T****i
发帖数: 15191 | 1 您老过于悲愤了。
这个没看原文。如果比CRSIPR更好用，那申请个专利也值了。CRSIPR的问题还是有些的。 |
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o**********n
发帖数: 2 | 2 我目前在做lncRNA，现在有的plko系统感觉效率不是很高，想用CRISPR系统来试试？
有没有哪位高人指点一下如果要使用CRSIPR去knock out或者knock down 某个lncRNA，
应该怎样操作呢？
如果在该lncRNA的启动子区域选择位点可行吗？但是又要怎样选择gRNA的序列呢？
或者是不是可以在该基因的两端各设计一条gRNA把它整段剪去呢？
谢谢各位，欢迎讨论 |
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f*****f
发帖数: 195 | 3 看哪些shRNA/guide RNA被富集，deep sequencing depth一般不需要RNA-seq那么高吧
，一个样品一般价格多少？有公司测序链接么？ |
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s******r
发帖数: 1245 | 4 不用很deep，miseq就行，不少实验室都有机器自己跑，要不问问学校facility呗 |
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d****u
发帖数: 1553 | 6 看你的library有多大，通常reads number保证你screen的representation就好。如果
是genome wide screen的话miseq可能不够。 |
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S**********e
发帖数: 620 | 7 首先，市场和科学是分开的，很多评判标准不同。
从学术上讲，巧夺天工永远都只是梦想，自然科学太强大，看看现在各种技术近二十年
来进步这么大，但是仍然解决不了生物学医学很多问题，尤其是临床上，贡献太微不足
道了。所以我也同意你的观点，crsipr的临床价值也根本就是没用成熟。一个简单的例
子，NGS现在可以赚钱，有钱人可以做，好，我整条染色体赤裸裸摆在你面前，任凭你
大数据再强悍的分析，你也读不懂，高血压糖尿病怎么修理，NGS不管，肿瘤病人的序
列读了就更混乱了，你还不知道各种细胞群体是不是一个序列，预防就更扯蛋了。但是
这不同了，确实有人愿意自己掏钱做，你说为什么？是为了更科学的解决自己健康问题
吗？不是，是市场运作的结果，各种广告铺天盖地的结果，在加上点科学的称号，比如
院士endorse一下，自然有市场，说白了和电线杆小广告一样骗钱，就是伪装起来而已
。这个市场阶段，基本能不能赚钱是和能不能解决问题是两回事。至于大数据是不是有
科学价值，肯定有，以后慢慢分析去吧，记得还得各种验证，况且单一基因水平上还和
功能水平上不是一回事，五十年再来看有多少进步，总之很慢。不要提任何hcy的阿狗
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