g*****n
发帖数: 241 | 1 大家做western blot的stripping buffer是什么啊？
我以前用过的home-made的buffer有BME，味道太重了。有没有不需要BME的配方？
或者推荐一个便宜的公司产品。
谢谢 |
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g*****n
发帖数: 241 | 2 大家做western blot的stripping buffer是什么啊？
我以前用过的home-made的buffer有BME，味道太重了。有没有不需要BME的配方？
或者推荐一个便宜的公司产品。
谢谢 |
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r******y
发帖数: 21907 | 3 我们用macherey-nagel的，一德国公司，column buffer都可以单独定，也适用qiagen
的buffer,已经弃qiagen了。
kit |
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r******k
发帖数: 446 | 4 小弟最近做一个蛋白的磷酸化 以为没有特异性的抗体。 只能IP total的protein 然后
用Pan-Tyr。 但是这个磷酸化总是出不来。班上有大牛说用预热的（90度以上？）SDS
loading buffer 挂下来以后直接boil再稀释10-20倍做IP。 但是有一个问题，10cm的
dish怎么也要用500ul的loading buffer scrape下来吧？ 那也无法稀释了呀？
难道先用pbs刮下来？？ 而且这个PBS是冰的把？而且还有protease inhibitor 还有
phospho-stop？ |
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M*******C
发帖数: 183 | 5 以前我们用ECF底物，strip用0.2N NaOH 就好了。
现在ECF 买不着了，改用ECL plus，Thermo Fisher/Pierce （32132）的，发现用NaOH
没法strip了，第一次blot的带仍然在那里。 看了ECLplus 的说明书，他们叫用
Thermo Scientific™Restore™ Western Blot Stripping Buffer (
Product No. 21059) 或者Restore Plus Western Blot Stripping Buffer (Product
No. 46430). ， 价格 500ml/$130, 太贵了，strip 一张膜得10ml 吧，500ml 50张膜。
不知道成分是什么，想自己配点，求各位指点！谢谢 |
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发帖数: 1 | 6 我买了他家的这个buffer了。我给客服写信了，他说他家的buffer有专利的，配方不公
开，他只能说是非离子型去垢剂，但是不是NP40，也不含Triton。
[在 florida2009 (福达) 的大作中提到：]
:最简单的方法Tris pH7.4 加NaCL 浓度都是25 mM 外加0.5% 的NP40， 提细胞核棒棒
的，细胞核裂解可以用RIPA 直接sonicate |
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发帖数: 1 | 7 没错，我看了你贴的poster，确实就是NP40（也叫Igepel CA630）。
Sigma坑人啊，这个buffer卖的不便宜。
Sigma的客服回信说
Hello
Thank you for contacting Sigma-Aldrich Technical Service, now MilliporeSigma
- the life science business of Merck KGaA, Darmstadt, Germany.
The exact formulation of the lysis buffer in the NUC101 - Nuclei Isolation
Kit: Nuclei EZ Prep is withheld as proprietary information. We can say that
it is a non-ionic detergent that does not contain reducing agents. And it
does not contain Triton or any protease inhibitors... 阅读全帖 |
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h*****t
发帖数: 1226 | 8 1M NaOH的pH应该是14.
还有Tris buffer在低于pH6.5的时候Buffer capacity很小了. |
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k******e
发帖数: 8870 | 9 换强一点浓度高一点的BUFFER先洗洗再换成你要的BUFFER |
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y*****s
发帖数: 1047 | 10 no matter how you mix 50 mM citric acid and 50 mM trisodium citrate, you
have a 50 mM citrate buffer at a certain pH at the end
if you mix 50 mM citric acid and HCl or NaOH, you will have a < 50 mM
citrate buffer with some NaCl at the end depending on the ratio between you
final and initial volumes
50mM
pH3 |
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k*********3
发帖数: 257 | 11 我设计了一个单位增益的电压buffer 供电电压（+12~-12） 用的结构很简单 差分对加
class AB output stage 发现接成单位增益的buffer（电压跟随）之后摆幅不够 最大
只有到正负 4v 输入信号如果到了正负5V以上 我的电压跟随器就跟不上了 信号都被砍
头了 |
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s********k
发帖数: 6180 | 12 比如其中一个user在看视频，另外一个在上网，这两个user在同一个BS里面，那么他们两个的buffer是shared还是各自有一个buffer？ |
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z*****n
发帖数: 7639 | 13 Well, if you talk about WCDMA release 99, node B is
only a pass-through device. Buffering is only applied
in RNC.
In HSPA (Down/Up), node B has local ARQ for packet
retransmission. Each user has separate buffer. |
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R*j
发帖数: 248 | 14 Good point. Yes, I agree that titration is the very practical method, and is
widely used in the lab. Yet, if you prepare a specific buffer for the first
time, calculation using H-H equation can at least give you some sense on
the ratio of buffer pair. When you pour one solution to the other, you
roughly know how much is needed. |
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l*y
发帖数: 21010 | 15 最近每天看纽约时报，发现英语里长句、复杂句的出现频率非常高，经常有一整段就是
一句话的情况出现。
要能轻松地理解这种长句，就要求脑子里的语言buffer容量要够大，思维要非常有条理
有逻辑。
国内的语文教育却总是批评这种长句，追求句式简单、表达简洁。可是这样的效果真的
好么？古文最简洁，歧义也最多。中国古代文化发展不出系统性的文明，是不是也跟这
种对简洁形式的追求有关系？ |
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h********a
发帖数: 1120 | 16 这个是人种间buffer大小不同导致语言不通
黑人在美国呆了几百年搞出个黑人英语 什么 I don't see nobody 就是证据 |
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x******g
发帖数: 461 | 17 D-Link DES-1105 10/100Mbps Desktop Switch 5 x RJ45 2K MAC Address Table 64KB
Buffer Memory - Retail
3 after Main in Rebate(12.81-10)
is this deal? |
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b******y
发帖数: 9224 | 19 一个月前听过采访buffer founder的全部interview, 很受启发 |
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e****e
发帖数: 877 | 20 公司内部transfer，manager说了问题不大，但是还需要一个简单的面试。
可是我在这方面的经验很少，希望在面试之前恶补一下。
只有两天的时间了，很急。
请问有什么入门的学习资料，能让我知道一个IO buffer design的流程。
大概是需要做LVDS，single ended IO， or GPIO。 |
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b******s
发帖数: 5329 | 21 Costco east Plano 附近，75号公路边。好象换了老板，叫King buffer，一直在装修。 |
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b******s
发帖数: 5329 | 22 环境比原来好，但鸭汤、蛙腿、火锅等更有中国特色
的东西没了。吃客大多老美老墨老黑，过去大多老中，价格比原来略便宜。
[在 bypassus (Bypassus) 的大作中提到：]
：
：Costco east Plano 附近，75号公路边。好象换了老板，叫King buffer，一直在装
修。
：........... |
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b*****e
发帖数: 5133 | 23 能选mil spec就不要用commercial。周末随便玩玩无所谓，但如果材料和加工一样的话
，mil spec比commercial更皮实些，虽然mil spec外径小些。
仔细看一下mil spec和commerical的螺纹，commercial的是在现成的管子再切割出螺纹
，螺纹顶端与外径一样高。而mil spec的螺纹顶端是高出管子的，螺纹底部基本和管子
一样粗。也就是说同样管壁厚度，mil spec在螺纹处的强度要更高。
buffer不用换。 |
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b*****e
发帖数: 5133 | 24 没量过，但应该是一样的，没有觉得buffer在一个里面比另一种上下更松。
这里有个非常夸张的图显示mil spec和commercial的差别，呵呵。mil spec螺纹处用料
足更结实是肯定的。据说搞个commercial的尺寸当时是为了避开和Colt打官司，比mil
spec容易加工也是一个原因。 |
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R***a
发帖数: 41892 | 26 官方数据， 6fps, L normal, 100张容量。
但是我看了一眼D90的L normal，大小是1.8M一个文件。
这折算到16.2M不过是2.4M一个文件。
100张不过是240M容量。
7D是8 fps, raw 是16张，但是人一个文件就是30M
这是480M
还有A55, 6fps的时候L fine 39张，每个大小7.1M，这是276M
要是10 fps的时候raw+jpg 18张，每个大小25M，这是450M buffer
我看7D和A55要是2.4M一个文件6fps能无限拍到卡满。
这么看来D9000还是有空间的 |
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b*e
发帖数: 3845 | 27 thx. during the day, youtube/netstartv is very smooth. slow buffering only
happen after 8pm EST. your netstartv is still my first perference. |
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k****f
发帖数: 3794 | 28 lezi的radio，基本上10秒钟buffer一次。烦死了 |
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p****i
发帖数: 83 | 29 一般要溢出的是stack上的buffer，而不是heap上的。
由于某个有缺陷的函数每次被调用的时候深度都一样，而进程每次启动堆栈虚地址都是
一样的，这样就知道函数返回地址应该填入什么数了。还有一种方式，就是填入已知程
序中包含jmp esp这条指令（X86也就一个字节，我记得）的地址，这样就可以跳转到堆
栈了。
现代操作系统有些反制措施，比如随机化堆栈地址，即使你能让程序crash，也很难猜
中地址从而运行你溢出的代码；还有堆栈内存不允许运行等。反正现在越来越难执行注
入代码了 |
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h****r
发帖数: 2056 | 30 Hi everyone,
my problem is when using C++ and oracle ODBC driver to
connect to Oracle 8.1.6, if the sql string size exceeds 1k,
then my application will stop. But the same string can be
accepted by using SQLPLUS, is there a way to increase the
default buffer size for long Columns?
Thanks a lot |
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m***i
发帖数: 88 | 31 我也有这个疑问。加个硬盘会使播放流场么？我感觉ims内的资源是source server
limited,和客
户端(pbo)的网速及buffer无关，对么？请高人指点。 |
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T****n
发帖数: 6187 | 32 我个人觉得理论上肯定可行。不过厂家时设定buffer肯定是按照无硬盘的情况去设置的
。所以还得有高人figure out该怎么改。最重要是搞清那个dvdplayer组件的运作方式
。 |
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A*****s
发帖数: 13748 | 33 也不记得设置过什么了，但是现在看youtube那个进度条没有超过播放标了，也就是不
buffer了。。。在chrome和IE下都正常。。。有达人知道哪里改么？谢谢！ |
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w********w
发帖数: 1550 | 34 SSD 需要禁用superfetch, prefetch, write cache, write cache buffer flushing?
不同论坛有不同说法, 有没有个权威点的统一说法？ |
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e***e
发帖数: 168 | 35 Hi suppose I open a file, and someone changes it. Now, can I refresh my vim
buffer without quitting and re-entering? |
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x****r
发帖数: 12 | 36 for the current buffer:
:setlocal autoread
globally:
:set autoread
manually:
:e |
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a********n
发帖数: 1287 | 37 另外看了understanding linux kernel. 有buffer cache 和page cache。什么区别呢？
谢谢。 |
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B********s
发帖数: 3610 | 38 在server上有这样一个函数:
void getinput() {
int count;
char buf[12];
...
gets(buf);
...
}
gets()读入一段input到buf中。如果buf够大，可以放一段shellcode到stack上，实现
buffer overflow的攻击。问题是现在buf只有12 bytes,放不下一段shellcode,那么这
种情况下有什么办法实现攻击呢？ |
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f*******y
发帖数: 988 | 39 你搞反了
顾名思义，buffer足够大没overflow你攻击啥？ |
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B********s
发帖数: 3610 | 40 用来攻击的string总长肯定要超过buffer的长度，但是其中的shellcode不能超过，不
然就不能正确覆盖函数的返回指针从而执行shellcode了。 |
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t****t
发帖数: 6806 | 41 那为什么shellcode一定要呆在buffer里呢? |
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k***e
发帖数: 7933 | 42 anyone familiar with google's protocol buffers?
share some experience? pros and cons? |
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g*********s
发帖数: 1782 | 44 误打误撞，问题居然解决了。
第一个文件有个/*，但没有匹配的*/，就一直找到文件尾，然后报错返回。
下面这个方案经过验证可行：
<> {printf("unfinished comments when file ends\n"); YY_FLUSH_
BUFFER; BEGIN INITIAL; }
但对flex/bison这套错误处理机制还是不太清楚。 |
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f********o
发帖数: 863 | 45 什么是sed的holding buffer？看了几遍，也没明白！
下面是个例子，没明白！是不是我对pattern的理解有问题 |
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v*s
发帖数: 946 | 46 好像就是一个内部的 buffer，可以临时放点东西而已。
这个grep3 其实基本的grep就能实现。
grep -A 1 -B 1 "pattern" |
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s*i
发帖数: 388 | 47 自己也用过好几个exploit的程序，搞fedora获得root。但是不知道那些牛人们，用
buffer
overflow来attack的人是怎么计算出要覆盖的内存地址的阿？
难道那些heap ram地址不是动态的么？怎么能那么精准的计算出需要覆盖的位置阿？ |
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