w**t
发帖数: 52 | 1 preclear is not essential if your protein of interest is not sticky. Usually
, I spin at high speed for 20-30 min and works well for most of targets.
If preclear is required, you can try to incubate with proteinG beads only
for 1 hr.
I think IgG or pre-immu serum should be used as negative control but not for
preclear. |
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s****a
发帖数: 454 | 2 the antibody will be polyclonal antibody for IP.
Shall I use IgG or serum for preclear? |
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n***1
发帖数: 45 | 3 都可以，你只用beads preclear也行，但要有lgG control |
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s****a
发帖数: 454 | 4 好,谢谢大家.原来都不知道单用beads也可以preclear |
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s****a
发帖数: 454 | 5 恩,我的一个蛋白就是要preclear才好.
Usually
for |
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C*******r
发帖数: 10345 | 6 The U.S. has a long and difficult history with racial discrimination, but on
Tuesday the Supreme Court marked a milestone worth celebrating when it
ruled that a section of the 1965 Voting Rights Act has outlived its
usefulness. The political left is reacting as if this means a return to Jim
Crow, but the ruling is best understood as a sign of the racial progress
that progressives claim to believe in.
In a 5-4 decision, the Justices said that the law's Section 4b coverage
formula—which requires t... 阅读全帖 |
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s******x
发帖数: 15232 | 8 说具体点
就是说cbp preclearence和他们背后的安检不是同步下班？所有去美国的人都可以进美
国的地盘，却无法过安检上飞机？如果真是这样的话，yyz的cbp preclearence真的脑
残到家了 |
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s****i
发帖数: 5469 | 9 http://www.atlanta-airport.com/InternationalTerminal/passenger/
Q: I went through U.S. immigration and customs before getting on my flight
back to the United States. Where will I pick up my baggage?
A: Several countries — including Canada, Ireland and some Caribbean
destinations — participate in the U.S. precleared travel program.
Regardless of the gates at which their flights arrive, Atlanta-bound
passengers who arrive aboard precleared flights will pick up their baggage
at the international te... 阅读全帖 |
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s****i
发帖数: 5469 | 10 http://www.atlanta-airport.com/InternationalTerminal/passenger/
Q: I went through U.S. immigration and customs before getting on my flight
back to the United States. Where will I pick up my baggage?
A: Several countries — including Canada, Ireland and some Caribbean
destinations — participate in the U.S. precleared travel program.
Regardless of the gates at which their flights arrive, Atlanta-bound
passengers who arrive aboard precleared flights will pick up their baggage
at the international te... 阅读全帖 |
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g*********5
发帖数: 2533 | 11 Isolation of nuclei for the co-IP and whole ChIP protocols is based on the
methods of Gendrel et al. (2002, 2005), Johnson et al. (2002), and Nelson et
al. (2006).
METHOD
For extraction and co-IP of nuclear proteins, see Steps 1-39 (Fig. 1). For
the ChIP procedure, see Steps 40-69 (Fig. 2).
Figure 1.
View larger version:
In this page
In a new window
Figure 1.
Flowchart for the timeline and organization for co-IP of nuclear proteins
from Arabidopsis seedlings.
Figure 2.
View larger versio... 阅读全帖 |
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u*****a
发帖数: 9489 | 12 http://www.washingtonpost.com/politics/courts_law/2014/10/18/04
Supreme Court allows Texas to use controversial voter-ID law
By Robert Barnes October 18
The Supreme Court’s order that Texas can proceed with its strict voter-ID
law in next month’s election ended what is likely to be just the first
round in a legal battle over election-law changes made by Republican-led
legislatures around the country.
In an order released just after 5 a.m. Saturday, the court said Texas could
use a photo-ID law t... 阅读全帖 |
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F*********u
发帖数: 12190 | 13 伦敦没有preclearance
爱尔兰的都柏林和香农有
欧洲就这俩
此外还有阿布扎比 百慕大 巴哈马两个机场和阿鲁巴 |
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g**1
发帖数: 10330 | 14 突破！在台就可入境美國
分享突破！在台就可入境美國到Facebook 分享突破！在台就可入境美國到Line 分享
突破！在台就可入境美國到Google+
2018-03-23
〔記者陳宜加、駐美特派員曹郁芬／台北─美國連線報導〕台美外交再突破！華航將於
三月廿五日開航美國加州安大略，但不單只是新航線開闢，也傳出華航與美方談判過程
中，美方突破外交限制、也初步敲定飛美航線擬將啟用「境外通關（US Border
Preclearance）」措施，希望未來在台灣即可進行美國海關查驗、等同直接入境美國；
台灣可望成為亞太地區第一個設置境外通關的國家，除可提升台灣的亞太航空交通樞紐
位置，也將是台灣旅行法之後，台美關係另一大步。
美方突破外交限制，初步敲定飛美航線將啟用境外通關措施，未來在台灣即可進行美
國海關查驗、等同直接入境美國。（記者朱沛雄攝）
美方突破外交限制，初步敲定飛美航線將啟用境外通關措施，未來在台灣即可進行美國
海關查驗、等同直接入境美國。（記者朱沛雄攝）
境外海關 亞太首例
台灣一○一年十一月正式加入美國免簽證計畫，去年十一月再正式納入「全球入境計畫
（Global Entry... 阅读全帖 |
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t**t
发帖数: 258 | 15 BOS DD- .30( 1) DI- .40( 2) ID-1.30 II-1.30
ORD DD- .35( 5) DI- .35( 6) ID-1.10( 7) II-1.10( 8)
DFW DD- .40( 9) DI- .40(10) ID-1.10(11) II-1.00
LAX DD- .30(13) DI- .40(14) ID-1.30 II-2.00
MIA DD- .40(17) DI- .45(18) ID-1.35 II-1.20
JFK DD- .35 DI- .40(22) ID-1.15 II-1.15
STL DD- .30 DI- .35 ID-1.30 II-1.30
SJU DD- .30(29) DI- .40(30) ID-1.00(31) II-1.00(32)
D = Domestic. Flights arriving from airports with full border preclearance (
YEG, YHZ, YOW, YUL, YVR, YWG, Y... 阅读全帖 |
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u*****3
发帖数: 796 | 16 当时楼主已经到了transborder区了,已经preclear了吧. 所以其实正确的办法是打电话
给狐总, 赶紧查查有没有其他的转机option :D 从YYZ出来,去EWR或ORD很容易,然后
connect应该不难. |
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s******x
发帖数: 15232 | 17 我是想先确定一下，是不是即使过了cbp preclearance也不让在usa区睡机场
还是楼主当时脑子一懵，被加航的人忽悠一下就出去了，以为必须出去.....其实加航
的人只是想说如果你要住旅馆,就入境加拿大吧..... |
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u*****3
发帖数: 796 | 18 这就搞笑了, 不是CBP脑残就是CATSA脑残...有preclearance没安检? |
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s******x
发帖数: 15232 | 19 也就是说，安检其实和cbp preclearence同时关的
但是他们关门的时候你正在排队是不是？ |
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u*****3
发帖数: 796 | 21 狐总犯低级错误了吧？
加拿大-DTW-中国，除非是没有preclearance的小机场（YXU？）否则在加拿大就已经pr
eclear了，DTW 1小时转机足够。
当然中国-DTW-加拿大要进美国海关，1小时多一点基本不够（不过这不是lz问的）。 |
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s**k
发帖数: 1534 | 22 先取行李，过美国海关preclearance，drop off 行李，安检。上面这几个步骤的顺序
我很确定，在toronto转过三次了，不过前后都是加航。至于啥时候托运，我觉得是取
了行李，然后办理托运，再推着行李过海关。 |
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l***n
发帖数: 812 | 23 我去年就交易了5次左右，另外我们公司对交易有限制，总要preclear，不能设stop. |
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F*********u
发帖数: 12190 | 24 美国机场国际转国内都要在到达美国的第一站入关取行李再重新托运
除非到美国的前一站是preclearance机场，比如加拿大 |
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Q*n
发帖数: 211 | 25 与你有类似经历,但是我的旧I-94(F1)被收上去了,得到一张新的I-94,上面显示入关城
市是温哥华. 我最后填的是Vancouver (preclearance) / U.S.City. 曾经研究了一下,
如skymount所说,好象都可以.
我是填的H1B,因为虽然automatic revalidation用的是过期的F1 visa,你的status是
H1B, temporary worker.
应该是H1B. |
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Q*n
发帖数: 211 | 26 与你有类似经历,但是我的旧I-94(F1)被收上去了,得到一张新的I-94,上面显示入关城
市是温哥华. 我最后填的是Vancouver (preclearance) / U.S.City. 曾经研究了一下,
如skymount所说,好象都可以.
我是填的H1B,因为虽然automatic revalidation用的是过期的F1 visa,你的status是
H1B, temporary worker.
应该是H1B. |
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p*********g
发帖数: 453 | 27 美国有美國境外入國審查计划（United States border preclearance），在加拿大和
一些国家的机场设有美国海关，可以在机场入关。然后，所乘飞机就算是国内航班了。 |
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t******n
发帖数: 6242 | 28 我遇到过跟你一样的情况，去加拿大开会回来，用F1过期签证和美国国内变换身份的
H1B入境，在加拿大境内的CBP Preclearance Officer给了个新的I-94，但到护照过期
那天过期。
我当时留意到这点，并有几个方案，前提都是拿到新护照之后：
1.到当地的CBP office要求修改I-94
2.马上出境再入境换新的I-94，加拿大、墨西哥都是理想地点
3.到USCIS申请新的I-94
4.在过期前申请绿卡
最后新护照拿到后，本地的CBP很容易地就改了I-94的过期时间，都不需要在电脑里面
做任何变动。怀疑H1B的过期时间根本跟I-94的不相干，而只于I-797的那个过期时间有
关。
我觉得你们学校International Office可能不了解这种情况。当时我咨询我们学校，答
复也是必须出国，或者向USCIS提出延期申请才行，其实不必。
你可以找个靠谱的律师咨询一下，我觉得你这种情况应该不算身份过期，因为I-797没
有过期，即使I-94过期了。所以学校应该还是可以雇佣你的。
而且记住，你还拿到美国公民之前永远是个外国人，要时刻留意自己的身份，不要让它
不小心就失效了，... 阅读全帖 |
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f**u
发帖数: 2769 | 29 我觉得应该填你入境时的CBP preclearance facility所在的加拿大机场。
但是你填写AR-11的话，在线表格中没有能选的美国以外的地方。 |
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u*****3
发帖数: 796 | 32 用的着，你先入加拿大然后preclear美国。 |
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s******x
发帖数: 15232 | 33 楼主问的是在yvr的美国cbp preclearance，然后从yvr转机就飞美国了.....
另外你说的这个不是加拿大海关，是pacific crossing的美方入境检查站..... |
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s******x
发帖数: 15232 | 34 楼主问的是在yvr的美国cbp preclearance，然后从yvr转机就飞美国了.....
另外你说的这个不是加拿大海关，是pacific crossing的美方入境检查站..... |
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D*****E
发帖数: 9352 | 35 根据加拿大和美国的政府间协议, 两国的边界管理部门可以相互在对方机场开始PRE-CL
EARANCE FACILITIES. 美国在加拿大的主要机场\港口\火车站开设了这个设施, 方便两
国的往来. 这个PRE-CLEAREANCE的起因是美国的航空公司要开设航班的来往于加拿大和
美国的中等机场, 很多美国中等机场没有相应的移民和海关设施,单独为一半两班加拿大
航班专门开设移民和海关检查对美国来说是个得不偿失的事情, 而基本上从加拿大起降
的航班都在几个主要机场,因此在加拿大开设PRE-CEARANCE FACILITY是双方得益的事情
.
由于在外国领土上, 美国在加拿大的CBP的权力被大大缩小.他们有检查入境美国的乘客
护照的权力, 有在乘客的允许下检查乘客行李的权力, 有拒绝乘客登机的权力. 但他们
没有逮捕乘客的权力, 也没有不经许可搜查乘客行李的权利, 同样没有给违章乘客开具
罚单的权力, 如果他们认为有任何危害安全的行为,只能交有加拿大警方处理.
除了加拿大, 美国还在欧洲的爱尔兰, 大西洋的百慕大和加勒比地区的巴哈马\ARUBA设
有类似的PRECLEARANCE FAC... 阅读全帖 |
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u*****3
发帖数: 796 | 36 说道Preclear的入境章，我现在有YVR,YYC,YEG,YYZ。可能将来搞搞YUL，其他的还是算
了吧。
一般 |
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D*****E
发帖数: 9352 | 37 这个完全是航空公司的需要,然后报两国政府批准.
比如加拿大的PORTER AIRLINES是以TORONTO CITY AIRPORT为HUB的, 它为了能够更多地
开辟美国航线和其他美加公司竞争, 要求在这个机场开设CBP PRECLEARANCE FACILITY,
加拿大政府批准了, 但美国政府以航班太少为由拒绝了. 所以PORTER飞过来的航班都要
在美国CLEAR CBP. |
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f**u
发帖数: 2769 | 38 YYZ和YVR等大的机场有US CBP preclearance area。某些情况下（同航站楼、加航转加
航）无需提取行李，在US CBP那里可以“虚拟”清关，CBP officer扫描你下一站的登
机牌，然后对屏幕上的画面问，这些是你的行李么？有无需申报的物品？如果没答错话
的话，就直接放你过去了。 |
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t******n
发帖数: 6242 | 39
确实是在温哥华入海关
Google "United States border preclearance" |
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f**u
发帖数: 2769 | 40 白天到达温哥华不用入境加拿大，直接去美国CBP preclearance area，行李自动转美
国航班不用取。晚上需要。 |
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D*V
发帖数: 564 | 41 谢谢你，小狐狸！！！
I called CBP 877-227-5511 接电话的人说should be fine.
I called CBP at Vancouver (at airport), 接电话的人开始说single entry不行，后
来说，好吧，CBP总部说可以就可以，
I also called the liaison group number(就是在那本carrier指南里面). 接电话的
人也说should be fine.但是他也告诉我，这个号码只是给arrival by airplane的。
小狐狸，我又看了一遍carrier指南，指南提到了：
1。Arrival by air
2. Arrival by Land & Sea
3. Special Classes
A.
B.
C. Automatic Revalidation.
是不是说Automatic Revalidation apply to both air, land, Sea呢？
这是我所有打印好本来准备带去的资料：
CBP Phone: 877-227-5... 阅读全帖 |
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i****4
发帖数: 1906 | 42 请问 这个符合条件 免转机签证么?
中国人（我母亲飞）
赴美签证还没失效
加拿大回国这段直飞北京 国航执飞 当天2小时逗留
温哥华机场TerminalM
唯一存在疑问的就是从美国飞加拿大是AA执飞的
这个怎么讲呢?
http://cbsa-asfc.gc.ca/travel-voyage/twov-tsv/cct-pptc-eng.html
The Canada Border Services Agency (CBSA) and Citizenship and Immigration
Canada (CIC) have established the China Transit Program (CTP). The CTP
allows eligible nationals from the People's Republic of China (China) to
transit Canada on their way to and from the United States (U.S.) without
having to obtain a Canadian transit vi... 阅读全帖 |
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k**u
发帖数: 10502 | 43 杂记-后勤事宜
有的朋友关心后勤方面的事宜，一并说明如下。
签证：伊朗对中国公民提供签证或者落地签，落地签的费用是100欧元，另加短期保险
15欧元。提前签证的话，费用稍低。美国公民需要提前签证，好象还需要旅行社的伊朗
人全程陪同，不是很确定。
机票：我买的是Etihad的来回票, LAX-AUH-IKA。Emirates、Qatar、汉莎、土耳其航空
等都有航班。Etihad的服务和餐食都很不错，水平和亚洲的几家好的相当，比美国的就
强太多了。回程在AUH转机时，需要通过美国海外海关preclearance，而且被特别搜查
，相当费时。
货币：伊朗受美国的金融制裁，不能使用信用卡（个别卖地毯的店除外）。所有支付全
部使用现金，美元对里尔的汇率为1：35000弱。当地人使用toman(十里尔)，在省略掉
三个零，所以打车10万里尔的话，就是10(千toman)，相当于3美元。
语言：波斯语口语发音和英语类似，相对简单，语法复杂，临时抱佛脚学了几句，刚开
始交流非常困难，后来好一些。伊朗人年轻人普遍会一些英语。书面语言使用阿拉伯字
母，看起来象蚯蚓，字母连起来的时候，写法又不一样，非常难... 阅读全帖 |
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k**u
发帖数: 10502 | 44 杂记-后勤事宜
有的朋友关心后勤方面的事宜，一并说明如下。
签证：伊朗对中国公民提供签证或者落地签，落地签的费用是100欧元，另加短期保险
15欧元。提前签证的话，费用稍低。美国公民需要提前签证，好象还需要旅行社的伊朗
人全程陪同，不是很确定。
机票：我买的是Etihad的来回票, LAX-AUH-IKA。Emirates、Qatar、汉莎、土耳其航空
等都有航班。Etihad的服务和餐食都很不错，水平和亚洲的几家好的相当，比美国的就
强太多了。回程在AUH转机时，需要通过美国海外海关preclearance，而且被特别搜查
，相当费时。
货币：伊朗受美国的金融制裁，不能使用信用卡（个别卖地毯的店除外）。所有支付全
部使用现金，美元对里尔的汇率为1：35000弱。当地人使用toman(十里尔)，在省略掉
三个零，所以打车10万里尔的话，就是10(千toman)，相当于3美元。
语言：波斯语口语发音和英语类似，相对简单，语法复杂，临时抱佛脚学了几句，刚开
始交流非常困难，后来好一些。伊朗人年轻人普遍会一些英语。书面语言使用阿拉伯字
母，看起来象蚯蚓，字母连起来的时候，写法又不一样，非常难... 阅读全帖 |
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P****9
发帖数: 2294 | 45 应该是不需要的。
http://www.cic.gc.ca/english/department/ctp/eligibility.asp
If you plan to travel to the United States
To be eligible, you need to:
have these documents:
a valid U.S. visa
a valid passport from People’s Republic of China
(Note: not issued by Hong Kong or Macao Special Administrative Regions) and
a confirmed airline ticket to the U.S. that leaves Canada the same day you
arrive
travel with an airline that takes part in the program
depart from certain cities in Asia
travel through specific... 阅读全帖 |
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C***Y
发帖数: 61 | 46
PBS or washing buffer can be used for incubating Ab with beads;
I have never done preclear;
Glycine solution (pH~2.8) can be used for elution. After elution, add equal
volume of 1 M Tris, PH7.5 (for
neutralization) and equal volume of 3 X SDS loading buffer. |
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e*******e
发帖数: 342 | 47 最近在做Co-IP,可是每次的非特异性背景都很高，其实我在IP之前都用普通Beads做
Preclear的，不知大家有没有别的高招。这里现行谢过！ |
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y********g
发帖数: 782 | 48 1、每个reaction大概需要多少细胞。
2、sonication时，当时tube中裂解液的体积是不是很重要，大约多少ul比较好？
3、用液氮闪冻一下，是不是必须的？
4、PMSF要不要加？磷酸化酶抑制剂要加么？
5、用磁珠的话，也要preclear么？
十分感谢！！ |
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s********d
发帖数: 156 | 49 这几天正准备做CO-IP/,也顺便请教一下大家。
如果对其中一个蛋白只有一种抗体AVAILABLE,可以IP IB用一样的，都是POLY.有人提议
用MAGNABIND GOAT ANTI-RIBBIT IgG beads(PIERCE)+Ab+CROSSLINKING. 然后LYSATES
也用磁珠PRECLEAR一下，然后一起O/N. 我要看的PROTEIN都在55KD左右。 大家看这
么做合理吗？ |
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