b*********e 发帖数: 870 | 1 infusion 效率非常高的,根本不用操心什么浓度。我们把整个infusion反应体系压缩
到2ul,就是只用0.4ul infusion mix,剩下的1.6ul就是vector和inserts的回收产物
分配一下。
再说了,你这个4kb也不长啊,你跑胶回收的时候,把洗脱buffer加热一下,洗脱效率
高很多的。 |
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C****n 发帖数: 79 | 2 最近要将一个 3k+1k+2k的片段分别克隆到一个3k和8k 的载体上。试了两周Infusion
clone (Clontech, TAKARA)没弄出来。 Trouble-shooting过, 也用过overlap PCR
先assemble两个片段。但是仍然得到的是阴性结果(基于Colony-PCR和Restriction
enzyme digestion)。
之前一直用Infusion clone,虽然效率有高有低,但是这次彻底挂了。
理论上说Infusion比Gibson要效率高。当然其他方法如Golden Gate cloning, 还有
yeast recombination也许能行。不过似乎都有点麻烦。
请问各位大虾,对于我的这种情况,有没有其他类似高效快速的方法,或者克隆效率低
的可能性是什么呢?
不甚感谢。 |
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发帖数: 1 | 3 我一直用Clontech In-fusion,曾经一次将三个GFP tandem链接到一个10kb载体,一次
成功。In-fusion效率几乎100%,以至于我现在克隆所有片段都是用Phusion PCR出来,
In-fusion后挑一个菌落抽质粒直接测序。
用Infusion的时候最重要的两点是overlapping区域一定要是15bp,另外就是insertion
和vector的比例。如果你是克隆到8kb载体中,其他3kb,1kb,2kb与8kb的molar ratio应
该为1:1:1:0.5。你可以用clontech的infusion MOLAR ratio calculator。可惜的
是clontech被TaKaRa买了,网站变得奇差。你可以自己算。8kb vector以为200ng为准
,那么3kb是150ng,1kb是50ng,2kb是100ng。建议所有片段PCR,然后跑胶纯化,
nanodrop测浓度。如果浓度不高,那么可以整体scale down,但是ratio一定要是1:1
:1:0.5。
等有了8kb这个克隆,你就可以直接PCR中间3kb-1kb-2kb,然后... 阅读全帖 |
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L*****r 发帖数: 722 | 4
我觉得我们好象对有些基本概念的理解不一样。我理解的低血糖,是按小于70来定的,
看你的意思,好像100就算低血糖了?
我们这儿DIABETIC KETOACIDOSIS 时候insulin Infusion Protocol,是血糖小于70,
就暂时不给胰岛素阿。GOOLGLE到几个医院的DIABETIC KETOACIDOSIS Protocol,都是
同样,有的甚至更保守,就譬如Ball Memorial Hospital in OHIO:
Ball Memorial Hospital in OHIO, DIABETIC KETOACIDOSIS Protocol
Infusion Adjustments:
Glucose Level
• _ Less than or equal to 70 mg/dl
A1. Hold insulin infusion then
A2. Give 1/2 (half) amp D 50 W IV then
A3. After 30 minutes, recheck glucose
a. If less than 71, do A2 |
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w******m 发帖数: 226 | 5 Physician's order: add 60 mEq KCl to 1000 mL D5/W and infuse at a rate of 2.
5 mEq/hr.
Available: KCl 40 mEq=20 ml
The infusion set has a drop factor of 60
How much KCl should be added to the IV?
How many mL/hr should the patient receive?
How many gtts/min need to infuse to deliver the required amount of drug per
hour?
就是最后一问,结果不对呢感觉?大家帮算下,最好把过程贴一下,谢谢!! |
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w*******y 发帖数: 60932 | 6 Coupon code ENT15, in cart there is a 50% discount, shipping is free
Slazenger Raw Distance Xtreme Golf Ball - 24 Pack:
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level with the Slazenger(TM) Raw Distance Xtreme Golf Ball. This 24 pack of
balls features a new and improved titanium infused core and provides higher
launch with each hit.... 阅读全帖 |
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y*****l 发帖数: 5997 | 7 来自主题: _pennystock版 - SPPI Spectrum Pharmaceuticals Announces ZEVALIN(R) and Belinostat Abstracts to Be
Presented at the American Society of Clinical Oncology Annual Meeting
4 hours 16 minutes ago - BIZ via Comtex
BusinessWireSpectrum Pharmaceuticals (NasdaqGS: SPPI), a biotechnology
company with fully integrated commercial and drug development operations
with a primary focus in oncology, today announced ZEVALIN(R) (ibritumomab
tiuxetan) and Belinostat abstracts will be presented at the 2011 Annual
Meeting of the American... 阅读全帖 |
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c**i 发帖数: 6973 | 8 (1) Keith Bradsher, Power vs Profit; China's Utilities Defy Beijing and Cut
Output. New York Times, May 25 2011 (title in print).
http://www.nytimes.com/2011/05/25/business
/energy-environment/25coal.html?_r=1&ref=china
"In a little-noticed milestone, the latest data from Beijing and Washington
shows that China passed the United States last year as the world’s largest
consumer of electricity.
"But while the electric utilities are majority-owned by the government, they
are also profit-motivated c... 阅读全帖 |
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O**e 发帖数: 569 | 9 2014年09月29日 12:36
来源:中国日报网
16人参与 2评论
原标题:ISIS成员:正筹划在纽约发动猛烈袭击
中国日报网9月29日电(小唐) 据《纽约每日新闻》27日报道称,极端组织“伊斯兰国
”(ISIS)的一名成员宣称,该组织正筹划在纽约发动袭击,而其目标是未来让该组织
旗帜在白宫上空飘荡。
“如果情况允许的话,我们很快就会在纽约发动恐怖袭击。”这名自称法拉赫·希雷顿
的加拿大人通过视频对外界说,“很多兄弟正在那里进行活动。”他还断定美国的武装
分子势必发动一场猛烈的袭击。
他还说:“我还知道很多人——数以千计的人——目前生活在西部,准备好在你们的土
地上行动。”他们的终极目标是看到ISIS的旗帜飘扬在白宫上空。
伊拉克总理阿巴迪最近也提醒称恐怖分子要在纽约和巴黎的地铁发动袭击。为了安抚民
众的恐慌情绪,纽约市市长白思豪25日出现在纽约地铁,向市民保证地铁的安全性。此
外,警长和纽约州的州长还分别乘坐不同的地铁线,向公众证明地铁的安全性。白宫也
回应说,美方情报部门没有收到任何针对地铁的恐怖袭击情报,但表示会进一步研究伊
拉克方面的情报。
The great Ameri... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 10 12月10日 可能的历史
前一天夜晚我一夜没睡,因为那一天晚上有人被扔下下水道了,我不知道是不是我的孩
子。因为前一天孩子上学前要一张小时候的照片,我想也许他想留个纪念。照片一直都
放在女儿房间储藏室,所以,我搬了椅子上去拿他的相册,儿子的照片有两本,我拿的
是那本我和先生共同给他建立的那一本,给了他在我肚子里的一张照片。 很可能他们
没有如愿离开。我不知道发生了什么,我在楼下听儿子说照片是他拿的 (他怕他们伤
害我?主动承担责任?)。然后他房屋的门被锁上,我担心我的儿子被他们害了。我很
长时间都没有去看那些照片,因为我曾经浏览过,都是过去的照片。而最新的照片都被
他们偷走了,特别是关于女儿的照片偷的一干二净。我没事,就把相册都抱下来再次查
看,发现很多东西被篡改或擦掉了,就连合影也是被合成的。为了防止所有的照片被销
毁,我就把他们都收起来了。其实,很多时候,我不是不知道某个人不是我的丈夫,而
是我不希望每一个人遇害,所以我沉默。我是不知道我先生如果还活着,如果一个被折
磨的人,会变成怎样? 我无法知晓。但过去的他,即使没有照片,我也逐步忆起。有
一些人,我会有困惑,但有一些人,我... 阅读全帖 |
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z*******4 发帖数: 285 | 11 算了,你脑子大概也被活摘过
懒得跟你解释,贴个清单吧:
累计研究数量 注册号 注册日期 研究者单位 研究者单位(英文) 注
册题目 注册题目(英文) 预计纳入参试者日期
1 ChiCTR2000029308 1/23/2020 武汉市金银潭医院(武汉市传染病医院)
Wuhan Jinyintan Hospital (Wuhan Infectious Diseases Hospital) 一项评价
洛匹那韦/利托那韦和干扰素-α2b联合治疗武汉新型冠状病毒肺炎(COVID-19)住院患者
的疗效和安全性随机、开放、空白对照的研究 A randomized, open-label, blank-
controlled trial for the efficacy and safety of lopinavir-ritonavir and
interferon-alpha 2b in hospitalization patients with novel coronavirus
pneumonia (COVID-1... 阅读全帖 |
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k******u 发帖数: 1467 | 12 Item Quantity
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Modern Muse parfume 2.9ml 试管装 30
Lash Primer Plus Mascara 5ml 30
Hydrationist maximum moisture lotion 50ml正装 2 12年5月
ANR Synchronized Recovery Complex 50ml 正装 6
ANR Synchronized Recovery Complex II 30ml 正装 7
Advanced Time Zone Eye 15ml正装 4 12年9月
ANR Eye Serum infu... 阅读全帖 |
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i*******5 发帖数: 352 | 13 大量提供低价折扣货源,详情站内
moisturizing cream, soft cream, eye cream, hydrating infusion , lifting mask
, brightening infusion , brightening essence , oil orbzorbing tonic , mist
以及其他专柜正品 |
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f******I 发帖数: 769 | 16
i don't think albumin infusion would help any, it's occasionally used in
large volume paracentesis and as a volume expander in shock situation,
albumin get metabolized so quickly that its effect is very short-lived, plus
it's very expensive,
if the patient's albumin level is low, most of the time is from poor
nutrition and/or liver disease with poor synthetic function, infuse albumin
will not help, |
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f******I 发帖数: 769 | 17
calcium supplement plus biphosphonate, such as fosamax and actonel, both can
be taken once a week, but could cause esophagitis so recommend to take
30min before food and sit up at least 20 min or so,
boniva is new, can receive infusion every three months so much easier to
tolerate,
zometa is sometimes used, it's once a year infusion but it's not FDA
labelled use for osteoporosis,
both boniva and zometa should be used judiciously in patient with renal
insufficiency,
you could use miacalcin nasal |
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y*****g 发帖数: 193 | 18 You mean thrombolytics(tPA), it has to been infused as IV drips in acute
hospital setting, ER or ICU. This agent will resolve clots which cause acute
ischemic stroke, and also has the risk of serious bleeding. If it is a
hemorrhagic stroke, this meds can't be infused at all. I think big hospitals
in China should have this kind of meds, but not every hospital can do
critical triage to stroke patients. Even in USA, you have to know which
hospital close to your home has the stroke center or stroke |
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f****o 发帖数: 2770 | 19 因为每个礼拜都有好几个人问同样的问题,所以这一贴置顶。请阅读此贴之后再发帖询
问相同的问题。
【问】在美国如何才能合法购买到处方药?
【答】从美国医生拿处方然后去药店购买
【问】我在甲州医生开的处方可以拿去乙州的药店购买么?
【答】各个州的法律不同,但是基本上都是可以的
【问】中国医生的处方可以在美国开药么?
【答】不可以
【问】为什么不可以,都是医生处方啊?
【答】法律规定的不可以就是不可以
【问】那加拿大的可以么,美国的邻国啊?
【答】非美国处方一律不可以。你让美国人怎么辨认外国处方的真伪呢
【问】我可以假冒医生弄一张假的处方在美国开药么?
【答】你不怕被警察抓就试试看,药店的药剂师最擅长的事情之一就是辨别处方真伪了
【问】我没有保险可以拿药么?
【答】可以,付全额药价
【问】我没有保险,有哪里的处方药比较便宜么?
【答】很多超市连锁店的药店都有4$ List generic medication,你可以看看你的药是
否在list上。一些地方的药店还给免费的抗生素和抗糖尿病的药。同样的药不同店的价
格也不一样,你可以打电话询问cash price货比三家。另外各个州可能有Disco... 阅读全帖 |
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f****o 发帖数: 2770 | 20 因为每个礼拜都有好几个人问同样的问题,所以这一贴置顶。请阅读此贴之后再发帖询
问相同的问题。
【问】在美国如何才能合法购买到处方药?
【答】从美国医生拿处方然后去药店购买
【问】我在甲州医生开的处方可以拿去乙州的药店购买么?
【答】各个州的法律不同,但是基本上都是可以的
【问】中国医生的处方可以在美国开药么?
【答】不可以
【问】为什么不可以,都是医生处方啊?
【答】法律规定的不可以就是不可以
【问】那加拿大的可以么,美国的邻国啊?
【答】非美国处方一律不可以。你让美国人怎么辨认外国处方的真伪呢
【问】我可以假冒医生弄一张假的处方在美国开药么?
【答】你不怕被警察抓就试试看,药店的药剂师最擅长的事情之一就是辨别处方真伪了
【问】我没有保险可以拿药么?
【答】可以,付全额药价
【问】我没有保险,有哪里的处方药比较便宜么?
【答】很多超市连锁店的药店都有4$ List generic medication,你可以看看你的药是
否在list上。一些地方的药店还给免费的抗生素和抗糖尿病的药。同样的药不同店的价
格也不一样,你可以打电话询问cash price货比三家。另外各个州可能有Disco... 阅读全帖 |
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f****o 发帖数: 2770 | 21 问】我没有处方,如何买到静脉注射的化疗药物呢?
【答】静脉注射(IV)的化疗药物(Chemo)不是靠处方买的。药店是没有权利购入IV
Chemo的。病人都是直接去oncology infusion clinic,医院,门诊去接受infusion。 |
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m******g 发帖数: 1103 | 22 Intravenous infusion is really risky. Unless having urgent medical condition
, I won't do intravenous infusion, especially in China. |
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k******u 发帖数: 1467 | 23 Item Quantity
ANR 新版 7ml盒 小样 200
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ANR Synchronized Recovery Complex II 30ml 正装 7
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ANR Eye Serum infu... 阅读全帖 |
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i*******5 发帖数: 352 | 24 大量提供低价折扣货源,详情站内
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T******e 发帖数: 18290 | 25 研究了一下,结论是:
性能当然是infuse好,因为是比较晚出来,欢迎弃果投猪
不过4G不是关键点,而且infuse不支持LTE,以后AT&T的LTE 4G网络你也用不了
还是店里看看外形吧,女人买手机,外形是第一位的 |
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e*******y 发帖数: 5613 | 26 今天去ATT的店里看了infuse的样机 外形被iphone4甩了几条街 完全灭草
infuse可以插sd卡 有HDMI接口可以接大显示屏 不过对于一款手机来说 不觉得这些功
能有特别大的意义 至少对我来说
4G网络现在确实覆盖面小 现在是试运行 据ATT的店员说 今年年底或者明年年初会
fully launch 难怪iphone5木压力迟迟不出来
另外发现target的iphone4 $149比在ATT直接买便宜50 另外还有5%cash back 还可以
trade in iphone 3GS $110 |
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S*******a 发帖数: 2338 | 27 已经锻炼了一个当med,但是还需要infuse。如果把med拿去infuse就太可惜了。 |
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st 发帖数: 1685 | 28
just like other mission, dont finish it, you dont move on.
??? without ascension, you are already in ice mountain? just run over there?
I have one part infused, what's the big deal with that? I can get infused
with hench, it takes a little while but it's not hard. as you go with 7
lv20 hench. |
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c****n 发帖数: 21367 | 29 could you tell me what is infused?
is my 80+20 armor part an infused part? |
|
f****a 发帖数: 4708 | 30 it's like a special enchantment, the "seer" will infuse one piece
of your armor if you give him one "special essence".
If your armor is infused, mursaart cant's do much dmg using their
"special agnoy" |
|
st 发帖数: 1685 | 31
from camp to ROF is easy, I can do it with hench, but I died many when
I tried to capture skill. didnt do it right
need to get fully infused, dmg for spectral agony is 100,42,19,9,3, after
fully infused. 群殴 is not a good thing.
last mission is pretty hard, with two human monk, we still died a few times,
but two monks never die and the group holds on |
|
st 发帖数: 1685 | 32 only one elite skill, so it's pretty easy to get fully skilled,
why fully infused? no player uses spectral agony right?
to finish PvE, you need to get fully infused though |
|
c*******7 发帖数: 314 | 33 我想卖的物品:
大量La Mer小样
付款方式:
non cc paypal/BOA
邮寄方式和邮费:
1st class+DC, 邮费不包括在价格里
买卖双方谁承担邮寄损失:
before,after
其它补充说明:
La Mer小样(都是全新有盒子的)
la mer eye concentrate 3ml,15刀,09年批号,共10个(都还在)
la mer the concentrate 5ml,18刀,08年下半年批号,共5个(都还在)
la mer lifting serum 5ml,10刀,08年下半年批号,共7个(都还在)
la mer the hydrate infusion 15ml,6刀,09年批号,共10个(还剩5个)
la mer cream 7ml,15刀,09年批号,共7个(gone)
la mer the radiant infusion 15ml,5刀,08年下半年批号,共4个(gone)
EL:都是NS上周末刚拿的赠品(el的all gone啦)
anr 眼霜 5ml 10刀一个, 8个
timezone 眼霜 5ml 10刀一个,4个
口红7个(2种 |
|
w******o 发帖数: 3259 | 34 其实也算不上fraud啦。可能她也不知道hydrating 和radiant infusion的区别。卖得贵倒是真的,一个infusion要卖10块,行价才7块,一个lotion也要10块,行价是7块。我也就图着和concentrate一起买方便。心里不爽,在这里说说也就舒服多了。 |
|
w******o 发帖数: 3259 | 35 radiant infusion, 15ml with box. 一共两个,1个08年,1个07年,在本版买的,卖
家当hydrating infusion寄来了。买的时候是$10一个, 现在两个一共$16包邮.不单转
,谢谢。
non-CC paypal.包first class w/delivery confirmation. |
|
n******8 发帖数: 154 | 36 la mer
the hydrating infusion
the radiant infusion
之前华人来的。。。。
因为都没空用。。没开过。。。。
两件一起
15+shipping 转。。。。 |
|
m******e 发帖数: 1244 | 37 ☆─────────────────────────────────────☆
catcat007 (猫猫猪) 于 (Mon Oct 19 12:38:47 2009, 美东) 提到:
我想卖的物品:
大量La Mer小样
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买卖双方谁承担邮寄损失:
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la mer cream 7ml,15刀,09年批号,共7个(gone)
la mer the radiant infusion 15ml,5刀,08年下 |
|
r********m 发帖数: 593 | 38 现在贴La Mer
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P... 阅读全帖 |
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d*****y 发帖数: 1073 | 39 晕,这个是置顶贴的,我觉得和The moisturizing lotion 5ml, $7--$8比较相似。欢
迎大家提意见。
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The moisturizing gel cream 3.5ml $6.5---$7.0/ea
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The eye concentrate 3ml, $12--$15/ea
The cleansing lotion 30ml, $3/ea
The moisturizing lotion 5ml, $7--$8
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the radiant infusion 15ml, $7.0
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the body lotion 30ml $5.5--$6 |
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A********1 发帖数: 1268 | 40 全部都降价了
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r********m 发帖数: 593 | 41 这楼包括Cellcosmet, Chanel, Chantecaille, Cle de Peau
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r********m 发帖数: 593 | 42 这楼贴 La Prairie, Laura Mercier, L'occitane, Murad, and Natura Bisse
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r********m 发帖数: 593 | 43 ===Narciso Rodriguez=== 图1
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r********m 发帖数: 593 | 44 ===Caudalie===
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r********m 发帖数: 593 | 45 现在贴Estee Lauder
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r********m 发帖数: 593 | 46 图1
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===JustCavalli===
Perfumed body lotion
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===Jimmy choo===
Perfumed body lotion
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===Jo Malone===
Pomegranate Noir Body Crème
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===KENZO===
FLOWER creamy body milk
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Size 50mL
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r********m 发帖数: 593 | 47 现在贴Shiseido资生堂的
Future Solution LX系列 图1
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Future Solution LX Total Regenerating Serum 精华, tube
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Future Solution LX Total prote... 阅读全帖 |
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r********m 发帖数: 593 | 48 ===Lancome=== (图1)
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La Vie Est Belle Eau de Parfum
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===Lanvin=== (图1)
éclat D’arpege EDP roller ball
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Size 7.5mL
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Price 4.00 each
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===L’Occitane=== (图1)
Pivoine flora EDT
19393... 阅读全帖 |
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f******s 发帖数: 130 | 49 这个infusion算是个高机能保湿水吧,那个hydrated infusion据说更补水
感觉还是面霜更经典好用,油皮就用那个lotion的或者oil free lotion的,就会好很多 |
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v*******a 发帖数: 1193 | 50 mm 这个 radian infusion是 像 爽肤水一样的 还是 像乳液一样的?
擦完 会不会干 还要不要擦 乳液了?
和 hydrating infusion比较呢?
谢谢 |
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