N******e
发帖数: 56 | 1 向南大校友求助:
在下想要用pEYFP-Golgi mark我的细胞(果蝇的 S2 cell)的golgi body, 结果不幸的是,
clontech的这个vector不卖了....This product has been discontinued...
版上的各位大侠, 如果有这个vector,可不可以给我一点点, 在下不甚感激!!!
再次感谢! |
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c*********8
发帖数: 369 | 2 有个染色的问题向各位专家请教，最近做Golgi 抗体染色，不知道怎么回事， 在显微
镜下看细胞基本上全绿，感觉核也是绿的，很难看到golgin 的部位，我用的first
antibody is golgin-97(human),mouse IgG1, monoclonal CDF4 (anti-Golgi) –
UNCONJ, the second antibody is Alexa Fluor® 488 Goat Anti-Mouse IgG (H+L
)，在加一抗前，也用2%BSA和10% goat serum block 1hour, 在加二抗前也是充分冲洗
，不知到怎么会事，想问问大家有没有什么有效的protocol分享以下，非常感谢，我的
邮箱：c*********[email protected] |
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G*******1
发帖数: 137 | 3 审稿机会：
Evaluation of Single or Joint of Golgi Protein 73 and Alpha-fetoprotein in
Hepatocellular Carcinoma Diagnosing
肝病学相关专业的，请把简历发到z******[email protected],谢谢 |
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t******y
发帖数: 716 | 4 最近要做蛋白追踪，活细胞显影。但是没有亚细胞结构的荧光蛋白。如果哪位朋友有表
达mCherry，CFP等荧光蛋白偶联的ER，Lysosome或Golgi Marker的质粒，请和我联系。
不胜感激！ |
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a*****2
发帖数: 175 | 5 We use GM130 antibody from BD Bioscience that works very well even in
chicken cells. Also I only use 3%BSA for blocking. Paraffin section doesn't
work for Golgi neither based on my experience.
+L |
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c*********8
发帖数: 369 | 6 Hi,apple12,thank you very much for your kind reply. Could you send me the
whole detailed Golgi protocol you’re used for GM130 antibody staining?
Thanks. I do not think the product has some problem become someone in our
lab already succeeded in this way but he already left for three years. I can
not reach him now. By the way, I already check the BD Bioscience website;
there are a lot of GM130 antibody. Also santa cruz biotechnology, inc. have
similar product. I feel a little confuse. Could you ... 阅读全帖 |
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c*********8
发帖数: 369 | 7 请教各位大侠，最近花了很长时间想弄个GFP-golgi表达的3T3玩玩,但是用 Fugene HD
转染后效率很低， 荧光超级弱， 持续2-3天就不行饿了，想问下版上那位大牛玩过这
类稳定表达的细胞系，能否分享一点质粒或细胞，小弟愿意提供邮寄的费用及一定的报
酬，谢谢 |
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f**d
发帖数: 768 | 8 这是一本计算神经科学的优秀著作，全文拷贝这里（图和公式缺），有兴趣的同学可以
阅读
如需要，我可以分享PDF文件（－－仅供个人学习，无商业用途）
From Computer to Brain
William W. Lytton
From Computer to Brain
Foundations of Computational Neuroscience
Springer
William W. Lytton, M.D.
Associate Professor, State University of New York, Downstato, Brooklyn, NY
Visiting Associate Professor, University of Wisconsin, Madison
Visiting Associate Professor, Polytechnic University, Brooklyn, NY
Staff Neurologist., Kings County Hospital, Brooklyn, NY
In From Computer to Brain: ... 阅读全帖 |
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c******t
发帖数: 1733 | 9 短期的肌肉酸痛是因为乳酸堆积， 乳酸堆积是造成fatigue和muscle failure 的主要原因。 因为肌纤维在酸性环境下，收缩能力变低。但乳酸在八小时内就会被机体清除，所以事后酸痛并不是乳酸堆积引起。
大重量运动，会造成肌纤维轻微撕裂。大量的白细胞， 前列腺素和养分流到撕裂处试
图修复，造成修复性的肿胀和发炎，这才是酸痛的主要原因。
并没有证据证明酸痛后肌肉就会增长，但很可能是。因为肌肉只有在肌纤维撕裂后才能
生长。但work to failure 造成的酸痛对力量的增长并没有好处，因为你需要太长的时
间修复。而且起feed back 保护作用的golgi tendon 是有记忆的，你failure后golgi
tendon记住这个重量，下次就会把阈值调低，使你的中枢神经过早的发出放弃的指令，
反而会使力量降低。
运动前后用止痛药可以减轻酸痛。适量的cardio也会有帮助。workout 后的strech 对
有些人有效，对另外一些人没有。如果你酸痛时去做重量练习，做不到平常一半的量时
，就需要休息了。肌肉是在休息时，而不是在training时生长的。 |
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i***l
发帖数: 4182 | 10 【 以下文字转载自 Fitness 讨论区 】
发信人: crossfit (kettlechallenge), 信区: Fitness
标 题: Re: 急问一下，肌肉酸痛的时候应该歇着还是继续锻炼?
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 11 14:40:04 2010, 美东)
短期的肌肉酸痛是因为乳酸堆积， 乳酸堆积是造成fatigue和muscle failure 的主要原因。 因为肌纤维在酸性环境下，收缩能力变低。但乳酸在八小时内就会被机体清除，所以事后酸痛并不是乳酸堆积引起。
大重量运动，会造成肌纤维轻微撕裂。大量的白细胞， 前列腺素和养分流到撕裂处试
图修复，造成修复性的肿胀和发炎，这才是酸痛的主要原因。
并没有证据证明酸痛后肌肉就会增长，但很可能是。因为肌肉只有在肌纤维撕裂后才能
生长。但work to failure 造成的酸痛对力量的增长并没有好处，因为你需要太长的时
间修复。而且起feed back 保护作用的golgi tendon 是有记忆的，你failure后golgi
tendon记住这个重量，下次就会把阈值调低，使你的中枢神经过早的发出放弃 |
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w**u
发帖数: 311 | 11 sekon 兄，你的一些问题, 已超出我的能力.如有不当，请包含。
关于色法里的四大，我一直对禅修高人能看到物质色聚中的四大存疑。对我来说，用
仪器观察道亚原子的基本粒子更可信，甚至超弦的假设也比他们的理论也更有意义。
实践上，我只听说柏奥体系对观色法色聚四大有要求。
相反，名法中的四大，我觉得非常可信。
因为我认为原始佛教中的”名法”是基于高度训练过的许多牛人对自身感官体验的重复性
的理性总结.每个禅修牛人就好像一个高分辨，超高帧，大容量的超级显微镜。只不过，
对象是自己量子意识的变化。
基于此,我更倾向不把里边的名法当作形而上的哲学. 而他讲的许多体验,应该可以得到
现代生物的佐证. 反过来，现代神经生物学也能帮助我们禅修实践。
比如这里这个身念住里的观四大, 其分类跟神经生理许多地方不谋而合：
体位觉,或者叫本体感 (proprioception),它的感受器主要是肌梭(Muscle
spindle),高尔基体（Golgi organ，golgi tendon organ) 等.所以我把它归为风大。
温热觉(thermoreception), 它的感受器是游离神经末稍, 主要的离... 阅读全帖 |
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S***n
发帖数: 1281 | 12 谢谢师兄！不管是跟我相同或者跟我相左，总是在inspire我。
有关神经的那段，你是说神经体系正好分为四大类，所以应该正好是分管四大的？
你说到名法与色法的差别，你是说，感受到的，因为没有显现，所以属于名法，不属色
法吗？
跟你讲一下我看到的经历，你看是不是不光是名法了。我的眼睛，真的成显微镜了，比
显微镜还牛。当然，还没有达到你说的那个量化的微细尺度。
我的眼睛，可能因为里面有飞蚊的原因，有的时候会莫名地聚焦到很近的位置，显著的
例子，就说我躺在沙滩上睡觉，醒来的时候不睁眼，眼前看到的是一片通红，那是被太
阳照到的结果。但是很多次就能看到眼皮里放大了的毛细血管，红细胞在视野中穿过，
一顿一顿地在走的，与脉搏对应。
后来有几次在闭关室，感觉黑屋子里眼前有微暗的条状物，并且还分区呈方块状整齐排
列，每个方块中有七八条不规则排列的条条。开始以为是幻觉看到什么甲骨文了，闭关
心里淡然不在意，慢慢也就看不到了。
后来跟同修交流，也有说看到的，并且强调是进门的时候。这下引起我钻研的劲头了，
我进闭关室一看，果不其然，就是刚开始的时候有，慢慢就没有了。
这让我想起萤光物质。所以我就快速开关一下闭关... 阅读全帖 |
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R*s
发帖数: 2041 | 13 BFA is a drug can disrupt regular Golgi structures in cell.
I am looking for a protein which trafficks though ER/Golgi to plasma membrane,
and therefore its traffickign can be disrupted by BFA.
Any info would be appreciated. |
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e**r
发帖数: 1144 | 14 Cell Motil Cytoskeleton. 1994;27(3):262-71.
Cellular infrared detector appears to be contained in the centrosome.
Albrecht-Buehler G.
Source
Department of Cell, Molecular, and Structural Biology, Northwestern
University Medical School, Chicago, Illinois 60611.
Abstract
Previous experiments have suggested that 3T3 cells were able to extend
pseudopodia toward latex particles up to 60 microns away from the cell body
if the particles were irradiated by an infrared beam in the range of 700-900
nm [Al... 阅读全帖 |
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m******5
发帖数: 1383 | 15 什么膜，golgi?ER?如果是ER的话可做的东西就丰富了因为不光可以转移东西到核膜上
还可能relavent to ER stress
另外，楼主能看见明显的ER/Golgi/cell membrane定位么？ |
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f**d
发帖数: 768 | 16 写的不错，转过来，有助于内行外行了解这个行当
http://blog.sciencenet.cn/home.
php?mod=space&uid=560063&do=blog&id=446240
神经科学不算是一门年轻的学科，很早以前，人们就开始了对大脑的认识和研究；
但是由于我们认知的局限、研究手段的局限，我们对于大脑功能的研究还处在初步
的阶段，很多未知的东西都在等待着我们去解答。这里主要综述一下神经科学发展
史以及科学理论变迁之后科学思想的变化。
在神经科学的发展史上，主要存在着以下3个大的争论：
1、 关于大脑和意识的争论：大脑和意识究竟是相互孤立的还是还是统一的，意
识究竟是大脑的一部分还是游离于之外？由此产生了很多观点。包括孤立论观点、
同一论观点、平行论观点、二元论观点等。
2、 局部定位论（localism）和整体论（holism）的争论：特定的脑部区域是否
仅仅和特定的功能相联系，还是大脑以一个整体参与所有的功能体现。
3、 是否有除了视觉、听觉、嗅觉、味觉、和触压觉之外第六感的存在，即所谓
的灵魂，这是一个我们尚未深入研究因而一切还处于未知的领域。
首先让我们... 阅读全帖 |
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d*****u
发帖数: 17243 | 17 我想起来西南地区把食用的肉叫gaga，据说来自苗语
不知道跟这个golgi有没有瓜葛
kalb在德语里是牛肉的意思 |
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发帖数: 1 | 18 12月28日，答案 2 （2011）
Filariasis
From Wikipedia, the free encyclopedia
Filariasis
Life cycle of Wuchereria bancrofti, a parasite that causes filariasis
Classification and external resources
Specialty Infectious disease
ICD-10 B74
ICD-9-CM 125.0-125.9
Patient UK Filariasis
MeSH D005368
[edit on Wikidata]
Filariasis is a parasitic disease caused by an infection with roundworms of
the Filarioidea type.[1] These are spread by blood-feeding black flies and
mosquitoes. This disease belongs... 阅读全帖 |
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f******g
发帖数: 1003 | 21 http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31787297.html
以前讨论过进中心的条件。
看了几个这两年回去的，
傅肃能
代表性科研论文
1. Fu S, Fan J, Blanco J, Gimenez-Cassina A, Danial NN, Watkins SM,
Hotamisligil GS. Polysome profiling in liver identifies dynamic regulation
of endoplasmic reticulum translatome by obesity and fasting. PLoS Genet.
2012 Aug;8(8):e1002902.
2. Fu S, Watkins SM, Hotamisligil GS. The role of endoplasmic reticulum in
hepatic lipid homeostasis and stress signaling. Cell Metab. 2012 May 2;15(5)
:623-34.
3. Fu S... 阅读全帖 |
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f******g
发帖数: 1003 | 22 肖俊宇
1. Tagliabracci VS#, Xiao J#, Dixon JE. Phosphorylation of Substrates
Destined for Secretion by the Fam20 Kinases. Biochem Soc Trans. 2013 Aug 1;
41(4):1061-5. (# Equal contribution).
2. Xiao J, Tagliabracci VS, Wen J, Kim SA, Dixon JE. Crystal Structure of
the Golgi Casein Kinase. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Jun 25;110(26):
10574-9.
6. Xiao J, Engel JL, Zhang J, Chen MJ, Manning G, and Dixon JE.
Structural and functional analysis of PTPMT1, a phosphatase required for
cardiolipin... 阅读全帖 |
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c****t
发帖数: 19049 | 23 This is the most reasonable post I've seen for a while. Excellent
suggestions!
要原因。 因为肌纤维在酸性环境下，收缩能力变低。但乳酸在八小时内就会被机体清
除，所以事后酸痛并不是乳酸堆积引起。
golgi |
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B********y
发帖数: 1356 | 24 到什么程度算work to failure？是不是最后一个动作完成不了就算呢?
好多人都认为最后几个动作要做到做不标准或完成不了为止，这样是不是过量了呢？
要原因。 因为肌纤维在酸性环境下，收缩能力变低。但乳酸在八小时内就会被机体清
除，所以事后酸痛并不是乳酸堆积引起。
golgi |
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o**a
发帖数: 19 | 25 受教了。请问关于“肌肉只有在肌纤维撕裂后才能生长”一说，能不能给个reference?
要原因。 因为肌纤维在酸性环境下，收缩能力变低。但乳酸在八小时内就会被机体清
除，所以事后酸痛并不是乳酸堆积引起。
golgi |
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J***n
发帖数: 210 | 26 谢谢你清楚明了的解释！
可不可以再解释下weight training后有时候为什么会有的那种pumped的感觉。不是酸
痛，是发胀。这种感觉有时候有，有时候没有，而且似乎小点的肌群明显。比如glut从
来就没感到过。
要原因。 因为肌纤维在酸性环境下，收缩能力变低。但乳酸在八小时内就会被机体清
除，所以事后酸痛并不是乳酸堆积引起。
golgi |
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o**a
发帖数: 19 | 27 结合我自己的体验有点疑问：
首先我是事后酸痛，发生在锻炼后十几个小时，持续了大概三十几个小时。昨天傍晚结
束cardio kick后突然就不怎么疼了，晚上也没疼，今天基本没感觉了。
这样看到底是乳酸堆积还是肌肉纤维撕裂呢？不明白了。
要原因。 因为肌纤维在酸性环境下，收缩能力变低。但乳酸在八小时内就会被机体清
除，所以事后酸痛并不是乳酸堆积引起。
golgi |
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l*****g
发帖数: 2087 | 28 中国科学院院士李家洋
生平简介
李家洋（1956.7-）安徽肥西人。植物分子遗传学家，中国科学院院士，研究员。
中国
科学院副院长、党组成员。1982年毕业于安徽农学院（现安徽农业大学），1991年获美国
布兰代斯（Brandeis）大学博士学位，1991—1994年在美国康乃尔大学汤普逊（Boyce
Th
ompson）植物研究所进行博士后研究工作。历任中国科学院遗传研究所所长助理、所长，
遗传与发育生物学研究所所长。
李家洋主要从事植物分子遗传学研究，他利用模式植物拟南芥与重要粮食作物水稻探
索植物生长发育的调控机理。近年来的主要研究工作包括：采用图位法克隆了水稻分蘖控
制基因MOC1，开拓了水稻分蘖控制分子机理研究的新领域；利用水稻脆秆突变体分离了
B
C1基因，阐述了水稻机械强度的控制机理；通过获得的拟南芥胆碱生物合成突变体，初步
明确了胆碱合成与植物温度敏感雄性不育性的关系；通过图位克隆法分离出导致细胞死亡
的基因MOD1，明确了初级代谢途径的缺陷会导致植物细胞凋亡；利用转基因技术，创制出
色氨酸与吲哚乙酸合成量改变的转基因植物，从而提出植物生长素吲哚乙酸生物合成途径
的新模... 阅读全帖 |
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wh
发帖数: 141625 | 29 多谢！原文是Dr Lu Hui Lin，我本来犹豫是博士还是医生。但他读的也不是医学专业
，是生物化学和遗传学。那这个Dr翻不好了。还有你觉得他上物理课可能吗？就是原文
对不对？
刚查百度，卢惠霖的词条也不严谨，第一段写着“1925年留学美国，先后入海德堡大学
和哥伦比亚研究院，主修细胞学和遗传学，获博士学位”。但在履历里坦白交代“1928
～1929年在美国冷泉港海洋生物学研究所攻读博士学位，因病中断学业”。后面的详细
经历更证实没拿到博士学位，可惜：
“他获得哥伦比亚大学动物学系提供的奖学金，在纽约、长岛和冷泉港海洋生物学研究
所独立进行细胞学研究。他于此在蕨类的孢子母细胞中发现一种典型的亲锇小体——相
当于Golgi氏体的细胞器。哥伦比亚大学细胞学教授布恩对他表示祝贺，要他马上发表
论文，并将他介绍到纽约纪念医院研究部去研究X线对植物组织根尖细胞的生物效应。
可是他因过度劳累患上肺结核，住进纽约市北部的特鲁多疗养院，一躺就是10个月。他
原来希望病愈后好继续研究，但这时，他父亲和哥哥先后去世，留下老母和嫂嫂，催促
他早日回国。
1929年10月，卢惠霖谢绝好友们的挽留，抱病归国。... 阅读全帖 |
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m*********y
发帖数: 1735 | 30 谢谢了啊！！
http://www.sciencemag.org/cgi/content/abstract/science.1191776
Science DOI: 10.1126/science.1191776
Micro-Optical Sectioning Tomography to Obtain a High-Resolution Atlas of the
Mouse Brain
Anan Li,* Hui Gong,* Bin Zhang,* Qingdi Wang, Cheng Yan, Jingpeng Wu, Qian
Liu, Shaoqun Zeng, Qingming Luo
The neuroanatomical architecture is considered to be the basis for
understanding brain functions and dysfunctions. However, existing imaging
tools have limitations for brainwide mapping of neural c... 阅读全帖 |
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l****r
发帖数: 14809 | 31 【 以下文字转载自 Shaanxi 讨论区 】
发信人: mihoutaoboy (三秦父老如相问，一片冰心在玉壶), 信区: Shaanxi
标 题: 谁能帮忙下篇论文啊？
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Nov 5 13:13:50 2010, 美东)
谢谢了啊！！
http://www.sciencemag.org/cgi/content/abstract/science.1191776
Science DOI: 10.1126/science.1191776
Micro-Optical Sectioning Tomography to Obtain a High-Resolution Atlas of the
Mouse Brain
Anan Li,* Hui Gong,* Bin Zhang,* Qingdi Wang, Cheng Yan, Jingpeng Wu, Qian
Liu, Shaoqun Zeng, Qingming Luo
The neuroanatomical architecture is considered to be the basis... 阅读全帖 |
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r****o
发帖数: 105 | 32
核内和proteasome的标记我不知道。不过内质网和高尔基体
你可以分别用PDI抗体和giantin抗体，应该很多地方都有卖的。
PDI是蛋白质二硫键异构酶，C端有很典型ER retention signal,
很严格的只存在于内质网里头。Giantin则是cis 及其medial
高尔基体上的一种膜蛋白，是很好的高尔基体的标识物。 |
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d*****r
发帖数: 2583 | 33 ☆─────────────────────────────────────☆
nmda (SingingMouse) 于 (Mon Feb 2 16:26:06 2009) 提到:
表达一个和膜有关的GFP fusion protein然后看他的localization,同时用各种oganell
marker去染co-localization,看这个fusion protein定位或者聚集在哪个oganell,这
个方法和结果有多大的可信度? 有人说完全不可信,任选一个oganell marker,总能找到
一个细胞co-localized;有人说所有这个protein到过的地方都应该能找到co-
localization,所以ER,Golgi,endosome,lysosome都应该有co-localization. 如果这样
,那到底应该如何胞内定位这个protein?
☆─────────────────────────────────────☆
n158 (土人) 于 (Mon Feb 2 17:12:41 2009) 提到:
I think it i |
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s******y
发帖数: 28562 | 34 Promega, TnT T7 coupled transcription/translation kit
Depending on what degradation system was responsible. In vitro translation
system also contain ubiquitin and proteasome. However, it does not have
lysosome or golgi (which also contains protein degradation machinery).
You can add 10uM MG132 in the in vitro translation system (or your 293T cell
culture medium) to inhibit the proteasome.
的系统更容易降解我的蛋白？
Yes. If you want, you can try bacterial in vitro expression system. BUT, it
won't contain the |
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p*****m
发帖数: 7030 | 35 James Rothman拿个奖也说得过去把 除了SNARE 他之前做的golgi transport也算是
很重要的东西了 至于Tsien和Sudhof都没什么戏 |
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n********k
发帖数: 2818 | 36 Could any friends recommend nice and simply ways to look at mature neuron
dendritic morphology in hippocampus (CA regions and DG as well). my Cre is
so bright and GFP is so weak, hard to tell...not sure whether my sections
still can go for Golgi staining since we perfused with PFA and then sucrose
and then section at 30um...I am thinking to go with calbindin... |
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p*****m
发帖数: 7030 | 37 这个我同意 所以我一开始就说了 model的问题不是工业界的问题 是基础研究的问题。
但是这不妨碍他是个破坏pharma pipeline的问题：） 其实我说这些问题也好可能的新
想法也好主要是梳理一下我自己的思路 然后希望有像你这样内行来讨论，比如说我就在
想有没有更好的stroke model来screen drug（上几贴） 等等。
毒性和PKPD我们可以分开说。看起来PKPD的pathway保守型要强得多，比如一个molecul
e怎么过血脑屏障，怎么进细胞，怎么过golgi，等等，因此我是觉得用低等动物像fish
还是很有意义的。
说到毒性，你说的也许对也许不对，问题是我们还不知道答案:) 我知道比如说pfizer和
norvatis就在试探性的做看zebrafish做出来的毒理结果和大动物的有多相似，如果结果
不错的话那就不是问题了，对么？我只是说这是个可能的思路，用来解决现在HTS完全不
考虑毒性导致产出率太低的问题，不是说用fish就是100%可靠的思路。而且你也知道，
用大动物（狗 鼠）来做毒性试验的可靠性也不是100%的，他们和fish的效用差别未必就
是天上地下， |
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p*****m
发帖数: 7030 | 38 恩纳 你这个说的蛮有意思 啥时候有了toxicity marker的idea出来八八
我觉得这个主要还是delivery的进步，不管是用病毒的壳还是用NP+某targeting prote
in。这些肯定是会很有作用的（对了 我看过些用HBV做的壳用来delivery的文章 似乎实
际用起来效果没那么好？） 但是按说这个target specificity没有完全解决PKPD的问题
，比如说吧 这样也阻止不了most if not all的NP进到肝细胞里面，然后被无穷无尽的
P450和其他酶搞成碎片或者变个模样；
同样的，如果要是简单的杀死细胞，NP里面弄个toxin也还好，但是大部分的病除了can
cer以外你未必想要杀死那么多细胞（还是你这个肝细胞的例子 其实HBV里面致病的不是
HBV倒是肝细胞死掉，你要是也一杀了之那就等于催化肝病了），二是要定点清除细胞里
的感染性物质（对感染性疾病而言） 或者改变细胞内某个蛋白的活性等等（对代谢性疾
病而言），这样你还要保证你用的小分子在实施作用之前不会在lysosome或者golgi ap
peratus里面被加几个修饰集团 等等，或者干 |
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e*****r
发帖数: 164 | 39 我说的修饰是folding中的二级结构或者ER, Golgi中的多糖修饰，影响secretion和
folding的。anyway，就是function的
问题，还有能否分泌出来，不要形成inclusion body |
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s******y
发帖数: 28562 | 40 有大量的蛋白在合成之后是会被切的。如果是信号肽，有一些算法可以预测。
如果是calpain 切的话也勉强可以预测，
如果是被ER, golgi, lysosome那些乱七八糟的蛋白酶切的话就更难预测了（主要是数
据库没有建立起来） |
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q*******8
发帖数: 768 | 43 这个。。。直接和实验室老板联系比较方便吧。。。不然拿到了都来路不明。。。 |
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p*****m
发帖数: 7030 | 44 我觉得这么说吧：现实中大概超过95%的lead compound在preclinical和phase I被kill
掉吧（我记不住了 也许更多）。主要原因一是药代有问题，比如说到不了该去的organ
,或者进了细胞被golgi修饰了被lysosome讲解了,blabla；第二个是safety，直接把动物
搞死了再有用也不行。这两点在cell based screen里都解决不了。
如果用fish替代cell based screen的话，这两方面都会有进步。药代肯定要好得多，至
少细胞内修饰问题应该是保守的；safety方面，这个要看做出来的结果fish和mammal有
多大相关性了。今年fish meeting我看到有两个pharma再尝试validate fish as a tox
icity model，其中一个是pfizer还有一个忘了，还没有什么结果倒是，但是如果相关性
不错的话这方面fish也有优势。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 45 我的印象中是目前没有任何一个生命体（除了特别简单的RNA病毒之类）是完全
合成的。很多在媒体上乱炒的所谓合成，其实就是合成了DNA而已。
细胞的整个外壳，各种糖类，还有各种外膜和内膜结构，都统统是从现有的生物体
里面借来的。
尤其是真核生物的内膜(ER, Golgi, etc)，目前都还没有弄清楚是怎么起源的，
因为这个东西复制的时候是需要原有的膜来作为模板的，不能凭空的造出一个来。 |
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c*z
发帖数: 157 | 46 以前做过一个膜蛋白
IHC就是和其他蛋白一样的方法
IF只用甲醇(fix+通透)
做出来都是golgi pattern 没有在细胞膜看到任何东西 |
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E****A
发帖数: 184 | 47 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21525513
Cold Spring Harb Perspect Biol. 2011 Apr 27 [Epub ahead of print]
Evolutionary Forces Shaping the Golgi Glycosylation Machinery: Why Cell
Surface
Glycans Are Universal to Living Cells.
Varki A.
Please send it to e****[email protected]
Thanks in advance! |
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b******r
发帖数: 111 | 48 Note: NHEs is membrane proteins that transmembrane 12 times. NHE5 is
localized to the plasma membrane;NHE6-9 reside on organellar membranes(
endosome,Golgi);
1. pcDNA transfects NHE5-9 through Fugene 6(ratio is 3 uL of Fugene/2 ug of
DNA) in 293 cells. After three days,collect cells.
2. Cold PBS washes cells. Add 150 uL of lysis buffer(final concentration:
50mM Tris pH7.4, 150mM NaCl, 1% triton, 0.1% sds, cocktail inhibitor)
into each well of 6-well plate. Scrape cells.
3. The lysate gets st... 阅读全帖 |
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c******g
发帖数: 49 | 50 提供一种可能：有可能是破坏的ER结构。左上角的大的说不定是小的圈fusion形成的。
golgi也有这种现象。 |
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