a*****s 发帖数: 838 | 1 看了下,好像没看错。现在附个图在这里,请看看吧。我也搞不清楚了。跑native gel
的人也不多。都没地儿问去。这个图里的配方是final working concentration, stock
如果和30% acrylamide 配的话,就是8%的bis-acrylamide。抑或是我理解的问题? |
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a*****s 发帖数: 838 | 2 用这个stock buffer按照常用的配方来配胶的话,bis-acrylamide的浓度要比平时高10
倍。不知道这个10倍高的浓度是什么原理?另外配出来的胶,颜色瓷白瓷白的(
resolving gel)。硬度没怎么增加,还是软的。就是操作起来不太爽。另外加上正极池
里加了sodium deoxycholate,跑胶的时候有一条白线跟着dye的线在一起。
还有一个问题是,不容易控制跑胶的样品速度。有的lane快,有的lane慢。郁闷。
(这个是invitrogen的tris-glycine胶的配方,用来跑native gel的)
有经验的吗?谢谢~ |
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k**e 发帖数: 2728 | 3 哦。。。这个说法很有道理。。
怎么找对应C%和T%的acrylamide / bisacrylamide的值? |
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s******9 发帖数: 283 | 4 For your case: 30% stock solution
30g Acrylamide
30x2.6% = 0.78g Bis
in 100 mL final volume |
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m**********d 发帖数: 137 | 5 感兴趣的蛋白大概110KDa,phosphorylated form与unphosphorylated form共存,我用
的antibody两个都识别,SDS-PAGE能看到很近的两条band,上面的是phosphorylated
protein,下面band是unphosphorylated protein。
现在用30% acrylamide(37.5:1)做的8%SDS-PAGE, film看起来有些模糊,想问问如果
改用40%acrylamide (29:1)会有帮助吗?有啥建议能增加对着两个band分辨率的方法么
多谢 |
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w********h 发帖数: 12367 | 6 【 以下文字转载自 Chemistry 讨论区,原文如下 】
发信人: YFP (cell), 信区: Chemistry
标 题: 向高分子的同学请教一个问题,acrylamide聚合的问题
发信站: The unknown SPACE (Fri Jun 6 15:47:38 2003) WWW-POST
acrylamide通过ammonium persulfate聚合, 是自由基聚合吗?
本人没有学过高分子的课,见笑了 |
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e****m 发帖数: 8 | 7 Thanks for the reply.
Actually I am making Polyacrylamide gel under room temperature. My current
working formula is list below:
Acrylamide (monomer) (~ 8%, wt)
bis-acrylamide (crosslinker)
Redon: Tetramethylethylenediamine/ammonium persulfate
solvent: water/ethylene (10:1)
This formula works pretty well. However, I am trying to replace water/
ethylene glycol with pure ethylene glycol but the crosslinking cannot be
initiated even after two days. I tried to vary the reaction temperature but
it did... 阅读全帖 |
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c********6 发帖数: 189 | 8 以前我是用acrylamide:bisacrylamide=100:1的gel来分离phospholated,
unphosphorylated forms. 给你参考一下 |
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S***k 发帖数: 158 | 9 单体是:N-(Isobutoxymethyl)acrylamide,里面的阻聚剂是200 ppm monomethyl
ether hydroquinone。单体本身会和CaH、Na等反应,所以不能通过这种办法除水、除
阻聚剂。Sigma-Aldrich给的单体沸点是108摄氏度,阻聚剂沸点256度,所以我就想用
减压蒸馏来除阻聚剂。
问题出在减压蒸馏上:我减压蒸馏蒸到了200度,这东西还是没出来,最后升到了230度
才有少许的单体流出来。这样蒸基本上50mL的单体能蒸出来10mL就不错了,剩下的全在
瓶子里聚合后玻璃化了。而且蒸出来的东西我也不确定有没有阻聚剂残余(含量太低,
NMR也很难看出来)。
想问一下有没有人有处理过这一类型单体的经验。按理说108度沸点的单体,就算是常
压下蒸也不需要200+度吧。难道是这种类型的单体比较特殊? |
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S***k 发帖数: 158 | 10 单体是:N-(Isobutoxymethyl)acrylamide,里面的阻聚剂是200 ppm monomethyl
ether hydroquinone。单体本身会和CaH、Na等反应,所以不能通过这种办法除水、除
阻聚剂。Sigma-Aldrich给的单体沸点是108摄氏度,阻聚剂沸点256度,所以我就想用
减压蒸馏来除阻聚剂。
问题出在减压蒸馏上:我减压蒸馏蒸到了200度,这东西还是没出来,最后升到了230度
才有少许的单体流出来。这样蒸基本上50mL的单体能蒸出来10mL就不错了,剩下的全在
瓶子里聚合后玻璃化了。而且蒸出来的东西我也不确定有没有阻聚剂残余(含量太低,
NMR也很难看出来)。
想问一下有没有人有处理过这一类型单体的经验。按理说108度沸点的单体,就算是常
压下蒸也不需要200+度吧。难道是这种类型的单体比较特殊? |
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D***e 发帖数: 435 | 11 using CQ (camphorquinone ) as photoinitiator to polymerizat acrylamide.
The what range of wavelength I should use. Does it really matter or at some ra
nge will be OK?
Thank you very much. |
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c*******n 发帖数: 82 | 12 请教各位poly(N-isopropyl acrylamide)的一些温敏性质:
如果我把这个高分子的水溶液和有机溶剂(hexane or iso-octane)混合,然后把溶液加
热到50度左右,它会从水相迁移到有机相吗?请熟悉这个高分子的高手解答。 |
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m*****e 发帖数: 1506 | 13 水的极性大,相同温度下acrylamide聚合速率大得多。你看是不是把浓度或温度提高些
,或者加些引发剂 |
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j****e 发帖数: 1 | 14 anybody can help me get this paper? Thanks a lot!
Acrylamide and polyarylamide 99
Published: Jun-76
This report deals with acrylamide and polyacrylamides. Acrylamide manufacture
by sulfuric acid hydrolysis and by catalytic hydration is evaluated.
Manufacturing processes for homopolymers and for copolymers having acrylamide
as the main component, as well as processes for derivatives of such
homopolymers .... |
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s******y 发帖数: 28562 | 15 此神经毒性非彼神经毒性。
acrylamide在这里是作为一个支撑细胞结构的胶体,在本质上和我们做切片的
石蜡包埋是类似的道理。只不过acrylamide胶体是透光的而石蜡不透光。
在我的理解中,这么处理至少对细胞层次的结构影响不会很大。但是具体到里面的蛋白
和亚细胞结构就比较难说。因为acrylamide聚合的时候是有可能导致某些细微结构产生
形变的。 |
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b*********d 发帖数: 3539 | 16 原理:往地下灌大量富含各种有机溶剂、防腐剂、抗腐蚀成分的水,吸收天然气,然后再抽上来提纯。问题是抽上来的大约只有灌进去的一半,剩下的...全进地下水。hydraulic fraction技术已经在六个州全面铺开,最近几年发展神速。
污染:
一半废水进入地下水;地上浓缩的废水敞口蒸发;大量天然气和其他有毒气体直接泄进大气。
自来水泛黄、发黑、冒泡
地下水能点着火。溪流冒泡,插个管子能当炉子使
动物掉毛,鸟类、兔子、鱼类死亡
附近住户哮喘、癌变、周身疼痛、神经症状诸如丧失嗅觉和部分味觉,身体不能移动
官方态度:1. 水质测量没发现问题。2. 能源危机背景下,要有所取舍,顾全大局,退一步进两步。
审查:cheney在任上给这项技术立法大开绿灯,使其对任何环保法案免疫,同时不需要公开使用的化学成分。EPA更是连审查都管不着。直到2010年6月hydraulic fracturing使用的化学成分才公开,其中相当多的都是致癌物,绝育变异,不一而足。
最妙的是,绝大部分p民在认识到这项技术的危险性之前,都被开采公司拿钱买断,签了保密/免责协定。谁公开说这事儿,谁就法庭上见。
米帝这项工程利国利民,... 阅读全帖 |
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g***j 发帖数: 40861 | 17 trade name:Innate
品种: Ranger Russet
品质:reduce the formation of black spot bruises by lowering the levels of
certain enzymes in the potatoes. In addition, they are engineered to produce
less acrylamide by lowering the levels of an amino acid called asparagine
and by lowering the levels of reducing-sugars. Acrylamide is a chemical that
can form in some foods during high-temperature cooking, such as frying, and
has been found to be carcinogenic in rodents. |
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b*********d 发帖数: 3539 | 18 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: bittergourd (苦瓜), 信区: Military
标 题: 来看米帝的断子绝孙工程,水变油的神奇科技
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 18 22:32:57 2011, 美东)
原理:往地下灌大量富含各种有机溶剂、防腐剂、抗腐蚀成分的水,吸收天然气,然后再抽上来提纯。问题是抽上来的大约只有灌进去的一半,剩下的...全进地下水。hydraulic fraction技术已经在六个州全面铺开,最近几年发展神速。
污染:
一半废水进入地下水;地上浓缩的废水敞口蒸发;大量天然气和其他有毒气体直接泄进大气。
自来水泛黄、发黑、冒泡
地下水能点着火。溪流冒泡,插个管子能当炉子使
动物掉毛,鸟类、兔子、鱼类死亡
附近住户哮喘、癌变、周身疼痛、神经症状诸如丧失嗅觉和部分味觉,身体不能移动
官方态度:1. 水质测量没发现问题。2. 能源危机背景下,要有所取舍,顾全大局,退一步进两步。
审查:cheney在任上给这项技术立法大开绿灯,使其对任何环保法案免疫,同时不需要公开使用的化学成分。EPA更是连审查都管不着。直到2... 阅读全帖 |
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L******s 发帖数: 2349 | 20 Acrylamide是神经毒素,能经呼吸和皮肤吸收,做acrylamide胶是绝对要带手套的,有
的实验室都不让在bench上做,得放到通风橱里。 |
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M****e 发帖数: 70 | 21 throw in a couple of points:
when you run an SDS-PAGE, you try to fractinate the protein
by the matrix of acrylamide. so the qualities of both the
gel and the samples are important to determine migration.
basically, do not use gels that have been stored for a long
time, use fresh AP and high-quality of acrylamide to make a
PAGE gel, giving long time for the bottom separation gel to
polymerize; or, just buy a commercial gel from BioRad, either
non-gradient or gradient (this one seems to be better |
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s******9 发帖数: 283 | 22 估计你理解错了。30%可能是T%值,8%是C%值(crosslinker的ratio,而不是绝对浓度
)。
C%=5%时,gel的pore size最小,分子筛效应最大。这就是为什么跑蛋白一般用5%的交
联剂。 |
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a*****s 发帖数: 838 | 23 非常非常感谢。谢谢。就是很奇怪这个表格怎么是这么计算的。 |
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b*****y 发帖数: 40 | 25 Has anybody reported the reactivity ratios of these two monomers?
I agree with you that acrylic acid probably is much more reactive than
acrylamide.
One way to circumvent the problem is to copolymerize tert-butyl acrylate
with acrylamide, which might have similar reactivities. Then hydrolyze.
random |
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g***j 发帖数: 40861 | 26 那老汤呢,其实也不卫生,估计里面有acrylamide |
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r******y 发帖数: 21907 | 29 不过acrylamide看着确实像淀粉 煮的应该还好 炸得温度高 |
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a**********u 发帖数: 28450 | 30 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: codon (codon), 信区: Biology
标 题: 又听说一个中国postdoc投毒案
发信站: BBS 未名空间站 (Wed May 13 15:42:53 2015, 美东)
昨天听老板说的。一个老中postdoc在实验室的咖啡里掺了acrylamide,导致全实验室
人都中毒,去洗胃,而此老中逃回国了。 |
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z*****8 发帖数: 2546 | 31 很多老中不用味精了,这是很好的。但大家是不是知道油烟肉HCAs and PAHs 和菜的
acrylamide会致癌? |
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H*******r 发帖数: 3143 | 32 western里面用到的巯基乙醇,甲醇,还有ECL, ACRYLAMIDE这几样东西比较有害,不过
口罩和gloves应该就够了,H3和S35理论上应该都没事,穿透力很弱,我依稀记得好像
就算是p32之类比较强的,孕期不超过100uCi也是没事的(单位记不太清楚了。。。。)
,但是还是小心的好,能不做就不要做
isotope, |
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V*********h 发帖数: 627 | 33 医生推荐了flax seed和chia seed,说prune juice也可以
有姐妹们试过以上方法吗?
wiki说prune juice有acrylamide, which has known toxic effects on the nervous
system and on fertility,所以有点担心
平时每天早上空腹一杯蜂蜜水,蔬菜水果也吃得不少,还是有bm发生,求良方 |
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i********t 发帖数: 1148 | 34 Hi all, I have two review invitations and am trying to recommend you guys
who have research expertise in polymer materials research.
(1) Multicolor Emission and Thin Film Transistor Properties of 1,8-
Diethynylcarbazole-Based Conjugated Copolymers
(2)Effects of Solvent Quality and Grafting Density on the Swelling, Collapse
and Friction Properties of Poly(N-isopropyl acrylamide) Brushes
Please PM me your brief research background (official email address,
research experience and representative pub... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 35 Title: Synthesis and characterization of acrylamide grafted konjac
glucomannan hydrogels with trimethylolpropane triglycidyl ether as cross-
linker
Name, email, affiliation, expertise |
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c**********g 发帖数: 1607 | 36 【 以下文字转载自 NewYork 讨论区 】
发信人: GZBOY (邮差叔叔), 信区: NewYork
标 题: 加州州府警告:咖啡、糕饼含致癌物
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Nov 22 11:03:20 2011, 美东)
州府警告:咖啡、糕饼含致癌物
http://news.sina.com 2011年11月20日 06:28 星岛日报
星巴克咖啡店内警告标语,引起消费者注意。
本报记者程嫣洛杉矶报道:最近每家星巴克咖啡店内都立了一块看了让人心?发毛
的「加州65号提案警告标语(CaliforniaProposition 65 Warning)」,引起消费者的
忧虑。该警告牌指出,该店出售的咖啡和烘烤食品内含有一种叫作「丙烯?胺(
Acrylamide)」的致癌物质。此消息一出令民众不寒而栗,感叹除了「抽烟有害健康」
外,原来许多日常食品也暗藏危机。
据瞭解,该致癌物质并非添加到咖啡和食品中,而是在高温烧煮和烘烤时自然产生
,因此无法避免,也并非只有星巴克的产品才含有此物质,与该品牌的品管无关。不过
,美国食品和药物管理局(FDA)并未建议民众不要喝咖... 阅读全帖 |
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G***Y 发帖数: 9698 | 37 州府警告:咖啡、糕饼含致癌物
http://news.sina.com 2011年11月20日 06:28 星岛日报
星巴克咖啡店内警告标语,引起消费者注意。
本报记者程嫣洛杉矶报道:最近每家星巴克咖啡店内都立了一块看了让人心?发毛
的「加州65号提案警告标语(CaliforniaProposition 65 Warning)」,引起消费者的
忧虑。该警告牌指出,该店出售的咖啡和烘烤食品内含有一种叫作「丙烯?胺(
Acrylamide)」的致癌物质。此消息一出令民众不寒而栗,感叹除了「抽烟有害健康」
外,原来许多日常食品也暗藏危机。
据瞭解,该致癌物质并非添加到咖啡和食品中,而是在高温烧煮和烘烤时自然产生
,因此无法避免,也并非只有星巴克的产品才含有此物质,与该品牌的品管无关。不过
,美国食品和药物管理局(FDA)并未建议民众不要喝咖啡,至于该等物质对健康的影
响有多严重还在研究中。 |
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G***Y 发帖数: 9698 | 38 丙烯鉟胺損神經系統 嚴重可失憶情緒低落
【明報專訊】丙烯鉟胺(Acrylamide)原為工業化學物,但近年有研究發現高溫油炸或
烘焗食物也會產生大量丙烯鉟胺,有可能令人患癌之餘,亦會損害神經系統。城大生物
及化學系副教授林漢華指出,攝取高劑量的丙烯鉟胺會令人情緒低落、產生幻覺及失去
記憶。
林漢華表示,過往有研究發現高劑量的丙烯鉟胺可損害中樞神經系統,嚴重者會令人情
緒低落、產生幻覺甚至失去記憶等,更有人因誤食了含此物質的化學劑而死亡。但他指
煎炸及炒菜等烹調方式已沿用多年,暫未有證據顯示攝取多少經食物釋出的丙烯鉟胺才
會損害神經系統。
食安中心指出,國際癌症研究機構(IARC)已將丙烯鉟胺列為第2A組物質,即動物致癌
物,亦可能令人類患癌,但仍待進一步流行病學研究證明人體從膳食攝入的丙烯鉟胺含
量與癌症的關係。 |
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r********r 发帖数: 56 | 39 The ingredients contain Acrylamide,which is used for PAGE gel in bio labs,
isn't that toxic????? |
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r********r 发帖数: 56 | 40 我有看過那個serum的配方上面說有Acrylamide。 丙烯酰胺是生物實驗室里制膠用的一
種藥品,應該單體有毒,不知各位JMs 尤其是學生物的JMs 怎麼看?這個用在眼睛上安
全嗎? |
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r****o 发帖数: 105 | 41 本文献给YL
(十五)AP1的活性测定
第二个模块的实验,DNA affinity chromatography之后我们又跑了一个更精细的
Gel filtration,用的是Amersham卖的Superose 6预装柱子。纯化步骤就只有这么多了。
剩下的就是一些活性测定。无论是sephacryl分出来的组分还是DNA affinity column分出
来的组分,我们都测试了AP-1的活性。方法呢就只有两种,一种是凝胶迁移率变动分析
(EMSA),另一种是DNA水解酶I 足迹分析 (DNase I footprinting assay),都可以用来分析
蛋白与特定DNA的结合能力。我过去没做过这两种实验,所以感觉很新奇,做的也格外卖
力,结果也还不错。
Gel Mobility-shift assay 原理很简单,把蛋白质样品和P32标记的寡聚核苷酸探针
一起孵育十几分钟, 然后拿去跑一个低浓度acrylamide胶。如果探针结合上蛋白了,速度
会变慢很多,就会停滞在胶的上段;如果没有结合上,探针就会自由的跑到胶的下段去。
然后把胶拿去做放射自显影就行了。跑胶的装置 |
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n**********1 发帖数: 251 | 42 最近要做mRNA-Protein co-Immunoprecipitation,对于大致的步骤和原理大概知道
,不知道有没有相应的试剂盒,还有在沉淀下来后,为什么要加入yeast tRNA,或者
linear acrylamide 和 glycogen,据说作用是carriers,我不太知道具体是什么作用
? |
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u**s 发帖数: 384 | 43 我的胶是自己制的,唯一的试剂acrylamide是买现成的,所以不太清楚药品怎么会过期?不久前其他人做好像没有这个问题,但是我看了一下我的胶,半年做的的确是一次不如一次。不过没啥经验所以才意识到这个问题。 |
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l***y 发帖数: 638 | 44 running buffer很少有问题的,查配胶的两个buffer,尤其是ph8.8那个,加上样
buffer也
就那几样东西,统统换新的,有钱的直接把acrylamide也扔了
如果跑的marker是premix的,上样buffer可以排除了
adjust |
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u**s 发帖数: 384 | 45 Problem solved. The acrylamide screwed things up. Thanks for all your help! |
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a*****s 发帖数: 838 | 46 两个放在同一个电泳池子里一起跑,没什么问题吧?还是需要分开电泳池跑?就是那种
biorad的mini蛋白电泳系统。就一
块15%的,想吧它跟其他的7%的胶配着跑,主要是其他的电泳槽也都用来跑7%的胶了。
。。 |
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a*****s 发帖数: 838 | 49 谢谢。。。嗯,同实验室的另一姑娘老是分开跑。。。所以就问问。回头也问问她到底
她干啥熬那么做。 |
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T**********t 发帖数: 1604 | 50 一起跑没问题,不过跑的速度会不一样。7%的胶先跑好,15%的胶跑得慢。不过只要分
辨率够了,不用跑完整块胶也可以。 |
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