o**i
发帖数: 1165 | 1 最简单的解释是
有gene的alternative的splice form 里面没有exon4 功能照常
或者你们的exon4的那个construct设计错了 |
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c*t
发帖数: 1063 | 2 一个dominant的老鼠，heterozygous breeding female根本不怀孕，所以无法得到
homozygous的老鼠。现在只能用heterozygote来找mutation。并且位点在比较大的
intro上，如何找这个mutation呢。。
大概图（exon 2 and 3 deletion）
exon1（70） （intron 60k） exon2（1800） exon3（400） （intron 20k） exon4
（140）。
欢迎各位前辈指教.
谢谢！！！ |
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D*a
发帖数: 6830 | 3 你要看看你exon3是干什么用的，多少bp
比如如果是膜蛋白，是不是胞外亲和ligand的位点，或者往胞外运输的信号，或者跨膜
部分，或者下面的kinase部分正好能被你切掉。
而且最好是少了exon3之后能造成exon4的移码突变，然后弄出几个stop来。
这样才能确保你真能ko掉
完了你得在老鼠上测测全长的mrna是不是真的下降了。 |
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Z**********g
发帖数: 222 | 4 可能是该基因通过alternatice splice产生至少两种mRAN,一种mRNA包含exon4,其编码
蛋白不是发育必需;另一种mRNA包含exon5,其编码蛋白为胚胎发育必需.所以确认一下该
基因可能的alternatice splice. |
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