷吸收。二氧化硅水去尘。
空气冷却管道，空、水蒸气混合冷却管道。
出矿。环保。蒸发氯盐去放射性。
如果用空气需要全部吸入碳酸钠溶液中，防止硝酸腐蚀。
换坑。
500千伏高压直流电直流电，即使是花岗岩20万电阻率，10平米5米每秒25mw，25000焦
尔每克，20吨每坑每天，300多万个连坑。
先管道空冷水冷灰尘；吸气风机在碳酸钠池后，气管底孔排气，拍尘，可疏通。多几个
碳酸钠池。酸池吸收，a盐酸水池，b、空冷，c凉水池，d氨水池，e亚硫酸钠池，f碳酸
钠池，再酸洗二氧化硅。竖炭化硅管冷却。酸池盖
蒸发池熔岩水平下降无异常
气流方向控制。
碳电极... 阅读全帖 |
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x****u
发帖数: 44466 | 8 面粉专题：小麦面筋 - [面包]
版权声明：转载时请以超链接形式标明文章原始出处和作者信息及本声明
http://sweetscience.blogbus.com/logs/7764272.html
小麦面筋
根据种子蛋白的溶解特性，可以把这些蛋白质分为四大类：
（1）水溶性蛋白质（即“白蛋白”albumin），可溶于水或者稀的缓冲液（buffer），
遇热凝固，这类蛋白质通常为酶。
（2）盐溶性蛋白质（即“球蛋白”globulin），不溶于水，可溶于盐溶液，比如0.
4mol/L的NaCl溶液，遇热较不易凝固。
（3）碱溶性蛋白质（即“谷蛋白”glutelin），不溶于水，可溶于稀的酸或碱溶液。
（4）醇溶性蛋白质（prolamin），可溶于70-90％的乙醇溶液，不溶于水。
对于小麦而言，其麦白蛋白约占4%、麦球蛋白约占8%、麦胶蛋白（即麦醇溶蛋白）约占
39%、麦谷蛋白约占49%，这只是一个特例的数据，影响蛋白质的比例的因素非常多。麦
白蛋白和麦球蛋白易溶于水，为非面筋性蛋白质；麦胶蛋白（Gliadin）和麦谷蛋白（
Glutenin）不溶于水为面筋性蛋白质。
（上图：麦胶蛋白（ |
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p*****Y
发帖数: 38 | 9 关键词：恶心，孕吐，便秘（constipation），反胃酸（heartburn），易疲劳
35岁，头胎。终于挺进12周了。根据往年的经验，二月里天气就会暖和起来。冬天就快
结束，希望春天不会太远 :)
我的早孕反应从第六周开始。当我从网上读到，百分之七、八十的准妈在孕早期会恶心
甚至孕吐并且一般是从第六周开始，我就知道自己难以幸免（老公安慰我，说我的胃口
一向很好，不会中招。可是 …）。我的身高、体重等等都处在正态分布中心位置的正
负一倍方差之内，概率这东西我恐怕很难逆袭。一开始是恶心、干呕、没有胃口，症状
全天都有但是可以忍受，每天只能吃点青菜豆腐。一到做晚饭的时间就被老公赶进卧室
（我说是小黑屋。老公一下班就卷起袖子包揽厨房的一切事情，很给力，赞一个）。一
来避油烟，二来酝酿一下胃口。这段时间喝水也想吐，所以水小口喝，每天喝得不多。
两周后我发现自己开始便秘（当时还不敢太用力，其实没事），而且走两步就喘。血检
的时候发现红血球偏低。除了孕期荷尔蒙飙升的缘故，这些新状况大概也是自己液体摄
入不够，纤维素吃得少，运动量变小，加上食物种类太少、压根没胃口吃肉（很怀念当
初那个无肉不欢的... 阅读全帖 |
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p****y
发帖数: 23737 | 10 http://www.cw.com.tw/article/print.jsp?id=39726
吃得愈多，活得愈好的超級食物
「你吃什麼，就像什麼（You are what you eat.）。」沒錯，你選擇的食物，攸關你能
不能活得有勁，神采奕奕終老。
原文刊登於康健雜誌2003年2月，51期。
當你挾一筷子菠菜，啃一口蘋果，不但吃進美味，還能輕鬆獲得人人夢寐以求的青春之
鑰。每天三餐，每年就有一千多個機會選擇延緩老化的秘方，或者快老易生病的垃圾食
物。
活得好又長壽，需要多樣化的飲食。
美國紐約市立大學一份超過萬人的研究發現，飲食種類最單調的人，通常很少吃蔬菜水
果的人，死亡率最高。
許多研究也證實，即使全天營養素可從濃縮飲料、維他命丸、代餐條獲得，對健康最有
益的還是能提供色香味，引起感官興奮的各類食物。因此，美國飲食協會（ADA）建議，
要增進健康、降低罹患隨年齡而來的慢性疾病風險，首要之務是攝取各式各樣的天然食
物。
縱然要吃多種食物，想要健康且活力充沛，即使到老都能身強力壯，最歷久且經得起考
驗的天然超級食物，那就是蔬菜、水果、全穀類、核果。
蔬菜吃得愈多，活得愈好
首先，... 阅读全帖 |
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H********g
发帖数: 43926 | 11 他这个测定法估计是测可溶的自由离子态的钙质。汤里除了离子态的钙还有跟各种化合
物形成配合物的钙，还有暂时不溶的钙，这些是不容易测出来的。但是这些不溶的或者
非自由离子态的钙仍旧可以悬浮在汤里被人喝掉。他这个实验并不说明问题。
就钙本身来说，骨头是一个大的固体储存器，其次大量的钙或者以离子形式存在，或者
跟蛋白质和一些有机分子形成了配合物，存在各种细胞里，也算是钙库的一部分。其中
肌肉里的钙含量是很高的。所谓骨头汤，最终实际就是骨骼肌和骨头和肌腱里的胶原部
分水解以后，可溶物和不可溶物的混合体。喝汤的时候，还在骨头本身里的钙当然是没
有进入到汤里，但是骨骼肌是部分进入汤的，骨骼肌也是要被吃掉或者喝掉的，所以骨
头汤的确能补钙，只不过钙大部分来自于肉。 |
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r****o
发帖数: 105 | 12 本文献给YL
（八）”液体DEAE“
绕了这么大一圈，现在再回到第一个模块的实验来。前面提到Dr.Burgess要我们
试Gudn HCl溶解sigma32之后的重折叠，结果很糟糕。我们接着试了用sarkosyl做
变性剂的蛋白重折叠。步骤和前一个类似，只是这一次是突然稀释至25倍体积。效果
好了很多，至少没有浑浊现象了。接着我们用Poros HS 50，一种阳离子交换柱，
来把可溶的sigma 分离了出来。为什么这一次用Poros HS 50 而不是前面用的阴离
子交换柱呢？因为sarkosyl带负电，会与阴离子交换柱结合得很好。再加上sigma32
很奇怪，既有负电的表面，又有带正电的表面，所以可以用阳离子交换柱。值得一提
的是绝大部分蛋白质都是偏酸性，所以阴离子交换柱用的比阳离子交换柱频繁得多。
好了，聊完离子交换柱，现在回到Dr Burgess要我们作的另一个很重要的实验。
Sigma32在大肠杆菌过表达的时候，绝大部分都是inclusion body,但是也有一部分
是可溶的。这些可溶的sigma 32可以和细菌体内的Core RNA polymerase结合形
成复 |
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x*****o
发帖数: 441 | 13 我在表达有的可溶蛋白的时候可能是浓度太高,也形成包涵体,但是我用supernant纯化
产率也不错. 但是这个蛋白是带his-tag的.其他的蛋白不管可不可溶都没有tag,可能提
纯有问题.
想问一下是通过破碎细胞和提纯办法使好像不溶的蛋白可溶的? |
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C*******e
发帖数: 4348 | 14 也不是所有时候都能把某种方法下不可溶的蛋白变成另一种方法下可溶的
还是要看蛋白的
我只是举个例子说明，所谓“包涵体”不能跟“蛋白不可溶”画等号
我觉得大量过表达外源蛋白的时候
E.coli要那么些蛋白也没有用
也不知道该把它们怎么办
结果就都堆在一起
局部浓度很高
电镜下看就成了“包涵体” |
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b********c
发帖数: 161 | 15 2个性质,大小,pI，蛋白序列都非常相似的蛋白（paralogs）A 和 B，用的pET15b
vector， 在e.coli(DE3)中加IPTG诱导表达，然后粉碎细胞后，提取上清液可溶总蛋白
跑SDS-PAGE,A可以看到诱导的目的蛋白， 但B看不到诱导的条带。 直接load这2个蛋白
的诱导前和诱导后的 crude cell culture，A和B都可以看到诱导后的目的蛋白。所以
我不知道为什么B蛋白在粉碎细胞后不在可溶蛋白部分，甚至一点都没有，如果是形成
了inclusion body，难道一点都不剩在可溶部分里面？
我测过序列，都是正确连接的，而且用 crude cell culture做相关的生化实验，也发
现了这两个酶的效率是很高的。 |
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o***s
发帖数: 42149 | 16 图为“梨状元”。 李庆盛 摄
评审组对参选的莱阳梨含糖量进行测评。 李庆盛 摄
山东莱阳“梨状元”拍出59800元高价。 李庆盛 摄
“59800元，第三次！成交！”5日上午，随着拍卖师一锤定音，重达639.4克的山东莱阳“梨状元”以59800元人民币的价格被一位买家拍得。
5日一大早，来自莱阳各地的39位梨农带着精挑细选的100余个莱阳梨，来到莱阳梨的原产地——照旺庄镇西陶漳村，参加“梨状元”评选及拍卖。
据悉，“梨状元”评选标准不光看重果重、品相等外在指标，也包含了含糖量、可溶固形物含量等营养指标，综合评分最高者才能摘得“梨状元”桂冠。
经过专家组的综合评定，照旺庄镇后照旺庄村梨农王文朝选送的梨，凭借639.4克的果重、17%的糖分指标和最高的可溶固形物含量脱颖而出，获得2013年莱阳“梨状元”。
随后，20余位客商参与了“梨状元”拍卖。经过20多轮报价，来自山东日照的客商以59800元的高价将“梨状元”收入囊中。
据了解，此次拍卖拍得的钱款，将全部捐献给慈善机构，用于社会福利事业。
近年来，梨乡山东莱阳通过与中科院建立莱阳梨示范种植基地等方法，不断加强品种培育，使莱阳梨的品质进一... 阅读全帖 |
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m**d
发帖数: 21441 | 17 这个配合物的内界是六氰合亚铁（二价铁），很稳定，呈现-4价，铊应该进不去。
外界是金属离子：可以是三价铁，也可以是其他金属。如果是碱金属（钠，钾），那么
配合物可溶。如果是比较重的金属，那么配合物不溶，比如外界金属离子只有铁（六氰
合亚铁酸铁），这个配合物就不溶。可溶的普鲁士兰的外界金属离子是铁离子（三价）
加上一个钾离子，这个钾离子可以被铊（正一价）替换，一旦替换这个配合物就不溶了
，也就脱离了人体。
唯一的问题是一旦不溶，配合物就会沉积在人体里，或者堵塞在肾脏里面了，不知是如
何排出的。有可能是不溶配合物形成胶体，仍然可以通过人体代谢排毒系统进入肾脏排
出，或者进入消化道，在消化道里面形成更大的颗粒而不再进入人体，从而由粪便排出。 |
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f***y
发帖数: 4447 | 18 一个颜宁能顶十个千人
http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2017/6/378809.shtm
2017年6月8日，清华大学生命学院、结构生物学高精尖创新中心颜宁研究组在《细胞》
(Cell)杂志在线发表了题为《人源脂类外向转运蛋白ABCA1的结构》（Structure of
the Human Lipid Exporter ABCA1）的研究论文，首次报道了胆固醇逆向运输过程中的
关键蛋白ABCA1近原子分辨率的冷冻电镜结构，为理解其作用机制及相关疾病致病机理
奠定了重要基础。
胆固醇广泛地存在于高等动物的各类组织细胞当中，它不仅是细胞膜、血浆脂蛋白的重
要组成部分，也是包括胆酸、维生素D、类固醇激素在内的许多特殊生物活性分子的前
体化合物。但是，人体内过量的胆固醇积累会促进血管动脉粥样硬化的发生和发展，并
有可能导致严重的心脑血管疾病（如冠心病及中风等）。正因为胆固醇对于人体健康具
有两面性，所以细胞内的胆固醇平衡(cholesterol homeostasis)对于维持人体的健康
是必须的。细胞内的胆固醇平衡涉及一系列受严格调控的过程(图1)，例... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 19 十四、矿产冶炼系统
1、 集中挖一地，运河、水库、蓄能电站。
2、 矿产公司分布在电厂，不集中。
3、 空调服，制冰机冰服。
4、 先有炉盖电极防尘。后无炉盖电极提高到2000度。封闭室水冷空冷系统
5、 封闭室密封门，二氧化碳注入吸出系统。
6、 输出二氧化碳管道。每秒2.5立米。管道通多个罐的上端。玻璃钢罐或复合罐。
7、 硅酸钠池对半使用。二氧化碳气体循环系统。液体注入吸出系统。反应时间结
束后吸出压滤。
8、 离心材料，钛，硬塑，玻璃钢，等。
9、 压滤材料，钛，硬塑，铁，塑料复合等。碳化硅、氮化硅轴承。
10、 碳酸钠溶液300度水蒸气蒸发。玻璃管道冷却。数据没问题。
11、 活动转移轨道。
12、 沸腾床？结合光热。玻璃罩。控制在200度，多倍碳酸钠堆列。不完全蒸发可
后期电加热彻底蒸发水分。
13、 冶炼室冷却，水冷。胶密封高温塑料。
14、 轨道交直流电极。
15、 冶炼蒸汽空冷
16、 电厂空冷冷却用金属数量没问题。
17、 1万平方公里镜面2000亿吨水。
18、 ... 阅读全帖 |
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n**m
发帖数: 7872 | 20 介绍一下steel cut oat吧（知道的就略过好了，呵呵）。
oatmeal有三种，instant的，热水一冲就好，old fashioned，是压扁的，一片一片的
，steel
cut的，就是把oat切成几块，煮出来既creamy又有嚼头，很好吃，而且有丰富的可溶和
不可溶
fiber。
而且，很方便做。
1. 1 cup steel cut oat + 4 cup water，煮开一会儿（<1 min）
2. 关火，盖盖子闷一会儿（到oat吸满了水，水几乎看不到了）
3. 小火，不时搅一下，几分钟就好
可以做一大锅，每次吃的时候盛出来一点，微波一下就好了。可以加牛奶，红糖，葡萄
干，or 咸菜，
or whatever you want，也可以什么都不加。 |
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y*****8
发帖数: 18140 | 21 请问行家妹妹sea salt 或者 ESPON SALT是不是可溶的钙盐？盐水浇地好不好？
blossom end rot spray.
前一阵lun版斧说有个干燥剂也行，我猜应该是含CaCl2的。反正你能弄到可溶的钙盐都
可以。 |
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r***u
发帖数: 1272 | 22 第1章预备篇
1:冬季不热车
傻瓜行为：冬季时不热车，着车后直接冲上马路，是许多新司机常儿的驾驶错误。这种
行为对发动机的损害很大。
影响：冬季气温很低，特别是中国的北方地区，冬季的最低气温可以达到-30度以下，
而发动机的正常工作温度在90度左右，这样就形成了一个巨大的温差。如果此时着车后
，直接上路，对发动机的影响很大。
发动机在正常工答温度时，机油粘度最佳、汽油充分汽化、发动机磨损最小、尾气排放
正常。
假如你的汽车在一个低温的环境里，机油会变得相对粘稠，此时的机油会成为发动机强
大的阻力不但不能起到正常的润滑效果，还会增加发动机的磨损，同时增加不必要的油
耗。所以冬季出车前智谋暖车是十分必要的。
正确方法：
着车后等一会再出发，具体等待多久要看室外的温度、停车位置、停车时间等因素。具
体标准就是看水温表，一般轿车的水温表起始温度都在60度左右，热车只要看到水温表
开始动了就可以正常行驶了，不要等到进入归佳的工作温度这样同样会增加你的油耗，
浪费不必要的时间。
不过刚刚上路，归好不要做激烈的驾驶，因为轮胎和变速箱同样需要一个预热的过程。
2．没完没了地热车
傻瓜行为：
冬季为了让... 阅读全帖 |
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a*******y
发帖数: 51 | 23 “按照近期朱令父母披露的情况，朱令二次中毒被化验出来时中毒剂量巨大，推算超
过致死量几倍。换血八次还有大量毒素，这是一个不断投毒的过程，需要让她日日服用
才可以，如果是急性的会有激烈的肠胃反应或直接被毒身亡。需要在朱令在校的11天多
次投毒又进一步缩小了可能有机会的人的范围。请问@平安北京 ，警方当时是否采纳这
一证据，如没有是否国内权威专业机构对此的证词和学术分析可以作为证据。””
这里面贝的一个判断是非常具有蒙蔽性的。首先，铊盐的致死量是 10～30 mg/kg，对
于50千克的一个成年女生来说，致死量就大约是0.5~1.5g。若假设凶手的投毒量是十倍
，那么是5~15g之间。而实际上，铊盐极易溶于水，温度上升时溶解度快速上升，从溶
解度数据表上看:
氯化铊 3.92g/100g (20度) 57.3g/100g (100度)
硝酸铊 9.55g/100g (20度) 414g/100g (100度)
硫酸铊 4.87g/100g (20度) 18.4g/100g (100度)
碳酸铊 5.2 g/100g (20度)
碳酸氢铊 500g/100g (20度)
氟化铊 78.6 ... 阅读全帖 |
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r****o
发帖数: 3918 | 24 水粉不是丙烯。。
水粉叫gouache
水粉干了可溶，丙烯干了不可溶 |
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x*****o
发帖数: 441 | 25 这个我也不明白,所以想乘机问问.
因为是提纯一个系列ribosomal protein, 有的可溶有的不溶. 不知道是不是图省事,都
是一个方法纯化,或者没有更好的纯化方法? 实验室传下来的protocol 就是这样的.因
为我是新来的,所以也不知道原委.
实验室的有人说是包含体提出来的比较纯.所以即使可溶,也加长express 的时间,push
protein to inclusion body. 这样做是不是不好呢? |
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e****s
发帖数: 1125 | 26 像楼上说的，一般有可溶的就从可溶的里面提。
但你的Case比较特别点。关键是活性，只要蛋白有很好的活性就不管怎么提的了。
我提蛋白的第一原则：If it works, don't bother to change anything.
Inclusion body 提出来的纯一些可能和目标蛋白在包涵体里的比重高有关系。
push |
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Z******5
发帖数: 435 | 27 不过你的既然能测到活性，应该还是有可溶的。 很有可能是可溶的部分量很少，要不
你把裂解液上清泡脚后做银染看看。
还有一种可能，看你的描述，难道另一个蛋白是分泌到培养基中了？ |
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b********c
发帖数: 161 | 28 表达的是外源蛋白不是内在酶。多谢楼上几位的回复， 我其实就想在可溶上清里面找
到蛋白而已，因为我太怀疑全部表达蛋白都跑到inclusion body 里面去了。而且类似
的4，5个蛋白基本都在可溶上清里面提纯的出来。 |
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b********c
发帖数: 161 | 29 多谢大家的分析,我终于找到原因了,我前2次做sonication做的不充分,结果细胞根本没
有完全裂解,今天重新做了次,就看到了可溶部分的蛋白了,但还是有一部分在pellet里
面.不过可溶部分的就够我用了.
真是太坑大家了,实在对不起. |
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p****s
发帖数: 3153 | 30 我觉得这老板胡出主意，要是真菌植物那么好做大家都还用大肠杆菌干嘛？关键你没说
清楚，蛋白是可溶的还是在包涵体里？如果是可溶的为什么能用包涵体复性？“切”是
什么意思？cysteine这种东西不能用过氧化氢吧，很容易氧化成磺酸。以前没人做过这
个蛋白么？找找类似的文章。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 31 表达出来的蛋白可溶么？
如果可溶，可能你这个蛋白成二聚体或者多聚体什么的，然后正好把
his tag 档住了。
对于这种情况，用GST 正好。 |
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R*****o
发帖数: 12 | 32 表达蛋白和peptide没啥大的区别，文献中报道利用蛋白做抗原最后产生的也是1-2个优
势表位且以线性表位为主。不过peptide最大的问题应该是预测的线性表位是否准确的
问题，所以要是做一条肽的话成功率会很难保证，很可能Elisa识别peptide很好但是不
能识别内源。不过如果预测好一点或者多选择几条的话，应该还是不错的。
另外有的公司也提供可溶表达的服务，比如上面说的Abmart，可以利用可溶表达蛋白和
多肽两种方法同时做。 |
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z******i
发帖数: 120 | 33 不过我还是想问，你说的“先让你的蛋白不沉淀了再说”是指让A+B在一起不沉淀了再
对，是这个意思。
所以，如果换CONSTRUCT的话，可能从根本上解决这个问题。 可能是蛋白DOMAIN的选择
或者DOMAIN边界选择的不好造成的。从个人经验来说，可能最终还要走这一步。只是大
家都普遍不愿意走。
MBP 通常对蛋白结构没有太大影响，MBP本身很容易在通常的BUFFER条件下FOLD的很好
单体，因此与GST相反，会“稀释”一下LOCAL的A+B 浓度（如果A B 结合的话），希望
可以使你的A+B可溶
NUSA可溶性更强，但对这个TAG研究的不多，可以试试。LZ先让你的蛋白A+B可溶了再说
，不然无法往下走。
所以回到那个建议，A的BOUNDARY 选的不对。 LZ如果不愿挑战全长的话。不妨重新设
计一下这个DOMAIN 的CONSTRUCT.
或者走另一端，选择更小的区域，如果能找到一个小段的PPT 和B结合，也是不错。 蛋
白小了，加上TAG就很好HANDLE.但这只能说是个妥协的方案。
另外您的A蛋白能测下CD 或者DLS吗。有SAXS 或者 NMR 简单扫一下就更好。 但这都比
... 阅读全帖 |
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W*****o
发帖数: 1780 | 34 表达eGFP融合蛋白，破碎细胞之后，融合蛋白总是有很大一部分是不可溶的。如何提高
表达可溶eGFP蛋白？ |
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x*******6
发帖数: 994 | 35 如何分析粒度分布可溶于水的颗粒的粒度分布。另外，如果有两相混合（其中一相可溶
于水）的粉末，怎样分析混合均匀性？ |
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x*******6
发帖数: 994 | 36 如何分析粒度分布可溶于水的颗粒的粒度分布。另外，如果有两相混合（其中一相可溶
于水）的粉末，怎样分析混合均匀性？ |
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x*******6
发帖数: 994 | 37 如何分析粒度分布可溶于水的颗粒的粒度分布。另外，如果有两相混合（其中一相可溶
于水）的粉末，怎样分析混合均匀性？ |
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s*****i
发帖数: 146 | 38 先前我问了一个关于他们溶解性的问题，后来我突然想到是不是里面PLA-PEG 的比例也
会影响溶解性？如果是的话从可溶到不可溶（溶剂为水，或者CH2CL2 或者DMF）转变点
PLA/PEG ratio是多少？ 有没有大牛指点一下？
还有就是 我将聚合物沉淀在乙醚里面，得到的是粘粘的，粘在哪里都是，也不好洗下
来，我看见既有用diethyl ether/hexane or diethylether/methanol来沉淀的，是不
是这样得到的聚合物形态好？如果是的话一般混合溶剂比例大概多少？
问题比较多，因为是新手，大家不要见怪，谢谢大家！ |
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s****e
发帖数: 2934 | 39 ☆─────────────────────────────────────☆
shaxixi (stupid) 于 (Tue Nov 14 15:16:44 2006) 提到:
先前我问了一个关于他们溶解性的问题，后来我突然想到是不是里面PLA-PEG 的比例也
会影响溶解性？如果是的话从可溶到不可溶（溶剂为水，或者CH2CL2 或者DMF）转变点
PLA/PEG ratio是多少？ 有没有大牛指点一下？
还有就是 我将聚合物沉淀在乙醚里面，得到的是粘粘的，粘在哪里都是，也不好洗下
来，我看见既有用diethyl ether/hexane or diethylether/methanol来沉淀的，是不
是这样得到的聚合物形态好？如果是的话一般混合溶剂比例大概多少？
问题比较多，因为是新手，大家不要见怪，谢谢大家！
☆─────────────────────────────────────☆
shaxixi (stupid) 于 (Wed Nov 15 16:28:22 2006) 提到:
今天作了沉淀,试了一下 diethyl ether/methanol 85 |
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x*******6
发帖数: 994 | 40 如何分析粒度分布可溶于水的颗粒的粒度分布。另外，如果有两相混合（其中一相可溶
于水）的粉末，怎样分析混合均匀性？ |
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n**m
发帖数: 7872 | 41 介绍一下steel cut oat吧（知道的就略过好了，呵呵）。
oatmeal有三种，instant的，热水一冲就好，old fashioned，是压扁的，一片一片的，steel
cut的，就是把oat切成几块，煮出来既creamy又有嚼头，很好吃，而且有丰富的可溶和不可溶
fiber。
而且，很方便做。
1. 1 cup steel cut oat + 4 cup water，煮开一会儿（<1 min）
2. 关火，盖盖子闷一会儿（到oat吸满了水，水几乎看不到了）
3. 小火，不时搅一下，几分钟就好
可以做一大锅，每次吃的时候盛出来一点，微波一下就好了。可以加牛奶，红糖，葡萄干，or 咸菜，
or whatever you want，也可以什么都不加。 |
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F*V
发帖数: 3978 | 42 1月14日，广西某艺术院校两名同一宿舍的女生突然出现中毒现象，经送医院检查，
是亚硝酸盐中毒。两女生的室友曹某落网后称，她因受不了嘲讽欲服毒自杀，在倒水过
程中不慎将亚硝酸盐掉入饮水机里。曹某喝了一口含亚硝酸盐的水后放弃轻生，而两名
室友因饮水而中毒。2月14日，记者从南宁市青秀区人民检察院获悉，曹某因涉嫌投放
危险物质罪已被批准逮捕
蹊跷
两名女学生喝水后中毒
1月14日上午9时许，广西某艺术院校大一学生丽丽(化名)起床后，从宿舍里的饮水
机倒了一杯开水喝，然后赶去老师那儿盖一个章，准备回家。然而，大约10分钟后，她
就晕倒在老师办公室门口。老师赶紧叫校医务室的工作人员来检查。因丽丽没吃早餐，
医务人员以为她是低血糖造成的，便开了一瓶药，并让她喝水、吃点粥。可丽丽还是觉
得头晕，在回宿舍的路上蹲了下来。
这时丽丽的好友曹某刚好路过，便询问她情况，并称是工业盐中毒，随后还跑上医
务室拿来约20粒的维C，称吃这个可以解毒。不过丽丽不敢多吃，只吃了6粒，但直到当
天下午2时左右，病情也没有好转，于是她要求到医院检查。曹某便告诉她，是她早上
喝的水里有工业盐，那工业盐是她放进去的。
在曹某等... 阅读全帖 |
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s****r
发帖数: 31686 | 44 铊是一种化学元素，它的化学符号是Tl，是剧毒的金属。它的原子序数是81，稀散元素
之一，以微量存在于铁、锌的硫化物矿中。铊很软，可以用小刀切动。
目录 [隐藏]
1 性质
2 用途
3 毒理学
4 注释
5 参考文献
6 外部链接
[编辑]性质
铊是一种柔软的银白色金属，在潮湿空气中易被氧化，易溶于硝酸，不溶于碱。
铊在化合物中形成+1和+3价，+1价的亚铊化合物比较常见，大多数可溶于水（包括氢氧
化亚铊），+1价的亚铊化合物有剧毒，Tl+能被亚硝酸钴钠沉淀(沉淀为Tl3[Co(NO2)6])
。+3价的铊化合物比+1价的亚铊化合物更难形成，+3价的化合物有强氧化性，可以将单
质银氧化。
铊的化合物有毒，能导致慢性或急性的脱发症，严重的会导致死亡。治疗铊中毒可以用
普鲁士蓝片剂使铊与之反应生成不溶物排出人体。
[编辑]用途
铊盐，如磷酸鉈，可作为杀虫剂，鉈亦可作為捕鼠藥的原料，但因它是致癌物质，很多
国家已减少或停止使用铊作为作杀虫剂或捕鼠藥。但近年來，仍有許多下毒兇殺案，發
現兇手使用含有鉈的殺蟲劑或捕鼠藥，例如发生在清华大学的朱令铊中毒事件、日本的
女高中生鉈凶殺案[1]，作為犯... 阅读全帖 |
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o***s
发帖数: 42149 | 45 两女生饮水中毒 室友涉案被逮捕
事发广西某艺术院校，嫌疑人称自己受不了嘲讽欲服毒自杀，在倒水时不慎将亚硝酸盐掉进饮水机里
1月14日，广西某艺术院校两名同一宿舍的女生突然出现中毒现象，经送医院检查，是亚硝酸盐中毒。两女生的室友曹某落网后称，她因受不了嘲讽欲服毒自杀，在倒水过程中不慎将亚硝酸盐掉入饮水机里。曹某喝了一口含亚硝酸盐的水后放弃轻生，而两名室友因饮水而中毒。2月14日，记者从南宁市青秀区人民检察院获悉，曹某因涉嫌投放危险物质罪已被批准逮捕
蹊跷
两名女学生喝水后中毒
1月14日上午9时许，广西某艺术院校大一学生丽丽（化名）起床后，从宿舍里的饮水机倒了一杯开水喝，然后赶去老师那儿盖一个章，准备回家。然而，大约10分钟后，她就晕倒在老师办公室门口。老师赶紧叫校医务室的工作人员来检查。因丽丽没吃早餐，医务人员以为她是低血糖造成的，便开了一瓶药，并让她喝水、吃点粥。可丽丽还是觉得头晕，在回宿舍的路上蹲了下来。
这时丽丽的好友曹某刚好路过，便询问她情况，并称是工业盐中毒，随后还跑上医务室拿来约20粒的维C，称吃这个可以解毒。不过丽丽不敢多吃，只吃了6粒，但直到当天下午2时左右，病情也没有... 阅读全帖 |
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c***s
发帖数: 70028 | 46 亚硝酸盐是一种有毒的工业用盐
亚硝酸盐，一类无机化合物的总称，主要指亚硝酸钠。亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。由亚硝酸盐引起食物中毒的几率较高。亚硝酸盐是剧毒物质，成人摄入0.2～0.5克即可引起中毒，3克即可致死。
据广西新闻网2月14日报道，南宁市青秀区人民检察院批准将广西某艺术院校女生曹某逮捕。曹某因为将亚硝酸盐投入饮水桶中致两名同舍女生中毒，涉嫌投放危险物质罪。
1月14日，广西某艺术院校两名同一宿舍的女生突然出现中毒现象，经送医院检查，是亚硝酸盐中毒。两女生的室友曹某落网后称，她因受不了嘲讽欲服毒自杀，在倒水过程中不慎将亚硝酸盐掉入饮水机里。曹某喝了一口含亚硝酸盐的水后放弃轻生，而两名室友因饮水而中毒。
1月14日上午9时许，广西某艺术院校大一学生丽丽(化名)起床后，从宿舍里的饮水机倒了一杯开水喝，然后赶去老师那儿盖一个章，准备回家。然而，大约10分钟后，她就晕倒在老师办公室门口。老师赶紧叫校医务室的工作人员来检查。因丽丽没吃早餐，医务人员以为她是低血糖造成的，便开了... 阅读全帖 |
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i***s
发帖数: 39120 | 47 南宁也曝校园投毒案
习惯网络生存的一代缺乏生命教育
复旦投毒案的宣判备受社会关注，近日发生在广西南宁的一起高校女生饮水中毒事件又引得舆论一片哗然。
2月16日，《南国早报》披露了一起高校女生由于受不了舍友嘲讽，企图用亚硝酸盐自杀，结果误伤舍友的案件，当事人曹某日前已被南宁市青秀区人民检察院以涉嫌投放危险物质罪批捕。在数百家新闻网站转载这一事件的背后，是众多网友的唏嘘感慨：
“不管是有意的，还是无意的，都要善待自己，宽恕别人，珍惜生命。”
“一点小事就想葬送青春生命，太脆弱了！”
“要是被判刑，前途都没了，真担心这姑娘的心理承受不了。”
……
花样年华的悲歌为何一再上演？这起极端个案的背后，究竟折射出当代大学生的哪些心灵缺失？
“我不是故意投毒的”
“这名学生被刑侦人员带走后，公安机关一直不让接触，我们想了解她现在的情况也问不到。”2月17日，广西艺术学院党委学生工作部部长秦记洪向中国青年报记者介绍了事发经过。
1月14日傍晚，秦记洪和学校的相关负责人突然接到一名辅导员老师打来的电话，说有学生饮水中毒正在医院治疗。意识到事态严重，他们马上赶往广西医科大学第一附属医院急诊室进行处置，并打1... 阅读全帖 |
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c***s
发帖数: 70028 | 48 安志杰与JC
据香港媒体报道，恭喜！恭喜！27岁Jessica C.（JC）与39岁安志杰的爱情结晶品昨天出世，JC在美国芝加哥采用无痛分娩，生下重7斤4两、身长49.5厘米的女婴Tessa，母女平安。初为人父的安志杰看着女儿出世感动落泪，感激JC怀胎10月。他自觉现在有老婆有女，人生责任大很多，5月会回港拍电影赚奶粉钱。
无痛分娩囡囡Tessa身长19寸半
JC与安志杰前年11月曝出恋情，去年10月，安志杰在马尔代夫向JC求婚成功，JC并宣布已怀孕5个月；两人的婚礼暂定于今年10月举行，地点选在香港或美国。JC近月在美国待产，前晚她在微博上传摸着肚的照片，表示会怀念BB在她肚里面的日子。昨午即传来她已诞B女的喜讯，她的经理人向传媒报喜：“JC于3月23日诞下Tessa，无痛分娩，母女平安。”她透露B女重7斤4两、身长49.5厘米。由于JC刚生完B女，目前要休息。
新手爸爸5月回港赚奶粉钱
安志杰荣升爸爸难掩喜悦，他透过经理人表示女儿在芝加哥时间凌晨零点41分出世，是个小胖妹，重7斤4两。他初为人父心情很感动，多谢JC怀胎10月，帮他生爱情结晶品。他见到BB女出世时，忍不住流泪。他自觉... 阅读全帖 |
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i***s
发帖数: 39120 | 49 前不久，来自北京的张女士在上海做完双眼皮整形手术后，到虹桥机场准备乘机离开，领登机牌时，吉祥航空地面工作人员要求其出具医院证明。后因整形医院非三甲医院，不符合民航乘机相关规定，张女士登机被拒。在和吉祥航空地勤人员交涉中，其打了对方三耳光。经警方协调，双方私了，张女士赔偿对方8000元。
晨报记者了解到，乘坐飞机对乘客的身体情况有一定要求，尤其是手术后的乘客，乘坐飞机会对伤口有不利影响，因此民航部门规定乘客须出示相关的医学证明材料才可获准登机，否则航空公司有权拒绝其登机。此外，对于整形后，身体面貌与以前变动较大者，要及时到公安机关更新身份信息。
当事人：
最初没要求三甲医院证明
前日，晨报记者联系到当事人张女士，她讲述了事情经过。4月22日，她和朋友两人在上海“鲁南门诊”做完双眼皮手术。23日晚上8时许，两人来到上海虹桥机场2号航站楼吉祥航空处办理登机牌手续。此时，公司地面工作人员要求其出示医院证明。张女士立即联系整形医院工作人员微信拍照传过来。工作人员说图片不符要求，要传真过来。由于当时医院没有传真机，不能赶在停止办理登机牌之前传过来，所以机场工作人员建议她们改签到24日同一航班，届时... 阅读全帖 |
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c***s
发帖数: 70028 | 50 一眨眼，2017已过去一半。这期间，“谣言”还是时常出现。而且还多了一种新的常见传播形式，就是用视频来传谣。
今天，小编就整理出了这半年中的十大朋友圈谣言，一起来看看吧。
朋友圈十大谣言
1、肉松面包上的肉松是棉花做的
谣言类别：失实报道
欺骗指数：★★★★★
危害指数：★★★★
谣言内容：
5月下旬，多段浸泡肉松面包上的肉松视频在网上流传，拍摄者来自不同地区，但内容基本一致：买来肉松面包或糕点后，将上面的肉松泡入水中，肉松在水中变成白色絮状物体，拍摄者声称这些肉松其实是棉花做的，并用白色絮状物可用打火机点燃作为证明。
真相：
国家食药监局的官方微信平台“中国食事药闻”对“肉松饼包棉花”这类视频进行了辟谣：肉松和棉花二者成分不同，口感也存在很大差异，用棉花冒充肉松几乎不可能。
肉松的本质是肌肉纤维，主要成分为蛋白质，放入嘴里一咬就会融化，口感松软。而棉花的本质是植物纤维，主要成分为纤维素，是一种不可溶的纤维，虽然看上去也很松软，但嚼不烂。也就是说，真用棉花冒充肉松，一吃就会被识破。
相关专家还指出，视频中所使用的“火烧”鉴别法看似科学，其实也不靠谱。食物可以被点燃是一种普遍现象，因为... 阅读全帖 |
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