d*****r
发帖数: 39446 | 1 【此篇文章是由自动发信系统所张贴】
Flipase 申请加入本俱乐部的请求已经通过审批, 成为本俱乐部的正式成员, 特此通知. |
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w***n
发帖数: 4358 | 2 ☆─────────────────────────────────────☆
Flipase (FLP) 于 (Fri Mar 25 16:08:24 2011, 美东) 提到:
现在手头有：
面 （超市卖的上海幼面，或者挂面，没有碱面）
芝麻酱 （六必居）
辣椒油 （李锦记）
还需要啥？怎么做比较好？想吃热干面了。。
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somekiss (哎哟，不错喔～) 于 (Fri Mar 25 16:48:14 2011, 美东) 提到:
热干面一定要用碱面。其他神马的都是浮云。
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Flipase (FLP) 于 (Fri Mar 25 16:50:55 2011, 美东) 提到:
哪有碱面卖？ 别人给的大汉口袋装，貌似是方便面，吃着也还顺口。
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somekiss (哎哟，不错喔～) 于 (Fri Mar 25 16:56... 阅读全帖 |
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m******5
发帖数: 1383 | 3 Flipase表达载体我有，但那要在细胞里共转
我有查到有E.coli自带flipase的，质粒transform进去delection就完成了
正四处找commercial的 |
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s******r
发帖数: 2876 | 4 马上做一个大肠杆菌的表达construct.
共转大肠杆菌不就行了。
Flipase表达载体我有，但那要在细胞里共转
我有查到有E.coli自带flipase的，质粒transform进去delection就完成了
正四处找commercial的 |
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s****a
发帖数: 55 | 5 BAC的copy数量要少很多。 还有flipase的效率应该比cre要低一些。你后面还得做
screening 把没有切掉的克隆去掉。
不知道flipase可不可以做in vitro的剪切。如果可以的话剪了重新转化，再大提做
injection也不是很多活啊。 |
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A*********u
发帖数: 8976 | 6 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: Flipase (FLP), 信区: Biology
标 题: 秘书发的，一个有意思的video game
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Mar 17 23:24:20 2011, 美东)
http://ori.hhs.gov/TheLab/
To All Researchers:
The Office of Research Integrity has released an interactive video on
research misconduct. In "The Lab: Avoiding Research Misconduct," you
become the lead characters in an interactive movie and make decisions
about integrity in research that can have long-term consequences. The
simulation addresses Responsible Conduct... 阅读全帖 |
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A*****e
发帖数: 29772 | 7 成功！
已发送伪币10给如下100个ID：
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l*******g
发帖数: 28502 | 8 ☆─────────────────────────────────────☆
linger0223 (花非花) 于 (Sun Jan 30 17:41:58 2011, 美东) 提到:
拜托班班了。。。人可能不多，就早点开始吧。。。
。。。让包子飞一会儿。。。
提前给大家拜年了，
希望班上人气旺旺，
希望爸爸妈妈一切都好，
希望自己可以找到好的工作和归宿，
新的一年一定要好好的，加油：）
马甲的话，最多就一个吧。。。谢谢大家。。。
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Guyver (凯普) 于 (Sun Jan 30 17:50:44 2011, 美东) 提到:
哈哈，第一个~
祝福非花，祝福大家，祝福自己
春节快乐:)
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yaozi3 (春田花花幼稚猪) 于 (Sun Jan 30 17:54:26 2011, 美东) 提到:
OMG!!!THX!!!
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... 阅读全帖 |
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w***n
发帖数: 4358 | 9 ☆─────────────────────────────────────☆
CSO (CSO) 于 (Fri Jan 28 14:38:28 2011, 美东) 提到:
个人感觉 除了第七个太老之外 其他的都相当给力啊
1、某 天，妹 妹 走 到 哥 哥 房 里。 妹 妹：“哥， 把 我 的 睡 衣 脱 下 来，
好不 ？” 哥 哥 照 着 做 了 。妹 妹 又 说：“再 把 我 的 胸 罩 脱 下 来 吧！
” 哥 哥 也 依 着 做 了。妹 妹 再 说：“最 后 把 我 的 内 裤 脱 下 来 吧！”
哥 哥 做 完 之 后，妹 妹 拿 起 衣 物，说：“ 以 后 别 再 穿 我 的 衣 服 了
！变 态！！！
2、【楼猪】：我每次都吃了毓婷的，但为什么我的女朋友还是怀孕了呢？
【回复】：因为别的男人没有吃！
3、甲：知道武藤兰吗？ 乙：不知道。 甲：知道苍井空吗？ 乙：不知道。 甲：知道
吉泽明步吗？ 乙：不知道。 甲：知道范冰冰吗？ 乙：她也拍那个东西？
4、【问题】：一对情侣一起去殉情，可是他们身上的钱只够买一瓶农药，而且这瓶农
药的药量只够一个人死，可是最后他... 阅读全帖 |
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w***n
发帖数: 4358 | 10 ☆─────────────────────────────────────☆
lovelybear (呵呵，纽妞～) 于 (Mon Jan 31 13:44:38 2011, 美东) 提到:
(口头Offer拿到了，多谢大家！包子发到108楼！）
刚interview完，面了两个senior director,两个director，group meeting 了三个man
ager
还有一个HR。
还可以，感觉还可以。只有一个director问了比较多的technical的问题。
有业内人士推荐，另外和面试的人有共同认识的业内人士，所以聊得比较好。
这公司离我家走路沿河半小时，开车满打满算门到门15分钟，要做的事情也是我一直想
做的。
唯一问题是work hour比较长，9-6:30/7，我要接送宝宝。提出了这个问题。然后salar
y不知道他们接不接受。。。
请大家来点给力的bless吧！我还是很想去的，希望能够work out。。。
只要有bless就发包子了，一直到有消息为止～
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lo... 阅读全帖 |
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w***n
发帖数: 4358 | 11 ☆─────────────────────────────────────☆
ie (江城晃晃) 于 (Thu Mar 17 23:11:15 2011, 美东) 提到:
这次真的需要好运气。请大家给力的bless。
前20个，精装mini碘包子，你懂的。
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lovelybear (呵呵，纽妞～) 于 (Thu Mar 17 23:14:58 2011, 美东) 提到:
吃！
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monk (猪六戒~版大) 于 (Thu Mar 17 23:15:31 2011, 美东) 提到:
猛烈bless
要换工作了?
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lovelybear (呵呵，纽妞～) 于 (Thu Mar 17 23:15:42 2011, 美东) 提到:
忘了给力bless了，
BLESS!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!... 阅读全帖 |
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s******n
发帖数: 134 | 12 谢Flipase，俺知道NIH的J1三年后可以延期至5年，但是其它地方的J1也能5年吗？
谢谢了。 |
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m******5
发帖数: 1383 | 13 我的desired 序列下游有一段FRT序列
是否有任何现成的polyA harboring line可以和我的老鼠mate，再配个flipase
allelle来使得我想要的这个基因表达呢？(想要的这个基因本身不含有polyA) |
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m******5
发帖数: 1383 | 14 如图，刚做好一个bac recombinnering的plasmid
想同时用tag标记C-terminal,另外因为是最后一个Exon，所以可以用是recapituate
endogenous 3,UTR调控，没有加artificial polyA
现在的问题是，因为种种原因，FRT-Neo-FRT不得不插在如图mCherry和3'UTR中间的位置
麻烦来了
1, 因为Neo selection marker和我的基因是同向的，在FRT-Neo-FRT不删除的情况下，
我的基因是否会用上Neo 的3'UTR(SV40 polyA)
2,哪些方法可以最快地删除Neo?我听说有bacterial表达flipase的，但四处找不到
commercial的 |
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m******5
发帖数: 1383 | 15 如图，有一个BAC transgenic Vector含有一个要命的FRT flanked Neo cassette
必须用flipase切除
为省时间，想co-microinject一个CAGGS-Flpe plasmid
没有查到相关文献，但觉理论上可行，求高手re-assurance!! |
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s****a
发帖数: 55 | 16 就是这个POSTIVE FOUNDER.
我做Neuroscience的。你说的这块其实我不是很了解。我记得cre好像可以在in vitro
的情况下使用. flipase不知道行不行吧。
另外，我想过把一个bac整合到细胞基因组里，做一个stable line。 不知道lz有没有
什么好的建议。能比较快，而且很稳定。 谢谢！ |
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s****a
发帖数: 55 | 17 就是这个POSTIVE FOUNDER.
我做Neuroscience的。你说的这块其实我不是很了解。我记得cre好像可以在in vitro
的情况下使用. flipase不知道行不行吧。
另外，我想过把一个bac整合到细胞基因组里，做一个stable line。 不知道lz有没有
什么好的建议。能比较快，而且很稳定。 谢谢！ |
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s****a
发帖数: 55 | 18 that will be great! I will PS you my contact info. i was thinking you can
just transform flipase into the bacteria with your BAC and do PCR screening.
that should work. talk to you later. |
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m******5
发帖数: 1383 | 19 你再查查是否其中一个line有flipase line instead of cre line? |
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m******5
发帖数: 1383 | 20 如果是Komp的targeting vector,应该是KO first吧
这好办，买个Flipase鼠把它变成conditional knock out先 |
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m*********k
发帖数: 10521 | 21 [Stock] wavelets01 Feb 1 ● 发包子了，今天88个，明天88个
10*176=1760
成功奖励 10 伪币的用户: HeraklesGong, vankie, zirconia, asu, dkwatch, tofel, czh123, copperBull, BigMaJia, chuby, wpwhy, hamster, JianlianYi, esthan, freyjaa, CottonnCandy, RWR, Funding, kingcrown, linger0223, guanjiu, MaoZhuxi, alundut, bluesky02, mayyi, AST, sioc, LTA, Ziheng, Antoine, reddest, cleveri, biot, ccat, veryqq, goseewait4, paladinyt, mikeandlily, fkjl, jingoshine, reborn2006, jamestaylor, summmer, kingcrowd, soySource, DVD209, xyzg... 阅读全帖 |
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m*********k
发帖数: 10521 | 22 [WBCenter] Viaaa Feb 2. ● Hubei版申请发包子
10*108+50*57=3930
成功奖励 50 伪币的用户: santorini, txkman, Rodimus, lovelybear, simon1000, howmoney, yk7209, happymichael, lanzhu, CSO, inthebox9, k79, defu, xiaolanchong, Tuo, wh, Zarate, flytutu, coldfire666, macbookair, lancy1982, ie, oldsheep, baoyuhong, IamSam, myfaith, whbin, feefly, mushroom, tempuser, caber, mittim, abacusoyh, hikari, sweetww, playonpaper, Helloroad, aiyoaiyo, sunmoonstar, SimoneVerdi, birdsman, denville, flyinger, yellowchild,... 阅读全帖 |
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