b*******0
发帖数: 125 | 1 采用了一个SVF isolation的方法，分离脂肪中的SVF，可是总是失败。分离的SVF要么不着板，要么死光光
。求支招。 |
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I*******U
发帖数: 869 | 2 最近要提取从白色脂肪里面提取SVF，根据protocol我确实看到了pellet，用TRI-
reagent也提取到了mRNA,nanodrop测出的浓度有800ng/ul，但是我试了cyclophilin，
gapdh，18s几个内参，都测不到CT值。已经重复几次了，郁闷的不行。请教各位，有什
么建议么？
SVF protocol
1）isolate WAT,
2) Incubate tissue @ 37C for 45min with shaking @ 80 rpm （Collagenase I，
1mg/ml）
3）300g for 10min
4) Dissolve pellet in Tri-reagent. |
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I*******U
发帖数: 869 | 3 现在不是组织解离不够，我能拿到细胞，也能测到RNA 浓度，可是housekeeping gene
18s，GAPDH和Cyclophilin都测不出，这个是什么原因？
楼上的你有没有测过SVF的gene表达呢？用什么housekeeping gene呢？谢谢
ml |
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a********r
发帖数: 225 | 5 才接触股票，跟着感觉选了两个股，F和SVF（这是看到板上推荐的），感觉F今年销售
应该会很不错，应该还有空间，SVF价位也很低，有上涨趋势。不知道对不对，麻烦板
上的牛人们指点一下，谢谢！ |
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J**********7
发帖数: 2619 | 6 wb，每到春天就发情了，开始run了。
钓场： 5米宽小河，树很多，水下树枝很多，周围狭窄不容易抛投。
钓具：
rod: steez svf 631
reel:core51 with KTF spool & boca abec 7 upgrade
line: berkley xl 4lb green mono.
lure: 1/8oz jighead + 各种2" crappie lure.
考虑：由于钓场环境复杂，需要精确抛投，钓手网上order了一根gloomis 721 imx, 据
说配pixy是绝配。 但是还没有收到。 暂时先用steez svf 631 + core51 with KTF
spool & boca abec 7 upgrade凑合了。其实狗哥肯定要说wb run起来还需要考虑器材
？ 说实话不需要，但是钓手喜欢搞肉+enjoy器材带来的技术红利和心情红利，所谓技
术红利就是
某些技术只有高级些的器材才能使出来，下面论述。心情红利就是用好器材上鱼带来的
快感是差器材的n倍。 n=钓具价格的比率。
技术： 下手pitch. 说起pitch来，通常是重线重饵。 4... 阅读全帖 |
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B***n
发帖数: 124 | 7 我想要的物品:
SONY Vaio Notebooks
单张面值:
Vaio SVD; SVE; SVF; SVP;SVS; SVT Models
可接受的价格(必须明码标价！):
Negotiable with Qty Buy
物品新旧要求:
New Sealed; Factory Refurbished or Grade A
邮寄方式要求:
Fedex Groud or Courier Service
买卖双方谁承担邮寄损失(Required if not code only):
付款方式说明:
Bill Pay
其他补充说明:
Very Important Notice:
Commercial Invoices Needed or Suppliers’ Original Invoices must be
provided to prove the legitimacy of ownership. Otherwise we won’t
accept any deals. Thank you for your support... 阅读全帖 |
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B***n
发帖数: 124 | 8 我想要的物品:
SONY Vaio Notebooks
单张面值:
Vaio SVD; SVE; SVF; SVP;SVS; SVT Models
可接受的价格(必须明码标价！):
Negotiable with Qty Buy
物品新旧要求:
New Sealed; Factory Refurbished or Grade A
邮寄方式要求:
Fedex Groud or Courier Service
买卖双方谁承担邮寄损失(Required if not code only):
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Very Important Notice:
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w***n
发帖数: 1519 | 9 这一点不夸张，还真的是两眼一抹黑了。列表里第一个fund的名字就有"Stable Value"
，结果都没看到。。。
如果你的要求是决不能亏钱，其实SVF 也未必能，insurer 也可以翘辫子，你放狗查一
下就知道了。
我不确定会不会把你往沟里带，不过另一个选项是从你的list里查 “Self Managed
Account”，开一个，然后build cd ladder.
不过FDIC 也可能破产...
差点忘了跟你说，就算存CD，考虑上通货膨胀，基本算是确定亏钱了。 |
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f****r
发帖数: 1140 | 10 Amtrak的话是
Seattle, WA SEA
Seattle - Ferry Pier 69, WA SVF
这两个哪个呢？ |
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m********n
发帖数: 2995 | 11 http://www.tacklewarehouse.com/liquidation.html#Swimbaits
所有这个Classic Sale页面上的东西，在标价基础上还有25%off的折扣。包括Daiwa的
Zillion Coastal, Pluton, Steez的两支spinning竿子（那支SVF的Fast竿子还是有很
多用途的，打折下来225刀，没见过更好的deal）。俺实在不是呆蛙的粉丝，不然全收
了。
另外LC的Rick Clunn系列在打折，原价15刀现7.88基础上再25%off，和Strike King的
KVD1.5、2.5价钱差不多了。 |
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KV
发帖数: 5728 | 13 我一般就是NRX,GLX或者Steez SVF，实在没什么特别好推荐的。 |
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KV
发帖数: 5728 | 14 gloomis的品控实际很糟糕，没有任何一家工厂会测试成品杆，日本公司高端公司也不
例外，所有的品控基本都是在blank层级在做控制，成品杆包装后即进入流通销售渠道。
gloomis被shimano买了以后，部分低端产品outsource，楼主这款属于性价比很差的
gloomis产品，我个人的感觉如果买gloomis不买glx+，市面上性价比好的产品多的是。
你说的nrx，问题更多，gloomis使用的不是正常的guide，而是在前端使用了wire
guides，最大的问题是braided line通过的时候产生的噪音，使用这种wire guides的
好处是减少了因guide破碎而更换杆子，这种wire怎么碰都不碎，而且即便弯曲变形还
能自动回复。但是对fishing line来说，使用micro guides，尤其是sic材料或者更新
款的torzite材料，对抛投和出线来说更顺畅，收线也更安静。
楼主这根，用的肯定是普通的hardloy，或者还不如，所以这种guides在上epoxy的时候
，产生声响太正常了，和你手头的nrx的一根wire foot比，那个品控要求需要更严，才
... 阅读全帖 |
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J**********7
发帖数: 2619 | 15 shimano确实挺阴的。
去年把crucial， cumara的warranty去掉了lifetime， 变成了1/3年?
今年北美的新expride, adrena 系列也只有1/3年 warranty。
今年还把gloomis的warranty都downgrade了。 nrx已经没有wildcard了，断杆+100换新
杆。
比st croix $75换新杆还贵。 比dobyns的$50换新杆更差了。当初我把6根legend
xtreme都卖了换成gloomis nrx，现在挺后悔，至少那根69mlxf 应该留着。 我卖杆子
极少留遗憾。现在的legend xtreme 69mlxf已经停产了，买不到了。
steez虽然贵些，但是lifetime warranty换的很干脆，我已经换过两根了。 compile-x
的blank确实比普通svf 好， 轻，有韧性。 不过美版只有3，4个model。 compile-x
711是我最喜欢用的general rod。
嫌steez贵，可以上zillion，价格便宜很多， 而且也有lifetime warranty。 虽然我
没用过zil... 阅读全帖 |
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L********e
发帖数: 1202 | 16 请问coach F24385是正店款吗？还是outlet款？F24385 SVF color french blue.
谢谢!! |
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L********e
发帖数: 1202 | 17 【 以下文字转载自 Exchange 讨论区 】
发信人: LittleZane (小丸子), 信区: Exchange
标 题: 请问coach F24385是正店款吗？
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Oct 21 23:24:00 2013, 美东)
请问coach F24385是正店款吗？还是outlet款？F24385 SVF color french blue.
谢谢!! |
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c***r
发帖数: 1132 | 18 这两天学到不少新知识，感觉现在干细胞在世界范围内的应用很广泛，不仅仅是中国（
中国因为监管方面的问题，可能做得更aggresive。欧洲/日本/美国这些地方，监管还
是相当严格的）。
推荐你看看Steven Cohen的paper，很多临床实例。
一下子收到的信息量太大，如果有记错的地方，还请见谅。如果没记错的话，他就做干
细胞美容，facelifting和乳房再造都做（不是他做的，就是别的某个人做的，我实在
不擅长记人名）。除皱的话，就是把干细胞注射到脸部，然后慢慢生成血管，
differentiation出脂肪，把皮肤撑起来，达到除皱效果。直接注射脂肪的话，后期有
时会被人体吸收，撑不起来。用干细胞，就不会有后期吸收的问题，组织长出来后会一
直在，达到长期除皱效果。用干细胞乳房再造原理也类似（这个治疗的一般都是切除了
乳房的乳腺癌患者，术前/术后照片和视频相当震撼，而且这个生成的是生理上真正的
自体组织（人造乳头也完全看不出/感觉不出是假的），就是真的，往胸部填硅胶隆胸
的跟这个比，就是浮云啊。）
Rogen Khouri，乳房再造（搞笑的是，有个大妈，一不小心，给造大了，结果还得... 阅读全帖 |
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c***r
发帖数: 1132 | 19 这两天学到不少新知识，感觉现在干细胞在世界范围内的应用很广泛，不仅仅是中国（
中国因为监管方面的问题，可能做得更aggresive。欧洲/日本/美国这些地方，监管还
是相当严格的）。
推荐你看看Steven Cohen的paper，很多临床实例。
一下子收到的信息量太大，如果有记错的地方，还请见谅。如果没记错的话，他就做干
细胞美容，facelifting和乳房再造都做（不是他做的，就是别的某个人做的，我实在
不擅长记人名）。除皱的话，就是把干细胞注射到脸部，然后慢慢生成血管，
differentiation出脂肪，把皮肤撑起来，达到除皱效果。直接注射脂肪的话，后期有
时会被人体吸收，撑不起来。用干细胞，就不会有后期吸收的问题，组织长出来后会一
直在，达到长期除皱效果。用干细胞乳房再造原理也类似（这个治疗的一般都是切除了
乳房的乳腺癌患者，术前/术后照片和视频相当震撼，而且这个生成的是生理上真正的
自体组织（人造乳头也完全看不出/感觉不出是假的），就是真的，往胸部填硅胶隆胸
的跟这个比，就是浮云啊。）
Rogen Khouri，乳房再造（搞笑的是，有个大妈，一不小心，给造大了，结果还得... 阅读全帖 |
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z****u
发帖数: 1007 | 22 换一下酶。我个人感觉collagenase不够强。组织解离不够。 我用collagenase 2mg/ml
+dispase. 或者直接上trypsin LE 都可以。 |
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m***o
发帖数: 272 | 23 RNA 跑跑胶看看.如果housekeeping 都测不出,你拿到的那就不是RNA,或者是降解了.如
果RNA 确定没问题,是不是PCR 的reagent有问题了?拿一个阳性RNA 来测.一步一步的排
除,还能找不到原因? |
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