h****u
发帖数: 618 | 1 需要买一台PCR 做 mRNA 和 microRNA expression. 以前一直都用 Applied biosystem
StepOnePlus™ PCR, 但是最近看到 Bio-Rad CFX96™ 不需要calibration
,但是StepOnePlus™ 是需要买calibration kit的。不知道哪个更好用呢？如果
两者性能相当，买 biorad 就一劳永逸了。
而且听sales 说， biorad 使用5个led 激发， steponeplus 只有一个蓝色led， 所以
做Multiplexing的话，是不是biorad 更好呢？ 而且应为多个LED，light path 也和
StepOnePlus™ PCR 不同，所以不用ROX 校准。真是这样吗？
另外在 biorad 上使用 taqman 的试剂会不会有问题呢？ 我看到Applied Biosystem
网站上有专门给BioRad CFX96™ 设计的试剂。
请大家指教。非常感谢！ |
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s**u
发帖数: 9035 | 2 最近，我们实验室购买一台Bio-rad CFX96 real-time PCR， 用一个月后，数据不稳定
，特别是边缘效应明显，A12--H12数据偏高，中间也有数据乱跳的现象。公司派了一个
Engineer检查，说产品合格，Lid压力偏低，可能导致Plate压不紧，液体挥发。建议更
换新的Lid， 可是地区Manager不同意，说完全合格。
只几天8/27，8/28 作8块plate,效果还是比较好，8/29连续2块Plate均不好，数据乱跳
。我们现在每次Run完，均需要让PCR shut down15 分钟再继续Run,可是还是很不稳定
，正是愁死我了。我们有大量临床Sample。
请教使用过Bio-rad CFX96 realtime PCR的朋友们，仪器不稳定的原因有哪些？如何解
决？我们3人操作绝对没有问题，以前使用Biorad-IQ5也有同样问题。 |
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s**u
发帖数: 9035 | 3 We use Bio-rad plate and Bio-rad film as they recommended.
I sealed the film properly each time, but sometimes I found solution
evaporate at A12 to H12 (right side), I don't know why.
I prepared my plates on a well cooler and put on ice.
I got an email from Bio-rad Technical service below this morning(8/31/11 9;
22 am):
I just wanted to send you an update on the status of your CFX96 case.
As I conveyed to you yesterday during our phone call, your situation is one
that we have never observed and ... 阅读全帖 |
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o**d
发帖数: 3080 | 4 我们这里前有台CFX96，也是盖子坏了，现在在返厂修理，前期的症状和你遇到的情况
一样，边缘的孔被蒸空了。
和bio－rad好好沟通一下，让他们换修。 |
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s**u
发帖数: 9035 | 5 Bioread sales representative came to our Lab this morning and told us that
Biorad will replace our current CFX96 and replace a new one, hopefully we
will get it next week. |
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s**u
发帖数: 9035 | 6 I just got email from FEDEX, our new biorad CFX96 realtime PCR has been
picked up in CA, on 9/9/11 16:19 pm (Eastern time 19:19). |
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J********3
发帖数: 3151 | 7 请大家参谋一下CFX96 Touch Real-Time PCR 和ABI7500价格差不多，但新一点，性能
及可靠性如何？
Agient 3005P价格便宜，主要缺点是啥？
谢谢！ |
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h****u
发帖数: 618 | 8 需要买一台PCR 做 mRNA 和 microRNA expression. 以前一直都用 Applied biosystem
StepOnePlus™ PCR, 但是最近看到 Bio-Rad CFX96™ 不需要calibration
,但是StepOnePlus™ 是需要买calibration kit的。不知道哪个更好用呢？如果
两者性能相当，买 biorad 就一劳永逸了。
而且听sales 说， biorad 使用5个led 激发， steponeplus 只有一个蓝色led， 所以
做Multiplexing的话，是不是biorad 更好呢？
另外在 biorad 上使用 taqman 的试剂会不会有问题呢？
请大家指教。非常感谢！ |
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R****n
发帖数: 708 | 9 我用过这五种
CFX96 system,
Opticon2 system (Bio-rad),
7300 fast system,
Step one plus system (ABI)
Lightcycler II 480 (Roche).
我觉得如果不是做HRM，其实都差不多。不过我们组里都觉得Biorad CFX96比较user
friendly,但是出来的最晚。roche是用idaho的技术，资格比较老。ABI硬件很好，软件
很不好用。Rotorgene似乎温度控制的最好，不过没用的。能做HRM大概都是四五万块钱
.刚买没多久，还不知道售后怎么样。
http://hrm.gene-quantification.info/
Eppendorf, |
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R****n
发帖数: 708 | 10 I used ABI 7300, Biorad CFX96 and Roche lightcycler 480.
Generally speaking they are all good for your purpose. I think Biorad CFX96
is better one among the three. |
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c******k
发帖数: 252 | 11 我们老板拿到stimulation的funding买一台multi-color PCR 机器，倒霉的我负责收集
信息，好选择型号。现在找的是Applied Biosystem的stepone plus和9700HT. biorad
的CFX96. 请用过的达人给点建议吧， 谢谢了！ |
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w***a
发帖数: 4361 | 12 我们实验室用这个钱刚买了台CFX96...
biorad |
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w***a
发帖数: 4361 | 13 这么简单的应用随便哪个real time PCR都能做，
貌似biorad的机器都便宜些吧。我估计ABI会更好些。
我们lab以前一直用的是 iCYCLER， biorad上一代的机器，也没啥问题。现在这个
CFX96更fancy一点，run一个plate大约就1个小时，完了还会自动把结果发email到你的
信箱。 |
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A******y
发帖数: 2041 | 14 Personally I like Bio-rad one, I think CFX96 still has the best optic design
acquired from MJ-research now with the 2nd best (reliable) thermal cycler. |
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w***a
发帖数: 4361 | 15 biorad CFX96一个run也就1小时多点吧。
这个机器还可以连上网络，设置一下，程序结束了直接email发结果。
两年要换，bio-rad是LED,基本上不用.bio-rad就像普通pcr仪可以开着overnight，第
二天看结果。前两个一定要走前关掉，要不机器一晚上轰轰响。bio-rad不好的地方就
是，升温降温比较慢。ABI和ro |
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n***e
发帖数: 180 | 16 同推荐Bio-rad cfx96/384
就像ArtyArty提到的，heat block 和 optic reader都是最好的，任何一个孔都能正常
使用，其他的系统边角都或多或少有点问题，LED光源不需要担心老化更换
质量不错，买了两年多一点问题都没有，同时买的另一台Eppendorf的两年warranty一
过就完蛋了
软件也是所有系统里最好用的 |
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a********k
发帖数: 2273 | 17 谢谢大家，给了几个小包子。老板要买仪器，花钱也是不花白不花。。。不过买个信价
比高的总是不错
就是不知道CFX96做HRM效果怎么样 |
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A******y
发帖数: 2041 | 18 What kind of plate are you using? It looks like you didn't seal the film
properly. The best plate is white semi-skirt. If you need the PCR to shut
down 15 mins, are you sure you cool down the plate after the run i.e. around
4 degree. Also, did you prep your plate on a well cooler?
There are also one possible problem. Did you check the linearity of your
primer? It is extremely crucial and I know a lot of lab don't do it (which
is hilarious). Primary simple should jump around a bit, and the... 阅读全帖 |
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s**u
发帖数: 9035 | 19 We use Applied Biosystem MicroRNA commericial primer, the primer are all
good.
We just find solution evaporation on 2 plates on 8/29/11, one is FAM, one is
SYRB plate, and it never happened before although I run more than 100
plates using IQ5 and 30 plates using CFX-96.
还有这台CFX-96是作为公司demo用的，原价29，000， 因为作为demo用了半年，所以价
格为25，000，我们7月1日才刚刚购买拿到仪器。7月14日才刚刚完成培训。结果2-3个
星期就发现问题，至今也无法解决。 |
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A******y
发帖数: 2041 | 20 Just because it is commercial primer, does not mean is good if you didn't
check it in your system. Bio-rad should replace the real-time unit, if it
is the problem. |
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v***2
发帖数: 131 | 21 Hi, have you run minus RT? and have you checked the primer dimer? I dislike
the BioRad instrument too, it is not as stable as the Applied Biosystem |
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A******y
发帖数: 2041 | 22 I used both, AP's new one has software problem, when it crashes you lost the
entire run. The Bio-rad one still have the best software and hardware
setting. I don't see things evaporate from mine.
dislike |
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M*****n
发帖数: 16729 | 23 demo至少应该40% off。
才便宜15% 太亏了。 |
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l********s
发帖数: 70 | 24 1 你的总体系别做太小了，至少保证15ul以上，
2 我感觉其实塑料管好于那个贴膜的plate，那个多少会有些leaking |
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m*p
发帖数: 226 | 25 Mine CFX-96 costs 25,000, brand new, works well.
is |
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x**e
发帖数: 163 | 26 我上次在版上也问了同样的问题。和你们一模一样的仪器，我也是很多次（但不是每一
次）做技术重复间的差异都非常大，3个技术重复给的Ct值有1-2的差异。我没有仔细检
查样品蒸发的问题，目测反应后的体积没有发现明显的差异。下次也应该仔细查看样品
的蒸发情况。
看了你的情况，我也不由得怀疑起是不是这个仪器的问题了。 |
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s**u
发帖数: 9035 | 27 昨天下午，我做了一块，发现又有更加奇怪的现象发生，96 well Plate右边一半没有
加任何sample, 完全空白，竟然也会出现大量读数，而不是Ｎ／Ａ。
我们老板很生气，决定向Biorad公司交涉更换一台。要到下星期二上班后发email，把
最近一个星期的奇怪现象再次反映给Biorad |
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A******y
发帖数: 2041 | 28 What's your plate? I am just curious. It does look like is your instrument. |
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s**u
发帖数: 9035 | 29 We use Biorad multiplate PCR plates Low 96-well clear (MLL9601, LOT# LCRN1,
DOM: 230311), and PCR sealer Microseal 'B' film (MSB1001, LOT# 115084, DOM:
230211) to do our experiment. |
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A******y
发帖数: 2041 | 30 Interesting. Did you check your heating element to see if it is clean? For
all RT-PCR,I will recommend semi-skirt white plate to eliminate potential
plate flex and maximum signal. |
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s**u
发帖数: 9035 | 31 Thanks for your suggestion, from 9/12/11 we started using this kind of plate
, instrument runs well
No edge effects happened, no evaporation happened again.
For |
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T****i
发帖数: 15191 | 32 谢谢了，不过晚了点。已经买了Bio-Rad的CFX96 touch。 |
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l**********1
发帖数: 5204 | 33 pls check a couple of years ago here similar post:
juzbox
2011-05-26 11:38:29
来自: 95.91.
4th floor
完全同意！
Biorad应该是性价比最好的，稳定性兼容性也不错。LC480使用超过2年之后问题接踵而
来，而且维护费用离奇的高，我们这LAMP UNIT接连坏了2次，维修报价直接让人吐血。
试剂耗材更不用说了，好在用的多，给打了非常大的折扣，但一般实验室如果不是当水
喝的话估计拿不到这个价格。板子我们后来用从另一个公司订制的，价格便宜一大半，
而且更好用。结果roche一听说我们要换板子，立马就表态可以match这个价格（之前怎
么谈都只同意给7折）。
其实实验室用过biorad的都觉得好，不过奇怪的是，一个非常重要的检测，只用用
LC480才能得到稳定的结果，biorad和ABI都不行（也许是相对老一点的机器的缘故），
所以老板就只认LC。当然，除了试剂耗材和维护费用，LC480也算得上好机器了
contract
括2台仪器加96well和384的探测头各一个（3年前的价格）。
c... 阅读全帖 |
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m******e
发帖数: 1932 | 36 求问：这两个机器哪个好？主要跑taqman和sybr，也有可能会用到hrm。这两天demo,
感觉Roche的在小amplicon上的well to well variation比biorad小，但amplicon大一
些, roche的well to well variation就大得多，而biorad不论Amplicon size，表现都
挺稳定。有经验的同学们请多多指教！谢谢！ |
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