j***n
发帖数: 357 | 1 呵呵，多谢。个人感觉不是那么必要
刚刚找到如下信息：
Beads: Beads and whether to use them or not, and how many to use is also an
area of debate. The general function of the bead is to protect the knot from
the constant abrasive action of the weight. However, some do feel that the
beads also create noise thereby attracting curious bass. We use no bead if
we use bullet weights and one bead if we us an egg weight. My feeling on the
beads is they are just another obtrusive attractant and I want the bass
striking the bait, no |
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v*******l
发帖数: 5042 | 2 【 以下文字转载自 Fly_Fishing_Club 俱乐部 】
发信人: vanfossil (色鱼), 信区: Fly_Fishing_Club
标 题: bead chain eye leech
发信站: BBS 未名空间站 (Tue May 4 01:26:55 2010, 美东)
(以前发过，加在了屋里八哥的后面，现在专门提出来供参考)
Bead chain eye leech，功效和屋里八哥差不多，甚至更“通杀”！
其变化就是
1：用bead chain eye代替bead head；
2：钩可以更小一些，例如#10-14；
3：视鱼种、水域、季节看看是否加铅丝；
4：不需要使用颈羽缠绕出body毛毛；
以下是示意图，过程和woolly bugger差不多一样，在此不再重复。
说一下材料的名称：各种颜色的Marabou毛毛（软羽毛代替也行），各种颜色的Chenille（一块多一包，注意需要买small size的，med size太粗），bead chain（这个很好找，大小合适就行） |
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s***y
发帖数: 7034 | 4 俺现在刚在beading的纸上谈兵思考阶段，想改造几根珍珠项练，穿一些silver bead
进去，silver bead 的hole size 有5mm左右，而珍珠只有1mm，穿一块肯定有
alignment的问题。。看到有Bead Aligner，但样式材料都不是我想要的。。请问还有
什么解决方法吗？ |
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C******8
发帖数: 602 | 5 听版上人说做CoImmunoprecipitaion用magnetic beads可以减少nonspecific
手里刚好有active motif ChIP kit里的magnetic protein G beads
我可不可以用这个beads conjugate antibody，然后去拽cell lysate的antigen呀。心
里想差别也就是ChIP里protein先crosslink了DNA嘛。。。
washbuffer还有elution buffer有什么要注意的么？Elution难道直接加sds sample
loading buffer煮一煮，dissociate下来protein到buffer里然后load？
如果新买其它beads还得等几天，试试可不可以呀？有没有前人经验。。。 |
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f***a
发帖数: 11477 | 6 【 以下文字转载自 NanoST 讨论区 】
发信人: frada (微风轻哨), 信区: NanoST
标 题: 请教magnetic beads做TEM的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jan 3 12:45:40 2011, 美东)
第一次做TEM，问题很多
我的mag beads比较大, 1 um直径
我就是用滴加5ul干在grid(200 mesh copper, carbon type-B),干5分钟
然后用一个什么放射性的东西染色5分钟，再冲洗，再干5分钟
结果发现只有非常少的bead在膜的边缘地带吊着
但是同样的步骤对于20nm 的普通 gold nanoparticle就没有问题
可以很均匀地分布在整个网上
谁知道这是什么原因啊
是因为有磁性的原因，还是因为尺寸太大的原因
如果是尺寸的原因，那么应该怎么操作呢
如果是磁性的原因，一般mag beads应该怎么样才可以在 TEM下保持住并看到呢 |
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a******c
发帖数: 597 | 7 如何合成2-5 um的磁性beads，得到这样的beads后，如何conjugate一个蛋白质到这个
beads的表面？
如果我自己不能合成这样的磁性beads的话，可以直接找公司购买么？那么该如何购买
呢？
急求解答啊，我是这行的完全的小白，跪求解答。
谢谢。 |
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v*******l
发帖数: 5042 | 8 (以前发过，加在了屋里八哥的后面，现在专门提出来供参考)
Bead chain eye leech，功效和屋里八哥差不多，甚至更“通杀”！
其变化就是
1：用bead chain eye代替bead head；
2：钩可以更小一些，例如#10-14；
3：视鱼种、水域、季节看看是否加铅丝；
4：不需要使用颈羽缠绕出body毛毛；
以下是示意图，过程和woolly bugger差不多一样，在此不再重复。
说一下材料的名称：各种颜色的Marabou毛毛，各种颜色的Chenille（注意需要买small size的，med size太粗），bead chain（这个很好找，大小合适就行） |
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v*******l
发帖数: 5042 | 9 看到越来越多的人感兴趣，并开始有人跳坑，深受鼓舞，再接再厉！
Bead head nymph，湿饵，沉水速度较快，是清澈、湍急溪流中吸引野生鳟鱼（彩虹、
bull）的最有效fly之一，和石蚕蛾一干一湿，是我细流钓最常用的一款fly.
图例说明制作方法，标号和照片顺序相对应：
1：原材料：dubbing body材料、孔雀羽、银色金属丝、金色1/8 bead，另有野鸭毛一
根（朋友打猎的副产品），最好带暗绿色反光的部分；
2：#14 2xheavy普通wet hook，穿bead head, 上架，打底线；
3、4：剪一撮野鸭毛纤维，帮到钩子上作为尾巴；
5：银色金属线，绑之于尾部；
6、7：dubbing纤维，搓到绑制线上，缠绕昆虫腹部，大约1/2钩柄长度，颜色任选：绿
、棕、黑甚至红色均可；
8：金属丝缠绕腹部，也是到1/2处，绑之并剪去多余的；
9、10：剪一宽段发绿磷光的野鸭毛，注意保持其紧密（尽量别散开），绿色朝下，绑
之于腹部前端；
11：取孔雀羽一根，紧贴野鸭毛绑紧，并用手捋一下孔雀羽，使其羽毛散开；
12：将孔雀羽竖直缠绕，直到最前端，绑紧并剪去多余的，作为昆虫的主身体； |
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m******h
发帖数: 5753 | 10 ☆─────────────────────────────────────☆
vanfossil (色鱼) 于 (Tue Nov 3 01:52:23 2009, 美东) 提到:
看到越来越多的人感兴趣，并开始有人跳坑，深受鼓舞，再接再厉！
Bead head nymph，湿饵，沉水速度较快，是清澈、湍急溪流中吸引野生鳟鱼（彩虹、
bull）的最有效fly之一，和石蚕蛾一干一湿，是我细流钓最常用的一款fly.
图例说明制作方法，标号和照片顺序相对应：
1：原材料：dubbing body材料、孔雀羽、银色金属丝、金色1/8 bead，另有野鸭毛一
根（朋友打猎的副产品），最好带暗绿色反光的部分；
2：#14 2xheavy普通wet hook，穿bead head, 上架，打底线；
3、4：剪一撮野鸭毛纤维，帮到钩子上作为尾巴；
5：银色金属线，绑之于尾部；
6、7：dubbing纤维，搓到绑制线上，缠绕昆虫腹部，大约1/2钩柄长度，颜色任选：绿
、棕、黑甚至红色均可；
8：金属丝缠绕腹部，也是到1/2处，绑之并剪去多余的；
9、10：剪一宽段发绿磷光的野鸭毛，注意保持其 |
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w******y
发帖数: 4871 | 11 u dont need to buy any beads.
its the time to get more beads from other people:-)
girls can get more beads if they flash:-) |
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w******e
发帖数: 1187 | 12 covalent linked by EDC/NHS。想用一种universal的方法（非ELISA）测
beads上link的protein amount。因为beads本身会有interference，想要一种
assay方法，能根据protein amount给出signal，but the signal can't be
together w/ protein, so that the beads can be removed b4 measurement.
any thoughts? Thanks in advance! |
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T**********t
发帖数: 1604 | 13 我一直用invitrogen的Dynal beads，不过没比较过别家的，不知道是贵还是便宜。我
觉得不便宜就是了。magnetic beads肯定比普通的beads方便，损失也小一点。 |
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x*****9
发帖数: 68 | 14 1）biotin label protein 经过trypsin digestion过avidin bead， 不知道原来溶液
里面的urea会不会干扰biotin和avidin的binding
2）看到cravatt的文章， on-bead trypsin digestion， 问题是trypsin不会把bead
上面的avidin也digest么？
谢谢 |
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m**********d
发帖数: 137 | 15 原来用agarose beads做IP，最后recover protein的时候，加loading buffer到beads
里煮一会。现在第一次用Invitrogen的Dynal beads，请问大家都怎么elute protein下
来呢 |
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v******n
发帖数: 257 | 16 最近一直挣扎在这个chromatin IP上
用的是293细胞，死也做不出来。试过了两种beads，protein A support和santa cruz的
protein A/G agarose，背景超强。跟老板分析了半天应该是beads的问题。
请教一下做过类似实验的同学们，哪家的beads比较适合做ChIP啊？
在网上找到了两个，upstate的protein A agarose/salmon sperm DNA和GE的protein A
sepharose。哪个好一些呢？ |
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m*********n
发帖数: 158 | 17 endogenous protein pulldown,以前都是harvest cell lysis，然后antibody incubation overnight, next day add
beads for 1-2hours, and pulldown
听说把beads先和antibody cross link一下，可以提高pulldown efficiency;
所以准备把antibody-bead cross link,加到cell lysis,这样得话，大家一般incubate
在cell lysis里面多久呀？
谢谢 |
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x*****9
发帖数: 68 | 18 1）biotin label protein 经过trypsin digestion过avidin bead， 不知道原来溶液
里面的urea会不会干扰biotin和avidin的binding
2）看到cravatt的文章， on-bead trypsin digestion， 问题是trypsin不会把bead
上面的avidin也digest么？
谢谢 |
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k****o
发帖数: 728 | 19 请教一下，准备买Thermo的一种agarose beads，"NHS-activated agarose is
crosslinked, 6% beaded agarose resin with a particle size of 45 - 165 um”。
这里6% beaded是什么意思？crosslinked是什么crosslinked?
多谢！ |
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f***a
发帖数: 11477 | 20 第一次做TEM，问题很多
我的mag beads比较大, 1 um直径
我就是用滴加5ul干在grid(200 mesh copper, carbon type-B),干5分钟
然后用一个什么放射性的东西染色5分钟，再冲洗，再干5分钟
结果发现只有非常少的bead在膜的边缘地带吊着
但是同样的步骤对于20nm 的普通 gold nanoparticle就没有问题
可以很均匀地分布在整个网上
谁知道这是什么原因啊
是因为有磁性的原因，还是因为尺寸太大的原因
如果是尺寸的原因，那么应该怎么操作呢
如果是磁性的原因，一般mag beads应该怎么样才可以在 TEM下保持住并看到呢 |
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w*******y
发帖数: 60932 | 21 This is my first time posting so lets see if i can do this correctly.
Maxxis Ardent Steel Bead 26 x 2.6" Mountain Bike Tire
Link:
http://www.jensonusa.com/Tires/Maxxis-Ardent-Steel-Bead-Tire
Regular price on these is $70.00 marked to $12.99 which is 81% off the
regular price
Shipping on the deal is $12.95 for an over-sized package since they are
steel bead tires they cannot be folded into a smaller box. But with
JensenUSA orders over $50 the shipping is free. I will say though because it
is over... 阅读全帖 |
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g******t
发帖数: 230 | 22 最近我女儿一直在玩儿这个，叫Iron Beads或者Fuse Beads，很多小小的珠子，各种各
样的颜色，拼在模板上，拼好之后用熨斗烫一下，珠子会融在一起，可以挂在墙上做装
饰或者当钥匙坠子。在toysrus和walmart都有卖的。很多有趣的图案也可以在网上搜到
。 |
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l*******e
发帖数: 6436 | 23 我昨天从kit带的标准样式里copy了一个没有bead的，基本结构一样，比你这个麻烦,
btw: bead 1/80有可能，1/8是挺大一铅坠了，哈 |
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j***n
发帖数: 357 | 24 在大作“淡水岸钓新手指南之三：钓具与目标鱼”提到的线组设置中有bead。
迷惑的是bead是必须的吗？起什么作用呢？
看起来就像彩珠。。。用来诱惑鱼的？可是为什么在bobber stopper和bobber之间呢？ |
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p****u
发帖数: 22764 | 25 这个说的是滑铅和饵/钩之间的bead。ST的帖子里说的是浮漂和stopper之间的。有的浮
漂顶上孔较大，不加bead的话stopper容易卡进小孔，slip bobber就不能滑动了。
an
from
the
the |
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T***N
发帖数: 1835 | 26 我的一根长管上有两个bead，短管上只有一个front bead啊。。 |
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n******7
发帖数: 135 | 27 今天我们这儿有art fair，里面好多自己做首饰卖的，看到有人用seed beads穿成链子
，拧了几下就变成特别好看的项链，简单漂亮，我也想试着做做。
几个问题问下大家：
1，seed beads一般都用什么线穿？英语怎么说的？
2，穿好后，用什么end? 是什么cone吗？
要是谁能提供个链接啥的我能亲眼看看就好了，呵呵，谢谢大家啦！ |
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o**w
发帖数: 469 | 28 ot- you should try selling it, like me.... i am still trying to sell it on
etsy^^
kittybaby- same here, spent a lot, for a hobby that i have started less than
6 months ago... and when i see pretty beads, like when I was in thailand, i
spent over $1000 on buying the beads.... luckily, so far I have resell 2
strands of tourmaline on etsy....
bonvivant- i also started noticing this is an expensive hobby, and honestly
with 2 pairs of ear holes, I cannot keep up with the number of earrings I
made... |
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z****i
发帖数: 35 | 29 做IP，说明书里说是放在1.5mLEP管里做，因为我们的蛋白量大体积多，大概有40mL,就
放到50mL离心管里做了，加完抗体、Beads,过夜后清洗，按说明书里说的2500rpm 5min
,结果Beads只有少量沉淀，大部分都悬浮，后来升高到4500rpm 5min也还是沉淀不下来
珠子，简直郁闷死了，清洗的过程中损失了好多珠子，哭。想问问大家是不是50mL离心
管的体积太大了，需要把转速升高到10000rpm才行？ |
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s******y
发帖数: 28562 | 30 Why don't you use the convenient column?
I never bother to use centrifuge to spin down beads in big volumes.
It is always difficult to spin down the beads after binding with proteins.
5min |
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w******e
发帖数: 1187 | 31 要把target protein conjugate到beads上用于下游的separation。现在在试
dynabeads，发现conjugation efficiency远低于预期值。而且比较头疼的是
要测出真实efficiency也很tricky。间接测反应后溶液里剩多少protein很
不准。
请高手指教有没有efficiency比较高的beads？最好是magnetic的（是不是
只有dynabeads系列？？），其他的介质也可以。最好是covalent linkage，
biotin-avidin的也行。BTW我的target protein pI在5~6
非常感谢。 |
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n******5
发帖数: 21 | 32 我觉得M-beads, 主要是方便，和 minimized carry-over therefore increase
recovery. if you want to minize non-specific interactions, try follow some
naked beads to absorb them.
但是缺点就是 binding capacity 很低。
Wash buffer:建议加一些non-ionic detergent, like Triton100
Elution buffer: SDS+boil will get everything off, but all in denatured form,
it is perfectly fine if you directly go on to SDSPAGE.
if you want to maintain functional activity, I would suggest using low pH
elution (Try pH2.0 glycine, use Tris-pH8 to neutra... 阅读全帖 |
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z****g
发帖数: 3340 | 33 don't need any conjugation with beads. just incubate the ab with magnetic
beads and then your cell extract.
good luck. |
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z********i
发帖数: 610 | 34 用多大浓度的imidazole可以最大限度的减少非特异的结合？
我做了一个negative control：beads only+protein（beads没有用BSA处理），50mM
imidazole，发现很强的非特异的结合。
多谢 |
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y*********u
发帖数: 183 | 35 以前做co-ip的时候没人说dyna beads好用
最近开始做chip，突然很多人都建议用dyna
原理上说挺fancy的，不过好用么？ |
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B*****e
发帖数: 1005 | 36 为什么Co-IP不推荐用dynal beads |
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d****7
发帖数: 109 | 37 嗯，能，连上反而更好，我用Sigma V5-10 Mouse monoclonal Ab，这抗体是IgG1，与
protein G结合拒差，我就用DMP把V5定到protein G上，然后IP效率奇高。
后来我不想每次做IP都crosslink，所以就换了一个beads，叫Dynabeads Pan Mouse
IgG，这个beads能与各型mouse IgG的Fc段结合，结合力很高，不是做广告，确实不错。 |
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k*****n
发帖数: 323 | 38 我用的是invitrogen的magnitic beads。取决于你用的抗体了，invitrogen 的网站上
有这些beads的说明书，你可以看看结合效率的对比。 |
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t**h
发帖数: 82 | 39 拟用Microarray筛选组织基因表达的差异。了解到Illumina Bead Array比The
Affymetrix GeneChip 便宜很多（一半的价钱）。请教Illumina Bead Array效果怎么
样？ |
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o****e
发帖数: 1011 | 40 我不确定为什么你的magnetic beads最后很少“粘”在grid上。
你不妨提高原始样品的浓度，或者至少让原始样品在grid上dry得久些
（让溶剂多挥发些），希望这样最后粘在grid上的beads多些。你可以
优化一下条件（air dry 5min -->“完全”dry）。
我做的SEM/TEM实验也并不多。就是提个建议，抛砖引玉吧。 |
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m*******n
发帖数: 1214 | 41 1/ you have to dilute down your urea
2/ avidin beads is not that easy for trypsin to digest.it is on solid beads,
even a little was digested, so what? the Mass can still detect them as long
as your sample don't containing avidin, so it is kinda irrelevent |
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h****6
发帖数: 229 | 42 Does anyone know who makes carboxyl magnetic beads 磁珠 in China? Not the kind
that uses silico, just polystyrene coated magnetic beads. |
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w*******y
发帖数: 60932 | 46 I bought some of these cheap off eBay, but FREE (plus Free Shipping) is
better! Also entertaining for kids. They are non-toxic. We have only made a
small bowl up, but I am considering hydrating a lot so my kids can put them
in their water table. Cool texture!
Link:
http://www.locobuy.com/products/22065-free-incredible-floral-ge
Product info:
This gem of a product creates glimmering floral or candle arrangements in
clear vases and bowls. Ideal for candle, silk and fresh flower arrangements.
Use f... 阅读全帖 |
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d*******o
发帖数: 952 | 47 今天出门突然发现前passenger side轮胎瘪了，拖到repair shop花了100多(包括
towing cost)，说是因为 "bead leak"，其他的没听太懂，好像是aluminum rim经常发
生这种问题？ |
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k******g
发帖数: 35 | 48 请问carolina beaded board siding 怎么样？ 有什么潜在的问题吗？ |
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l***o
发帖数: 199 | 49 VIVIAN四岁了，这些是她近期的beads手工。挂在圣诞树上还是不错的饰物呢！
若有孩子想要参加我和VIVIAN 的WINTER ART CAMP（Dec.19th-Jan2nd),请致电话425-
780-3176。另，请参考我的网页http://lidawu.wordpress.com |
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f**********y
发帖数: 1063 | 50 啊～～～～～～～～
老大你真是高产啊！
我现在最需要学习fly tying了！
谢谢拉，学习中！
PS：bead head是多重的？ |
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