L********g
发帖数: 4204 | 1 Orz fighting fans.
I till play my Feilong 1900pp/3000bp and juri 1500pp/3000bp, you guys spent
so much time on SF |
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a*********a
发帖数: 3656 | 2 netflix哪年能做到 real and consistent HD streaming啊。现在要弄个3000bps的码
率，还得进 hidden menu。我的下载速度测出来是60Mbps啊。
搞什么都是假的，搞定ISP，突破带宽瓶颈是真的。
话说现在HR都不叫HR啦，花街叫human capital management，硅谷叫talent office? |
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j***x
发帖数: 1469 | 3 用glycogen吗？
发现glycogen沉淀的DNA特别粘300-500bp的smear，能跑出2000-3000bp来， 而且会不
会影响后期的建库 ？ |
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g*********5
发帖数: 2533 | 4 还有一个问题，正常人这个片段是50bp左右，病人的就要1500-3000bp了。
一对crispr能把1500bp敲掉吗？
谢谢。 |
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H****n
发帖数: 26 | 5 最近做一个Transcription Factor（120KD）的ChIP， 很奇怪的事情，--
前面标准的1% formaldyhe RT 10min，0.125M Glycine RT 5 min, PBS wash,
裂解完细胞后，温和的sonication完后，input用western看发现原来条带的位置没有（
或者变的很淡），在下面有两条小的蛋白带。 做了一下RNA pol-II的WB (>150kD <
200kD)也是类似的情况，原来条带的位置淡了很多，在底下出现了两三条size小的条带。
先后试了RIPA (0.1%SDS)和nuclear lysate(1%SDS)裂解，效果一样。只要有
sonication,即使是很温和的5个cycle 30s/30s (该条件下DNA shear都不完全200-
3000bp), 原来蛋白条带就会消失，取而代之的是底下出现的size小的条带。
请问这是sonication 导致大分子量的蛋白容易降解吗？要如何解决？ |
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g*********5
发帖数: 2533 | 6 IDT could synthesize 3000bp now. |
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