o**4
发帖数: 35028 | 1 我有个ES细胞系，里面有FLP/FRT系统，有能直接处理细胞的Flippase吗？
是不是都得用病毒之类的flippase？这样会整合到基因组吧？
非常感谢， |
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n***g
发帖数: 5027 | 2 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: nanog (大家好), 信区: Biology
标 题: 【包子】怎么用FLP-FRT系统同时敲掉两个抗性基因？
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Nov 11 18:57:39 2015, 美东)
同时还不会敲掉靶向基因呢？
比如 FRT-neoR-FRT-GENE A-FRT-puroR-FRT，这样的话用flippase处理的话，gene A也
会被敲除吧？
另外，FRT的sequence，就在抗性基因两侧加上5'
GAAGTTCCTATTCtctagaaaGtATAGGAACTTC3'，是不是就可以了？
谢谢大家 |
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O******e
发帖数: 4845 | 4 1. Most likly.
2. 我也没用过Flippase的表达载体。公司买不到，就去找发过类似文章的作者要呗
位置 |
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n***g
发帖数: 5027 | 5 同时还不会敲掉靶向基因呢？
比如 FRT-neoR-FRT-GENE A-FRT-puroR-FRT，这样的话用flippase处理的话，gene A也
会被敲除吧？
另外，FRT的sequence，就在抗性基因两侧加上5'
GAAGTTCCTATTCtctagaaaGtATAGGAACTTC3'，是不是就可以了？
谢谢大家 |
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