V**F
发帖数: 164 | 1 不做这个很多年，有点糊涂了
想在已有的vector 加一个ampicillin resistance gene （AmpR)，除了加 promoter (
-10 和-35), AmpR的coding sequence外，还要加terminator sequence 或者polyA
signal吗？AmpR 只需要在E.coli里面表达就行了,参照了很多vector,都没有指明有没
有terminator或者polyA signal. |
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H*******i
发帖数: 196 | 2 CB只是稳定/难降解一些，但对AmpR/Bla没区别，这个问题的关键AmpR/Bla是个分泌蛋
白，而且只有分泌了才产生抗性
我有时候做克隆有意避免使用Amp。。 |
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g*********5
发帖数: 2533 | 3 amp+ expire quickly...
make fresh plates with fresh ampr |
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a***o
发帖数: 129 | 5 why don't you use entry plasmids with kanR? Is it likely when you cut out
the ampR there is a hidden restriction site between attL1 and L2 and you don
't know about? |
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n****3
发帖数: 543 | 6 最后一贴，启动子的危害不象在动物内那么显著，但所有用的都是高表达启动子。你用
它来转基因，如产不饱和脂肪酸上去了，但该品系的其他营养成分就会下降，当然不是
所有的都下降
至于产生抗生素，Ampr和卡那是常用的还有很多。大家愿意吃就吃吧，我也偶尔吃吃，
反正不马上死人，老年人建议少吃，哈哈
绝不再发，如有逻辑和常识性错误，请告知我删贴，免得害人 |
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w***a
发帖数: 4361 | 7 你这常识错误也太多了，ampr，kana抗性基因表达的是酶好不好？
还抗生素呢，你是学生物的，还是来黑我们生物wsn的？ |
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