z*********8
发帖数: 1203 | 1 用过的达人请指点，我需要把3段DNA按照一定顺序克隆到plasmid上面，但是好用的
resctriciton enzyme在3段DNA里都有，所以ligation based cloning不太能用。然后
别人就介绍了这个infusion kit，发现克隆1个基因好用，克隆3个基因总是中间的那个
基因在，旁边的都不在，不知道有没有什么trick好克隆？谢谢大家！ |
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z*********8
发帖数: 1203 | 2 以前用的都是overlap pcr，都还不错，3段一般还可以接起来。做fusion protein,
protein tag，mutagenesis之类的还不错。最近做的这个比较棘手，PCR不出来了，只
有依靠infusion了。问题是，我按照clonetech人家网站上的一步步做下来，也用了他
家的primer design tool了，还是不行，只有中间一段DNA在上面，2端的DNA没有。大
家快快出招！谢谢！ |
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z*********8
发帖数: 1203 | 3 我别的都跟你说的那样做的，只有pcr我跑胶看到都是单条带，所以就只有 column
purification。你觉得是我没有割胶纯化的问题么？？
发信人: N2 (Huahua), 信区: Biology
标 题: Re: 怎样用infusion kit克隆多个PCR 片段？？
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 26 17:52:12 2011, 美东)
It should work. This kind of method is very efficient. Here are some points
maybe be useful.
1) Gel purify you PCR product.
2)use Nanodrop to estimate the concentration of your PCR products
3) add all fragment 1:1 ratio to vector. Add 100-200ng vector part. It also
depends your fragment size. you may add up to 5... 阅读全帖 |
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g*********5
发帖数: 2533 | 4 Now I can't do the regular cloning work...
past several month fail to construct vectors....
someone use infusion system form clontech?
thanks. |
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发帖数: 1 | 5 各位大拿，
请问有多余的 iPRECIO® Micro Infusion 生物泵吗？想买个试试。
谢谢啦。
email：[email protected]/* */ |
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b***2
发帖数: 7 | 7 想当infusion nurse，网上搜了搜，看来还得再去参加个考试，才能拿到证书。我的问
题是这个证书需要每3年就要renew一次，是不是每次renew之前都得要再重新参加一次
考试才给renew呀？另外有哪位过来人能告诉一下，是不是只有INCC网站才做这事?用哪
个复习材料最好？这个考试拿下的证书是不是全国通用的那种？ |
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发帖数: 1 | 8 各位大拿，
请问有多余的 iPRECIO® Micro Infusion 生物泵吗？想买个试试。
谢谢啦。
email：[email protected]/* */ |
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h**l
发帖数: 4883 | 9 我认识一个人是home infusion pharmacy的主管。他们做很多Compounded Sterile
products. 需要很懂 USP797。
建议你读读The Pifizer Guide to Careers in Pharmacy
里面有很多药剂师的职业选择 |
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z***a
发帖数: 8436 | 10 同问!
但我算不算回答了你第4个问题呀，呵呵。
可惜我估计不大适合MTM，反而对home infusion也挺感兴趣。
希望有经验的同学能多提供点信息！ |
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T*R
发帖数: 36302 | 11 没干过HOME INFUSION,不知道什么东西.
不过HOME NURSE我是干过的.
钱还行.一般OPEN CASE 7,80一次,平常的拜访5,60块一次.20分钟解决.如果给药的话,
象ZOSYN这样的也就30分钟,VANCO2小时.不过我从没给过药.
干这个,主要的问题是SAFETY.
女的不是很合适,除非你是比较TOUGH的.
因为你去的区域可能你不了解.抢劫什么的是常事.我自己老板就被抢劫打伤.
我以前只做CHINATOWN的中国病人,安全还好.后来觉得有点累,就不做了.因为开着车倒
处跑也很累.城里趴车不容易.
还是做AGENCY来钱块,也稳定.
我要是做药剂师,肯定兼职做FLEX POOL. |
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