j********r
发帖数: 156 | 1 以前听说过，cleaved capase3/9的检测 using immunoblot 需要用sds sample buffer
to lyse the cells. 如果用other lysis buffer, such as RIPA, there are might
be problems. Not sure if this is true. |
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S**********e
发帖数: 1789 | 2 用promega的试剂测caspase3/7火星。明明细胞凋亡了，但结果比control还低，不知道
什么原因。
是不是活性太高了，把底物用光了？
请指教 |
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S*********s
发帖数: 304 | 3 死过了
蛋白都降解了
降低drug浓度或者做time course |
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a*****x
发帖数: 901 | 4 正解。可以normalize to viable cell number。还可以用caspase3/7的imaging dye。 |
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S**********e
发帖数: 1789 | 5 谢谢两位。caspase3/7的imaging dye 不存在死过头的问题？ |
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a*****x
发帖数: 901 | 6 You can quantify the signal for each cell |
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s*********s
发帖数: 110 | 8 sina上有个comment
NIBS-王晓东实验室发现Necrosis的分子机制 此博文包含图片 (2014-04-12 14:
41:15)[编辑][删除]转载▼
NIBS-王晓东实验室发现Necrosis的分子机制
NIBS-王晓东实验室发现Necrosis的分子机制
在April 10发表的Molecular Cell杂志封面文章中，王晓东实验室描述了MLKL的磷酸化
是如何导致了细胞程序化坏死的分子机制。MLKL的磷酸化使其从单体状态向多聚体状态
的转化。多聚化的MLKL可以结合多种磷脂，从而由细胞质（弥散分布）转移到细胞膜和
细胞器膜上；并在这些膜结构中形成通透性孔道，从而破坏膜的完整性，引起细胞坏死
。这一点有点类似于细胞凋亡中的重要的蛋白Bax和Bak, 在细胞凋亡领域，Bax/Bak在
细胞凋亡过程在线粒体表面聚集，多聚之后形成孔道，从而释放细胞色素C(Cyto C),
诱导细胞凋亡小体，从而激活Caspase3,最后导致细胞凋亡。
这篇文章同时介绍了王晓东实验室还开发了(Epitomics公司)能特异识别人源p-MLKL磷
酸化的单克隆抗体，并证明这一磷酸... 阅读全帖 |
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