w*e
发帖数: 740 | 1 最近想做一个flag tag的knockin，看文献都觉得3xflag的效果好的多，想用3xflag。
但比较以后发现（sigma）网站，3xflag的序列并不是1xflag的三倍串联。而且1xflag
是8个氨基酸，而3xflag好像只有22个氨基酸/
不是很明白为什么不是24个氨基酸（而且是3个8aa的串联）？谁能解释一下？
谢谢 |
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h*****n
发帖数: 2023 | 2 最近在研究一个很大的蛋白，有2500个氨基酸。我在这个蛋白的N端加了个FLag。筛了
稳定表达细胞系，用FLAG抗体检测不到蛋白的表达，但我用这个蛋白本身的抗体可以检
测到很强的信号。我以为FLAG序列没有表达，然后就做了FLAG IP，接着用蛋白本身的
抗体看看FLag能否沉下蛋白，结果发现FLAG能能沉下蛋白，比INPUT多。因为实验需要
，只能用1xFLAG,而不能用3XFLAG.FLAG抗体做IP比western灵敏吗？为什么我的western
检测不到？ |
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y******8
发帖数: 1764 | 3 3xFlag is about 10x stronger than 1xflag. 3xflag peptide elution is
about 50% of recovery.
If just for Mass Spec, acidic elution is good and complete. |
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a*******a
发帖数: 4233 | 4 3个1*的串联以后如果用beads纯化是洗脱不下来的。
我们犯过这种低级错误
1xflag |
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