l*y
发帖数: 21010 | 1 ”万事开头难。”一个狗说，”很多火的不得了的，并不见得真有多好，实际上有一个
临界点，一旦能坚持过去，就不可阻挡了，像半泽直树，泰囧，并不是说特好。大部分
人都死在半道了。” ”我现在就处在一个关键时刻，需要推一把，就彻底红了。”一
个狗半蹲，水平出掌，做了一个推的动作。”push！”
”世界！是无穷大的。”大闸蟹突然提高音量，”并不是说仅我们双眼看到双耳听到双
手摸到的就是世界全部，绝不只如此！”大闸蟹说，”宇宙无穷尽无限远，但又在你我
身边，我心即宇宙！infinity！” ”我心狂野！”大闸蟹总结。一个狗说：”相逢是
缘，对不对，水开了。”大闸蟹嗷的一下昏古七了
”但是在夜里，生活格外温柔，格外剧烈。”
”你变了。”分手终极奥义！男女关系一旦出现unstable，有破裂迹象的时候，一定要
尽早说出这句话，谁先说谁就赢了！对方立刻崩溃
”健身后，每个胖子都会变成一颗星，夜空中最亮的星。对促进毛发发育也有好处哦！
可以调节内分泌。”朋友们我可能把持不住要办一张卡了！当代modern aggressive营
销方式真是犀利
”啊！裸聊。”1872年，兰波再写给魏尔伦的信中说到，”我找到... 阅读全帖 |
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a**u
发帖数: 492 | 2 抽提？
产物再溶了跑色谱？
以前老爹教化学
中学就玩过
当时想家里也摆一套来玩比较拉风
不过太慢了...
等到进大学被调剂
从此和化学说bye bye |
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l*y
发帖数: 21010 | 3 【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
发信人: ldy (大才001), 信区: Joke
标 题: 大咕咕咕鸡大师twitter段子全集！逗死我了！！！
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Apr 22 11:23:13 2014, 美东)
”万事开头难。”一个狗说，”很多火的不得了的，并不见得真有多好，实际上有一个
临界点，一旦能坚持过去，就不可阻挡了，像半泽直树，泰囧，并不是说特好。大部分
人都死在半道了。” ”我现在就处在一个关键时刻，需要推一把，就彻底红了。”一
个狗半蹲，水平出掌，做了一个推的动作。”push！”
”世界！是无穷大的。”大闸蟹突然提高音量，”并不是说仅我们双眼看到双耳听到双
手摸到的就是世界全部，绝不只如此！”大闸蟹说，”宇宙无穷尽无限远，但又在你我
身边，我心即宇宙！infinity！” ”我心狂野！”大闸蟹总结。一个狗说：”相逢是
缘，对不对，水开了。”大闸蟹嗷的一下昏古七了
”但是在夜里，生活格外温柔，格外剧烈。”
”你变了。”分手终极奥义！男女关系一旦出现unstable，有破裂迹象的时候，一定要
尽早说出这句话，谁先说谁就赢了！对方立刻崩... 阅读全帖 |
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l*y
发帖数: 21010 | 5 ”万事开头难。”一个狗说，”很多火的不得了的，并不见得真有多好，实际上有一个
临界点，一旦能坚持过去，就不可阻挡了，像半泽直树，泰囧，并不是说特好。大部分
人都死在半道了。” ”我现在就处在一个关键时刻，需要推一把，就彻底红了。”一
个狗半蹲，水平出掌，做了一个推的动作。”push！”
”世界！是无穷大的。”大闸蟹突然提高音量，”并不是说仅我们双眼看到双耳听到双
手摸到的就是世界全部，绝不只如此！”大闸蟹说，”宇宙无穷尽无限远，但又在你我
身边，我心即宇宙！infinity！” ”我心狂野！”大闸蟹总结。一个狗说：”相逢是
缘，对不对，水开了。”大闸蟹嗷的一下昏古七了
”但是在夜里，生活格外温柔，格外剧烈。”
”你变了。”分手终极奥义！男女关系一旦出现unstable，有破裂迹象的时候，一定要
尽早说出这句话，谁先说谁就赢了！对方立刻崩溃
”健身后，每个胖子都会变成一颗星，夜空中最亮的星。对促进毛发发育也有好处哦！
可以调节内分泌。”朋友们我可能把持不住要办一张卡了！当代modern aggressive营
销方式真是犀利
”啊！裸聊。”1872年，兰波再写给魏尔伦的信中说到，”我找到... 阅读全帖 |
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x****o
发帖数: 21566 | 6 洞房佳偶
一佳人新嫁，合欢之夜，佳人以对挑之曰：「君乃读书之辈，奴出一对，请君对之
。如答得来，方许云雨，不然则不从也。」新郎曰：「愿闻。」女曰：「柳色黄金嫩，
梨花白雪香，你爱不爱？」新郎对曰：「洞裡乾坤大，壶中日月长，你怕不怕？」
拜堂产儿
有新妇拜堂，即产下一儿，婆愧甚，急取藏之。新妇曰：「早知婆婆这等爱惜，快
叫人把家中阿大、阿二都领了来罢。」
抢婚
有婚家女富男贫，男家虑其新婚，率领众人抢亲，误背小姨以出。女家人急呼曰：
「抢差了！」小姨在背上曰：「不差，不差！快走上些，莫信他哄你哩。」
两坦
有一女择配，适两家并求，东家郎丑而富，西家郎美而贫。父母问其欲适谁家。女
曰：「两坦。」问其故，答曰：「我爱在东家吃饭，西家去眠。」
两尽
夫劝新妇解衣。妇曰：「母戒我勿解，母命不可违；夫劝我解，夫命又不可违。奈
何？」正沉吟间，夫迫之，妇曰：「我知之矣！只脱去下截，做个两尽其情罢。」
问嫂
一女未嫁者，私问其嫂曰：「此事颇乐否？」嫂曰：「有甚乐处，只为周公之礼，
制定夫妇耳。」及女出嫁后归宁，一见其嫂，即笑骂曰：「好个说谎精。」
没良心
一妓倚门而立，见有客过，拉人打钉，适对门楼上，... 阅读全帖 |
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H********g
发帖数: 43926 | 8 天然产物应该最好搞 咖啡因 用酒和茶叶可蒸馏萃取 同样 如果你穿到明朝之后
也可以从烟叶搞出尼古丁 青蒿素估计用酒冷抽提也可以搞出来一些 鸦片古柯应该
也容易 奎宁也容易 水杨酸也容易 这些的关键都是要找对植物
青霉素应该也容易 但是长杂菌的话可能会弄出毒素 但是一旦搞出来就极其牛逼了
守在妓院门口可发大财 |
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j***j
发帖数: 9831 | 9 【 以下文字转载自 Minnesota 讨论区 】
发信人: tunesaispas (toujour), 信区: Minnesota
标 题: 总结了一下酱牛肉的关键，给大家参考
关键字: 酱牛肉
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 30 13:24:58 2011, 美东)
这几天又馋了，去双合买了几条牛健子肉，今天把它们都酱出来了，放着慢慢吃。
其实酱牛肉大家都常做，但味道却差别很大，不是哥吹牛，以前偶尔带牛肉当午餐，微
波炉一热，无数人一走进茶话间就到处问：什么肉这么香？把我的牛肉刮分完以后还追
着问我要recipe，呵呵。别人酱的牛肉也尝过无数次，呵呵，还是俺做的最香哈。
以前最爱吃老妈酱的牛肉，费时间，但步骤很简单：
牛肉在清水里泡几个小时，每半小时换一次水；
锅里坐水，水开了抄牛肉；把水倒了，牛肉在温水下冲净血沫；
再放如锅里，加开水，大料，花椒，辣椒，酱油，小火慢炖，3个小时左右，出锅了，
放凉切片。
这样味道已经很好了，但哥不是嘴馋嘛，就琢磨着改进了一下，果真效果显著。但凡酱
牛肉注意到这几点，没有不香的道理。
照前面的步骤抄过水冲洗干净以后，把水擦干，... 阅读全帖 |
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S********S
发帖数: 331 | 10 me too
我还跟编辑说，像我这种看文前先看v了没的，v了我就不进去了，省得看得兴起，
要交钱。不过人家编辑说，我们这种算少的，还是不少人会看v的，否则网站也不会
鼓励大家v了不是？（v了网站也要抽提成的，好像） |
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s*r
发帖数: 2757 | 11 伏波军大胜之余，竟然在一月之内发生五起元老伤亡事件，多名元老死亡。伤害事件都是偶然，比如在天地会工作的一个元老被虫蛇咬了一口后，全身突发水肿，肺部大量积液而死；食物中毒一次，多名元老卧床一周，其中一人对磺胺过敏死一个；等等。
然后就有人发现这些人大部分是祖籍广东福建。再追查下去，发先早先死于麻醉事故的元老祖居海南，是后来才牵到广西的。另一死亡元老祖籍不详。于是因果率扰动的流言就开始蔓延开来。其中的中坚分子元老A组织了南方历史研究会，旗下诸多祖籍两广福建穿越众，开始探讨这样一个可能性 ：后代子孙穿越后杀死和自己有一定亲缘关系的祖先是否会导致因果率的介入而抹杀穿越众；或者更玄妙一点的观点：并行宇宙间的量子纠缠是否有类似于主神抹杀这样的效用。
因为并没有确凿的证据，很多这方面的研究都是纯理论状态，偶然有一些实践性的操作，不过是采集了死亡土著和死亡元老的血样，经简单dna抽提后保存样品，已备今后条件成熟时进行序列对比。然而南方历史研究会的中坚分子确决定采取跟积极的措施。
他们要求尽可能的避免土著死亡事件。他们倾向于同金钱收买，特种小分队斩首心动，等等手段，避免正面战场的冲突，以减少大量土著平民... 阅读全帖 |
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l*y
发帖数: 21010 | 12 【 以下文字转载自 LeisureTime 讨论区 】
发信人: ldy (大才001), 信区: LeisureTime
标 题: 我这几年看过的最好最多的诗，保质保量，我昨晚上一晚上没睡觉
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Apr 22 11:48:19 2014, 美东)
”万事开头难。”一个狗说，”很多火的不得了的，并不见得真有多好，实际上有一个
临界点，一旦能坚持过去，就不可阻挡了，像半泽直树，泰囧，并不是说特好。大部分
人都死在半道了。” ”我现在就处在一个关键时刻，需要推一把，就彻底红了。”一
个狗半蹲，水平出掌，做了一个推的动作。”push！”
”世界！是无穷大的。”大闸蟹突然提高音量，”并不是说仅我们双眼看到双耳听到双
手摸到的就是世界全部，绝不只如此！”大闸蟹说，”宇宙无穷尽无限远，但又在你我
身边，我心即宇宙！infinity！” ”我心狂野！”大闸蟹总结。一个狗说：”相逢是
缘，对不对，水开了。”大闸蟹嗷的一下昏古七了
”但是在夜里，生活格外温柔，格外剧烈。”
”你变了。”分手终极奥义！男女关系一旦出现unstable，有破裂迹象的时候，一定要
尽早说出... 阅读全帖 |
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d*****1
发帖数: 228 | 13 第十七幕 大地与山之王
月台上的流水声渐渐远去，楚子航抹去眼睛上的黑色美瞳，永不熄灭的黄金瞳燃烧在黑
暗里。强大的造血机能已经让他的血统优势回复了七成，或者更多些。
强化后的血统能够拔出多少柄刀剑？楚子航深深吸了口气，扳住车顶，翻身而上。
血统优势令他足以抵挡车顶的疾风，行动就像在平地上，每一步他都在感触脚下的
震动。
他从不畏惧开打，他知道很多人说他是个杀胚。
既然已经准备好开打，那就要寻找最合适自己发挥的场地。
隧道顶部还在渗水，一滴滴打在他的脸上，冰冷。这种独自走在冷雨中的感觉真是
糟透了。但这里真的只有他一个人，车厢里一片死寂，蓄力满了却没有对手出现的感觉
同样糟糕。进入这里之后背上的胎记一直在灼烧，这个征兆不知道是好是坏。
楚子航把“村雨”刺入车顶，猛力横拉，而后纵切，在铁皮上割出足够一人进出的
口子。他像一尾鱼游进珊瑚洞里一样轻盈地跃入，落在地板上——满满一列地铁都是人
，他们站在绝对的黑暗中，没有人说话，也没有人动弹，每个人都抓着横杆，就像是一
群赶早班的上班族。楚子航站在他们中间，连呼吸都暂停了，那些“人”也没有一点呼
吸... 阅读全帖 |
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w*****d
发帖数: 57 | 14 http://china.caixin.com/2016-03-03/100915256.html
继鲁白打破沉默，直指张生家夺占其研究课题之后，张生家也投文财新网，坚称磁遗传
学是其研究组的成果。北大、清华校方至今未公布学术调查结果
【编者按】五个月前的一篇有关磁遗传学的论文，引发中国两所顶尖大学清华和北大的
三位研究人员间的论战。两方阵营一方指对方“抢发论文”“夺占课题”，另一方回应
对方“抢夺成果”。遗憾的是，北大、清华校方在进行学术调查后，至今未公布学术调
查结论。
2015年9月15日，中国科学院主办双周刊《科学通报》英文版发表了一篇关于动物磁感
应受体蛋白方面的论文，通讯作者为北京大学-清华大学生命科学联合中心学术带头人
张生家。然而，这篇论文的刊发引发了巨大争议。
北京大学生命科学学院学者谢灿认为，张生家违背了学术道德，在谢灿发现磁感应
蛋白（MagR）的原始论文尚未发表之时，用从谢灿处获得的MagR，未经同意私自“抢发
”了有关MagR应用的论文，并未给自己以合理的作者署名。
10月16日，清华停止了张生家入职的手续办理。张生家表示，没有调查结论就解聘
对他来说是不公正... 阅读全帖 |
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w*****d
发帖数: 57 | 15 http://china.caixin.com/2016-03-03/100915256.html
继鲁白打破沉默，直指张生家夺占其研究课题之后，张生家也投文财新网，坚称磁遗传
学是其研究组的成果。北大、清华校方至今未公布学术调查结果
【编者按】五个月前的一篇有关磁遗传学的论文，引发中国两所顶尖大学清华和北大的
三位研究人员间的论战。两方阵营一方指对方“抢发论文”“夺占课题”，另一方回应
对方“抢夺成果”。遗憾的是，北大、清华校方在进行学术调查后，至今未公布学术调
查结论。
2015年9月15日，中国科学院主办双周刊《科学通报》英文版发表了一篇关于动物磁感
应受体蛋白方面的论文，通讯作者为北京大学-清华大学生命科学联合中心学术带头人
张生家。然而，这篇论文的刊发引发了巨大争议。
北京大学生命科学学院学者谢灿认为，张生家违背了学术道德，在谢灿发现磁感应
蛋白（MagR）的原始论文尚未发表之时，用从谢灿处获得的MagR，未经同意私自“抢发
”了有关MagR应用的论文，并未给自己以合理的作者署名。
10月16日，清华停止了张生家入职的手续办理。张生家表示，没有调查结论就解聘
对他来说是不公正... 阅读全帖 |
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w*****d
发帖数: 57 | 16 http://china.caixin.com/2016-03-03/100915256.html
继鲁白打破沉默，直指张生家夺占其研究课题之后，张生家也投文财新网，坚称磁遗传
学是其研究组的成果。北大、清华校方至今未公布学术调查结果
【编者按】五个月前的一篇有关磁遗传学的论文，引发中国两所顶尖大学清华和北大的
三位研究人员间的论战。两方阵营一方指对方“抢发论文”“夺占课题”，另一方回应
对方“抢夺成果”。遗憾的是，北大、清华校方在进行学术调查后，至今未公布学术调
查结论。
2015年9月15日，中国科学院主办双周刊《科学通报》英文版发表了一篇关于动物磁感
应受体蛋白方面的论文，通讯作者为北京大学-清华大学生命科学联合中心学术带头人
张生家。然而，这篇论文的刊发引发了巨大争议。
北京大学生命科学学院学者谢灿认为，张生家违背了学术道德，在谢灿发现磁感应
蛋白（MagR）的原始论文尚未发表之时，用从谢灿处获得的MagR，未经同意私自“抢发
”了有关MagR应用的论文，并未给自己以合理的作者署名。
10月16日，清华停止了张生家入职的手续办理。张生家表示，没有调查结论就解聘
对他来说是不公正... 阅读全帖 |
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w*****d
发帖数: 57 | 17 http://china.caixin.com/2016-03-03/100915256.html
继鲁白打破沉默，直指张生家夺占其研究课题之后，张生家也投文财新网，坚称磁遗传
学是其研究组的成果。北大、清华校方至今未公布学术调查结果
【编者按】五个月前的一篇有关磁遗传学的论文，引发中国两所顶尖大学清华和北大的
三位研究人员间的论战。两方阵营一方指对方“抢发论文”“夺占课题”，另一方回应
对方“抢夺成果”。遗憾的是，北大、清华校方在进行学术调查后，至今未公布学术调
查结论。
2015年9月15日，中国科学院主办双周刊《科学通报》英文版发表了一篇关于动物磁感
应受体蛋白方面的论文，通讯作者为北京大学-清华大学生命科学联合中心学术带头人
张生家。然而，这篇论文的刊发引发了巨大争议。
北京大学生命科学学院学者谢灿认为，张生家违背了学术道德，在谢灿发现磁感应
蛋白（MagR）的原始论文尚未发表之时，用从谢灿处获得的MagR，未经同意私自“抢发
”了有关MagR应用的论文，并未给自己以合理的作者署名。
10月16日，清华停止了张生家入职的手续办理。张生家表示，没有调查结论就解聘
对他来说是不公正... 阅读全帖 |
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c*********e
发帖数: 1 | 19 1. Never expect to isolate a large amount Plasmid DNA from yeast.
2. What I did is:
Incubate lytic enzyme with your yeast for an hour. Then followed the
BioRad kit miniprep protocol, start from lysis solution (equal to solutionII
in classical protocol). I guess kits from other companies are also work.
At the end, elute your DNA from matrix with 20microliter of TE instead of 100
microliter. One microliter of such extract is sufficient for a bacteria
transformation, even though it's CEN plasmi |
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b**y
发帖数: 70 | 20 要是样品已经有人做过，一般三天出结果。
话说现在也没什么样品（至少同一个种）没人做过了吧。关键是研究好你的样品用什么
方法抽提蛋白最好，后面真正做一向二向只是程式化的流程。 |
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a********x
发帖数: 94 | 21 很多人做过了。
我只是要知道那个蛋白（一种酶）在不同细胞里面的含量， 所以要重复别人的试验，
我暂时想用不同的方法去得到结果，2d使我想用的一种，很多人做过了。
我是新手，连strip还没买，现在系里面有一个bio-rad protean ief cell。
抽提蛋白？2d gel不是把蛋白都弄成一个点阵图然后digestion么？？
谢谢指教。 |
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b**y
发帖数: 70 | 22 只是验证别人的那就按照别人的方法提取蛋白跑胶就是了。
我说的抽提就是指从组织或者细胞提到蛋白 |
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v*********i
发帖数: 40 | 23 全细胞蛋白做WB。
以前我是这样做的：
转染之后，6 cm 板（5×10^6)直接拿200 ul PBS冲下来，加过量的5 × SDS PAGE
loading buffer （我一般加80 ul），95度煮30 min；然后 13000 rpm 离心 10 min。
基本看不到沉淀。
然后取10 ul 跑胶WB；因为转染起始细胞数目一样，所以基本不调平，看到的beta-
actin就是平的。
现在的老板说我这样做不对，因为没有测蛋白浓度。他要看到我把每个样品的浓度都写
到本子上；还说直接煮不能溶解全部的蛋白（FT）。他很固执，我只好按他的做：
转染之后，6 cm 板用RIPA buffer 800 ul, 加那个Roche Cocktail蛋白酶抑制剂， 冰
上放30 min，然后 13000 rpm 离心 10 min，结果看到大量沉淀。我感觉沉淀跟直接低
速离心收细胞的沉淀差不多。是不是细胞都没破裂啊?
哎，连个成熟的protocol都木有……
谁能给我个完整成熟可靠的呀?说的详细点。
谢谢。
p.s.
我不放心，现在把那个裂解液又拿去超声了；可是超声仪太古老，上面没有能量显示… |
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q******g
发帖数: 3858 | 25 你的第一个方法其实可以。你只要定一下蛋白，知道自己跑了多少微克的蛋白就成了。 |
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q******g
发帖数: 3858 | 26 RIPA buffer是比较强的裂解液，容易使细胞核裂解，染色体DNA出来。超声后，DNA断
裂，就看不到那些沉淀了。 |
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v*********i
发帖数: 40 | 27 但是加了SDS PAGE loading buffer 还怎么定量呀? |
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v*********i
发帖数: 40 | 28 这是不是意味着，我看到沉淀那一步，细胞质和核内的蛋白都已经溶解到上清里面了；
并不需要再超声，对吗? |
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a***e
发帖数: 1010 | 29 quantitate before adding SDS loading buffer. |
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a***e
发帖数: 1010 | 30 yeah.
for nuclear proteins, some people even add several rounds of freeze-thaw
to increase their release. |
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v*********i
发帖数: 40 | 31 直接煮的话不是PBS悬起来，加了SDS PAGE loading buffer之后，再放到95度煮30min？
那怎么定量呢? |
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s*i
发帖数: 20 | 32 Change boss if you still can, seriously.
What you are doing is ok, you can even skip centrifuging. Sonicating and
heating in SDS buffer is enough. |
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y***k
发帖数: 60 | 33 你这么做没办法测蛋白浓度吧，只能直接跑胶看看内参平不平
30min？ |
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a*****n
发帖数: 2835 | 34 两种方法都没有问题
这种实验你自己看文献就能解决
不一定都要定蛋白浓度，定量作不好也定不准，一般的时间就是比较相对的量，所以只
要上样一样多就行了 |
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v*********i
发帖数: 40 | 35 是的耶。其实根据原理自己也能判断我的做法应该没问题；而且以前、别人都是这么做
的。
我郁闷的是老板说我这么做不对，还指责我，还说你要是不会做就问问其他人，看看人
家是怎么做的。可是我明明会做，而且做的是对的。
所以想发上来让大家评评理。
我直接加SDS PAGE loading buffer到PBS悬起来的细胞里面煮，老板一听就说怎么能这
么做，你这么做是错的……不能用SDS loading buffer，这个是跑胶的时候上样用的，
你提细胞里的蛋白得用RIPA buffer。
还说，你怎么不加蛋白酶抑制剂。我解释说里面有高浓度的SDS，再煮过，不需要加蛋
白酶抑制剂了，因为蛋白酶已经变性了呀（我的解释对不对??????）
可是老板说做蛋白都得加蛋白酶抑制剂，你不是说自己以前做过很多蛋白质实验吗，你
要是没做过就说没做过，我可以让其他人教你，你要是不知道怎么做，要主动问别人，
看看人家怎么做的，等等。
还说，你怎么不测蛋白浓度；我就解释说我觉得不需要测蛋白浓度，以前我都不测，因
为转染的时候起始细胞数量是一样的，蛋白量应该差不多，加actin内参看一看就应该
知道平不平了；另外加了SD |
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v*********i
发帖数: 40 | 36 还有
如果真的需要超声，一般怎么设置呀? 超多久停多久，一共多久；需要多大的能量。
谢谢。 |
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v*********i
发帖数: 40 | 37 木有人告诉我超声该怎么设置……
我自己回复一下。 |
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a*****n
发帖数: 2835 | 38 什么乱七八招的
听你老板的就是了，反正他说得方法也没有错 |
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v*********i
发帖数: 40 | 39 那要是超声滴话，怎么设置呢?
多大能量，多长时间，超多久停多久，一共超声多久，etc。
谢谢哎 |
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y***k
发帖数: 60 | 42 你老板很tough啊，尽量少和他顶嘴，就按他说的做好了 |
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s******y
发帖数: 28562 | 43 你的方法没有问题，大部分实验室都这么做的。但是我不建议你和老板顶牛，你最好是
要分清矛盾的主次，不要为了这种小事情和他翻脸。
用RIPA buffer 并不能保证所有蛋白都溶解，而且里面的detergent 会干扰
Bradford protein assay,这个在大部分bradford assay的技术说明书里会提到。
你可以拿一个已知浓度的蛋白(such as BSA)，一半溶在PBS, 一般溶在RIPA buffer,
然后做这个Bradford assay, 体会一下，
你会发现溶在RIPA buffer 里的蛋白的数值和PBS里的不一样，而且仪器上
读出来的数值不稳定，每次重复测量读出来的数值都大大的不同。
注意先不要告诉老板！先自己偷偷做一个，心里有数，然后再跟老板讨论，装作
谦虚的说你听说RIPA buffer 有这个问题，然后建议你们作这个实验，然后
再当面重新作一次给他看. 注意这个顺序不能颠倒！一定要自己先做一次，知道
结果了，然后才装着和他讨论装着你是第一次做这个实验。
千万千万不要直接第一次就作给他看！否则万一你们的蛋白有问题，
或者你们的UV spec 有问 |
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j*****a
发帖数: 658 | 44 我觉得可以用RIPA + lowery assay or RIPA + BCA assay。 这两个assay，公司的说
明书上都说是detergent compatible的。 |
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T**********t
发帖数: 1604 | 47 你最好找到你那台老式超声仪的说明书看看输出能量是多少，找不到说明书的话，根据
型号google一下说不定能找到有用的信息。 |
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s*****g
发帖数: 7857 | 48 cell signaling # 9803
Cell Lysis Buffer (10X)
____________
1X Cell Lysis Buffer:
20 mM Tris-HCl (pH 7.5)
150 mM NaCl
1 mM Na2EDTA
1 mM EGTA
1% Triton
2.5 mM sodium pyrophosphate
1 mM b-glycerophosphate
1 mM Na3VO4
1 μg/ml leupeptin
adding 1 mM PMSF immediately before use. |
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